ArticlePDF Available

Role of natural killer cells in reproductive failure

June 2017
Journal of obstetrics and women s diseases 66(3):143-156

DOI:10.17816/JOWD663143-156

License
CC BY-SA 4.0

Authors:

Alana Olegovna Agnaeva

Research Institute of Obstetrics and Gynecology named after D.O. Ott

Olesya N Bespalova

Research Institute of Obstetrics and Gynecology named after D.O. Ott

Dmitriy I Sokolov

Research Institute of Obstetrics and Gynecology named after D.O. Ott

Sergey Alekseevitch Selkov

Research Institute of Obstetrics and Gynecology named after D.O. Ott

Show all 5 authorsHide

Reproductive losses are quite frequent in the modern world. They include: infertility, infertility of unknown etiology, multiple losses when IVF, recurrent implantation failure, miscarriage, recurrent miscarriage, both in the natural cycle and after ART management. It is important to note that the classification of some of these categories are not established yet. The etiology of reproductive losses is extremely diverse. Successful development of pregnancy at early terms is determined by genetic and immunological factors. Among the reproductive failures of unclear etiology, immunological causes are 50-80%. Over the past 20 years there are already known many different immunological factors that play role in the processes of fertilization. In this case, the evidence base on the role of each of them in the pathogenesis of reproductive failures is only being formed. Currently, the immunological relationship between mother and fetus is considered as a two-way communication process: the presentation of fetal antigens on the one hand, and on the other - the recognition and response to these antigens of the maternal immune system. Implantation of the embryo is accompanied by an increase in the production of proinflammatory cytokines followed by a sharp change in the cellular composition in the decidualizing endometrium, and the main population is NK cells. That is why this type of cells have a significant role in the normal development of pregnancy. The properties of NK cells in the uterus and peripheral blood are significantly different. To predict the onset and prolongation of pregnancy, peripheral blood NK (activity and quantity) is used. Evaluation of endometrial NK is often performed for the diagnosis of chronic endometritis. Currently, the definition of NK cells in peripheral blood in many clinics is proposed as a useful diagnostic test to address the issue of further appointment of immunoglobulins and evaluating the effectiveness of this therapy in patients with reproductive losses. (For citation: Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. 2017;66(3):143-156. doi: 10.17816/JOWD663143-156).

No caption available

…

Figures - available via license: Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International

Content may be subject to copyright.

Available via license: CC BY-SA 4.0

Content may be subject to copyright.

ISSN 1684–0461

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

143

ОБЗОРЫ

УДК 618.39-07

DOI: 10.17816/JOWD663143-156

РОЛЬ ЕСТЕСТВЕННЫХ КИЛЛЕРОВ (NK-КЛЕТОК) В РЕПРОДУКТИВНЫХ ПОТЕРЯХ

1, О.Н. Беспалова

1, Д.И. Соколов

1, 2, 3, С.А. Сельков

1, И.Ю. Коган

1 ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», Санкт-Петербург;

2 ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет

им.академика И.П. Павлова» Минздрава России, Санкт-Петербург;

3 ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины», Санкт-Петербург

Для цитирования: Журнал акушерства и женских болезней. – 2017. – Т. 66. – № 3. – С. 143–156. doi: 10.17816/JOWD663143-156

Поступила в редакцию: 21.03.2017 Принята к печати: 15.05.2017

■ Достаточно частым явлением в современном мире являются репродуктивные потери. К репродуктивным не-

удачам относят: бесплодие, в том числе неясного генеза, многократные неудачи ЭКО, многократные имплан-

тационные потери— как однократное самопроизвольное прерывание беременности, так и привычная потеря

плода— в естественном цикле и после применения вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). В на-

стоящее время единого определения и классификации репродуктивных потерь нет. Этиология репродуктивных

потерь как в естественном цикле, так и после ВРТ чрезвычайно разнообразна. Удачное развитие беременности на

ранних сроках определяют генетические и иммунологические факторы. Среди репродуктивных неудач неясной

этиологии иммунологические причины составляют 50–80 %. За последние 20 лет доказано участие большого чис-

ла различных иммунологических факторов в процессах оплодотворения, имплантации и плацентации. Приэтом

доказательная база о роли каждого из них в патогенезе репродуктивных неудач только формируется. В насто-

ящее время иммунологические взаимоотношения между матерью и плодом рассматривают как двусторонний

коммуникационный процесс: с одной стороны, презентация фетальных антигенов, а с другой— распознавание

и реагирование на эти антигены материнской иммунной системы. Имплантация эмбриона сопровождается уси-

лением продукции провоспалительных цитокинов за счет привлечения лейкоцитов и резким изменением кле-

точного состава в децидуализированном эндометрии, в котором основную популяцию составляют NK-клетки,

в результате чего им отводят главную роль в нормальном развитии беременности на ранних сроках. NK-клетки

относят к системе врожденного иммунитета. Им не требуется предварительной сенсибилизации для осущест-

вления своих защитных функций. Их мишенями становятся все клетки, лишенные молекул главного комплекса

гистосовместимости I класса на поверхности мембраны. Свойства NK-клеток в матке и периферической крови

значительно отличаются: они имеют различную цитотоксичность, секреторный цитокиновый профиль, экс-

прессируют разные рецепторы, обладают разным иммунорегуляторным потенциалом. Для прогнозирования

наступ ления и пролонгирования беременности используют NK периферической крови (активность и количе-

ство). Оценка эндометриальных NK чаще проводится для диагностики хронического эндометрита. На настоя-

щий момент определение NK-клеток в периферической крови рассматривают как полезный диагностический

тест для формулирования показаний к назначению иммуноглобулинов и оценки эффективности данной терапии

упациенток с репродуктивными потерями.

■ Ключевые слова: привычная потеря беременности; многократные неудачи; NK-клетки; иммунология репро-

дукции; внутривенное введение иммуноглобулинов (ВВИГ).

ROLE OF NATURAL KILLER CELLS IN REPRODUCTIVE FAILURE

1, 2, 3, S.A. Selkov

1, I.U. Kogan 1

1 FSBSI “The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott”,

Saint Petersburg, Russia;

2 I.P. Pavlov First St Petersburg State Medical University of the Ministry of Healthcare of the Russian

Federation, Saint Petersburg, Russia;

3 FSBSI “Institute of Experimental Medicine”, Saint Petersburg, Russia

For citation: Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. 2017;66(3):143-156. doi: 10.17816/JOWD663143-156

Received: 21.03.2017 Accepted: 15.05.2017

ISSN 1684–0461

144 ОБЗОРЫ

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

Репродуктивные потери являются акту-

альной проблемой современного акушерства

игинекологии. Кним относят бесплодие, не-

эффективные протоколы ЭКО, самопроиз-

вольное прерывание беременности, втом чис-

ле привычное невынашивание. Установлено,

что только около 30 % концептов (продуктов

зачатия) при естественном планировании бе-

ременности у человека завершается родами,

около 50 % — прерывается еще до наступле-

ния очередной менструации (так называе-

мые доклинические потери беременности),

а 15–20 %— приходится напотери клиниче-

ской беременности [1, 2].

В настоящее время несформулировано уни-

фицированное определение понятия «много-

кратные или повторные неудачи ЭКