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Casierra-Posada - Digestibilidad de Glicine max Volumen 13 - No1 - Año 2009
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Efecto de Lactobacillus casei, Saccharomyces
cerevisiae,Rhodopseudomona palustris
(microorganismos eficientes em) y melaza en la
ganancia de peso de tilapias (Oreochromis sp) en
condiciones de laboratorio
The effect of lactobacilluscasei,saccharomyces
cerevisiae,rhodopseudomonapalustris (beneficial and
effective microorganisms - em) and molasses on tilapia
(oreochromis sp) weight-gain in laboratory conditions
Guillermo Ladino-Orjuela1 José A. Rodríguez-Pulido 2
1 Grupo de investigación en alimentación y nutrición de organismos acuáticos GRANAC, Instituto de
Acuicultura de los Llanos, ambos.ong@gmail.com
2 Grupo de Investigación en Reproducción y Genética Animal. Universidad de los
Llanos.iioc@unillanos.edu.co
Recibido: Noviembre 24 de 2008. Aceptado: Febrero 17 de 2009
RESUMEN
La combinación de una bacteria acido láctica, una bacteria fototrófica y una levadura también conocida como
EM (effective microorganisms), se le reconoce capacidad sinérgica, sintrópica y metabiotica para disminuir de
la capacidad contaminante de las aguas servidas. La MO de los estanques acuícolas la cual, normalmente se
vierte, podría ser utilizada como sustrato para el crecimiento de los EM. Los microorganismos pueden servir de
alimento a los peces y disminuir tanto los vertimientos a los cuerpos de agua como el consumo de alimento
concentrado. Se evalúo el efecto de un cultivo comercial de EM en la ganancia de peso de alevinos de tilapia
Oreochromis sp. Alevinos (n=10) con un peso promedio de 0,604 ± 0,059 g, fueron ubicados durante un periodo
de 2 semanas en 10 contenedores plásticos de 25 litros, en condiciones de laboratorio. Se utilizaron cinco
contenedor es como cont rol (T1), los cinco restantes (T2) reci bieron dos mililitros diarios de un producto com ercial
compuesto por Lactobacillus casei; Saccharomyces cerevisiae, Rhodopseudomona palustris cada uno con
106 unidades formadoras de colonias suspendidas en una mezcla de melaza y agua. El alimento proporcionado
consistió en un producto comercial con 40% de proteína, la ración alimenticia fue igual al 6% del peso inicial
de los peces. El pH de los contenedores, se mantuvo estable en 6,7, la temperatura en 27 grados y el oxígeno
en 7 ppm. No hubo recambio de agua y si aireación permanente. El agua de los contenedores del tratamiento,
inicialmente tomó una coloración más oscura, sin embargo para el final del experimento, el agua de los dos
tratamientos tenía la misma tonalidad. Los peces, presentaron lesiones oculares posiblemente por la marcada
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agresividad mostrada durante la investigación. La ganancia de peso con T1 mostró una ganancia de peso de
0.7321 g ± 0.2126 con un coeficiente de variación de 29.05. Para T2 se evidenció una ganancia de peso de
0.8034 gm ± 0.095 con un coeficiente de variación de 11.87. No hubo diferencia estadística significativa p<0.05.
Palabras clave: Cero recambio, Microorganismos eficientes, relación C:N,Tilapia.
ABSTRACT
The synergic, syntropic and metabiotic ability of a combination of lactic acid bacteria, phototrophic bacte-
ria and yeast (also known as effective microorganisms – EM) to reduce residual water contamination is
well recognised. Fish ponds’ organic matter (which would normally be eliminated) could be used as
substrate for EM culture. Microorganisms can serve as both fish-food and reduce effluents in water bodies
and concentrated food consumption. The effect of a commercial EM culture was evaluated on tilapia
(Oreochromis sp) fry weight-gain. Fry (n=10) having an average 0.604 ± 0.059 g weight were placed in ten
25 l plastic containers in laboratory conditions for 2 weeks. Five containers were used as control (T1); the
other five (T2) were inoculated daily with 2 ml of a commercial product consisting of Lactobacillus casei,
Saccharomyces cerevisiae, Rhodopseudomona palustris, each having 106colony forming units in water-
molasses suspension. The feed provided was a commercial product having 40% protein (feed ration was
equal to 6% of the fish’ initial weight). Container pH was kept stable at 6.7, temperature at 27°C and
oxygen at 7 ppm. There were no water exchanges; there was permanent aeration. Treatment tank water
was initially dark; however, when the assay finished all the containers had the same colour. Fish had
lesions to their eyes, possibly due to the marked aggressiveness exhibited during the investigation. T1
had 0.7321 g ± 0.2126 weight-gain with 29.05 variation coefficient. T2 had 0.8034 g ± 0.095 weight-gain,
11.87 variation coefficient. No statistical difference was found (p<0.05).
Keywords: Zero exchange, Effective microorganisms, C:N ratio, Tilapia.
INTRODUCCIÓN
La acuicultura en el mundo ha crecido en forma
sostenida durante los últimos años producto del
aumento en la demanda de los productos cárnicos
acuícolas. Esta circunstancia ha presionado la
intensificación de los sistemas de producción que
han encontrado su mayor dificultad en la afectación
de la calidad del agua causada por la acumulación
de materia orgánica. Disminución de los niveles de
oxígeno y producción de metabolitos tóxicos son
situaciones que deben evitarse y para ello los
productores disponen de diversas alternativas en-
tre las que se tienen a) cultivos bacterianos
heterotróficos también denominados biofloc
(Avnimelech, 2006; Azim, 2008; Schneider, 2006b),
b) sistemas de recirculación de agua (Neori, 1996;
Seginer, 2008) y c) diferentes combinaciones de
microorganismos denominados eficientes (EM)
(Higa, 1994). El enfoque de cada una de estas
alternativas v aría en su objetivo final, por un lado los
nutrientes, por otro el recurso agua y finalmente la
contaminación.
Los denominados bioflocs están constituidos por
agregados de bacterias heterótrofas, fitoplancton,
zooplancton y hongos entre otros microorganismos
los cuales se desarrollan a partir de la materia
orgánica disponible en el medio acuático. En
términos generales, las bacterias heterótrofas son
pioneras en la conformación del biofloc razón por la
cual se ha enfatizado en su estudio a fin de lograr
un mayor entendimiento del proceso de
conformación y funcionamiento del mismo.
Schneider (2006a) encontró que los efluentes
resultantes de sistemas productivos acuícolas ricos
en materia orgánica pueden ser utilizados como
medio para la producción de bacterias heterotróficas
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las cuales a su vez pueden ser consumidas por los
peces como fuente de proteína. En igual sentido
Avnimelech (1999), Crab (2007) y De Schryver (2008)
reportan la posibilidad de utilizar las bacterias
heterotróficas como recicladoras de los desechos
de los peces (amonio, heces) al convertirlos en
proteína microbiana útil como alimento que puede
ser consumido por las tilapias gracias a sus hábitos
alimenticios (Castillo, 2001). Se reporta una mayor
ganancia de peso en tilapias alimentadas con una
combinación de biofloc y alimento concentrado
(Avnimelech, 2006; Azim, 2008). Sin embargo, el
crecimiento bacteriano está asociado a la relación
C:N existente en el medio la cual en condiciones
optimas debe encontrarse en un rango que varía de
15:1 - 20:1 (Asaduzzaman, 2008). Dentro de los
sistemas de producción intensivos los peces
excretan tal cantidad de nitrógeno que la relación
C:N puede ser del orden de 3:1. En estas
condiciones, la escasez de carbono organico
asimilable impide la incorporación del nitrógeno
circulante por parte de las bacterias (Avnimelech,
1999). Para alcanzar la relación requerida Burford
(2003) reporta el uso de acetato de sodio como
fuente de carbono orgánico sin embargo, los costos
de este han hecho prohibitivo su uso; razón por la
cual se está explorando actualmente el uso de otros
productos como la melaza (subproducto del
procesamiento de la caña durante la obtención del
azúcar) (Hamlin, 2008; Schneider, 2007) o harina
de yuca (Asaduzzaman, 2008) como sustitutos con
resultados similares a un menor precio. Una vez
obtenida la relación óptima, las bacterias a partir
de sus procesos metabólicos son capaces de
utilizar el nitrógeno inorgánico circulante reduciendo
su cantidad en la columna de agua y en el sedimento
de los cultivos. En los sistemas que emplean la
tecnología del biofloc no se plantea el retiro de los
metabolitos ni la materia orgánica acumulada sino
su reciclaje.
Por otra parte, los sistemas de recirculación en
acuicultura RAS (Recirculating aquaculture system),
buscan disminuir el consumo operacional de agua
y al tiempo ev itar el vertimiento de desechos. Están
diseñados de tal forma que el agua efluente de los
estanques una vez se somete a un proceso de
descarga o disminución de metabolitos y materia
orgánica, es reutilizada como afluente de los
mismos estanques logrando con ello disminuir sus
requerimientos y una temperatura constante en el
sistema (Seginer, 2008), no obstante, el cuello de
botella de los sistemas de recirculación es mantener
la calidad del agua (Menasveta, 2001; Rijn, 1996).
La depuración del agua a menudo incluye el uso de
microorganismos junto con barreras físicas capaces
de capturar y procesar los productos indeseables
con lo que se recupera el agua pero muchos
nutrientes salen del sistema (Lackner, 2008; Singer,
2008).
Finalmente, la combinación de una bacteria acido
láctica, una bacteria fototrófica y una levadura
también conocida como EM (effective microorgan-
isms) se desarrolla en un medio con pH ácido de 4
o menor el cual es producto de la fermentación
anaeróbica de los carbohidratos contenidos en la
melaza, es promocionada por lo que han
denominado su capacidad sinérgica, sintropica y
metabiotica para ser empleada en muchos cam-
pos, multipropósito; uno de ellos es la disminución
de la capacidad contaminante de las aguas servidas
dada su capacidad para desdoblar la materia
orgánica. Sin embargo, no se conocen reportes en
acuicultura que permitan establecer su efectividad
en el mejoram iento de la calidad del agua empleada
en cultivo. Este estudio busca determinar, el posible
efecto de la combinación de Lactobacillus casei,
Saccharomyces cerevisiae y Rhodopseudomona
palustris EM asociado con melaza, sobre la
ganancia de peso de tilapias (Oreochromis sp).
MATERIALES Y METODOS
Diez 10 acuarios plásticos de 25 litros con 10
alevinos de tilapia (Oreochromis sp) cada uno con
un peso promedio de 0,604 ± 0,059 g provenientes
de una granja piscícola comercial ubicada en el
municipio de Cumaral - Meta. Durante el
experimento se proporcionó aireación permanente
Medina-Robles - crioconservados de cerdo
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mediante bombas marca RESUN referencia AC
1500, con piedras difusoras a la salida del ducto de
aire. No se practicó recambio de agua. Como
inóculo se utilizó un producto comercial cuyo
contenido de microorganismos corresponde a Lac-
tobacillus cassei;Saccharomyces cerevisiae,
Rhodopseudomona palustris con 106 unidades
formadoras de colonias por mililitro suspendidas en
una mezcla de melaza y agua. El alimento
proporcionado a los peces consistió en un producto
comercial del 40 % de proteína. El agua utilizada
en la experimentación provenía del acueducto mu-
nicipal por lo que fue dejada en reposo durante 5
días antes de iniciar la fase experimental dando
tiempo para que el contenido de cloro se evaporara.
Luego de pesados se colocaron 10 alevinos de Ti-
lapia en cada uno de los contenedores, la ración
alimenticia fue igual al 6% del peso inicial de los
peces cultivados distribuido en tres veces durante
el día durante toda la investigación. La cantidad de
alimento se proporcionó de acuerdo con la tabla de
suministro elaborada por el fabricante de
concentrado. Se hizo seguimiento permanente a
los parámetros pH, temperatura y oxigeno disuelto
con una sonda YSI 200. El pesaje antes y después
del experimento se hizo en una balanza analítica
Mettler Toledo AB 204-S con una sensibilidad de
0.0001 g.
Análisis estadístico
Se utilizo estadística descriptiva y una prueba de t
de student para establecer diferencias entre
tratamientos con un nivel de confianza del 95%, la
información fue procesada mediante el programa
GraphPad InStat.
RESULTADOS
La ganancia de peso de los animales sometidos al
tratamiento no tuvo diferencia significativa respecto
de los animales control. Se pudo establecer que
los contenedores del tratamiento desarrollaron
sedimentos con apariencia viscosa en tanto que
los contenedores control no. Tanto en el tratamiento
como en el control, el pH del agua se mantuvo
estable en 6.7, la temperatura fue estable en los 27
grados y el oxígeno estuvo en 7 ppm lo que significó
la existencia de una buena tasa de oxigenación del
agua de cultivo. Es necesario precisar que se
requería disponer de una buena oxigenación para
el desarrollo de peces.
Se pudo observar que el agua de los contenedores
del tratamiento inicialmente tomó una coloración
DISCUSIÓN
Los resultados mostraron una ganancia de peso
similar para los dos grupos, lo cual pudo obedecer
a que los microorganismos no ejercieron su actividad
en las condiciones del experimento. El agregado
microbiano empleado se desarrolla bien en
condiciones anaeróbicas a un pH menor de 4,
condiciones de oxígeno y pH diferentes a las
más oscura probablemente debido a la presencia
de la melaza en el cultivo microbiano, sin embargo
para el final del experimento, el agua de los 2
tratamientos tenía la misma tonalidad. Los peces
mostraron una marcada agresividad razón por la cual
es posible la presentación de lesiones oculares en
varios ejemplares.
La ganancia de peso T1 mostró una ganancia de
peso de 0.7321 gm ±0.2126 con un coeficiente de
variación de 29.0519. Para T2 se evidenció una
ganancia de peso de 0.8034 gm ± 0.095 con un
coeficiente de variación de 11.87. El análisis
estadístico muestra que no hubo diferencia
significativ a entre los dos tratamientos.
requeridas por las tilapias. Aunque los
microorganismos han sido promocionados por el
efecto multipropósito, el movimiento del agua y la
aireación permanente pudieron afectar su desarrollo.
La presencia de sedimento viscoso en T2 evidencia
un efecto del inoculo, posiblemente por una mayor
actividad microbiana dada la presencia de los
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carbohidratos de la melaza, lamentablemente el
estudio no incluyó la evaluación del sedimento
conformado por lo que no se pudo establecer, si las
microorganismos inoculados se desarrollaron en el
mismo. La relación C:N no fue determinada pero,
es posible decir que fue superior en T2 comparada
con T1 puesto que, solo T2 recibió melaza como
aporte de carbohidratos. En este orden de ideas,
puede pensarse que las condiciones desarrolladas
en la investigación son adecuadas para un cultivo
heterótrofo el cual requiere oxigenación y movimiento
permanente con un pH superior a 6.0 pero no para
el cultivo de microorganismos empleado.
Por otra parte, el tiempo empleado para la evaluación
del efecto del cultivo bacteriano posiblemente sea
muy estrecho para evidenciar diferencias
significativ as en la ganancia de peso de tilapias con
un peso promedio inicial de 0,604 ± 0,059 g
agregándoles 2 ml de la mezcla microbiana
compuesto por Lactobacillus cassei;Saccharomy-
cescerevisiae,Rhodopseudomona palustris con 106
unidades formadoras de colonias por mililitro
suspendidas en la mezcla de melaza y agua.
Los resultados obtenidos del presente estudio,
plantean nuevos ensayos relacionados con un
mayor tiempo de duración incluyendo como
elemento de análisis la mortalidad, parámetros de
calidad del agua como amonio, evaluación del total
de sólidos suspendidos volátiles, crecimiento
bacteriano y caracterización del sedimento.
Igualmente, la inclusión de una nueva unidad de
paso del agua experimental en condiciones
anaeróbicas inoculada con el cultivo de
microorganismos.
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AGRADECIMIENTOS
A los funcionarios y contratistas del laboratorio de
nutrición en organismos acuáticos GRANAC del
Instituto de Acuicultura de los Llanos de la
Universidad de los Llanos por los aportes a este
documento y al profesor Gustavo Lenis por su
colaboración.
Medina-Robles - crioconservados de cerdo
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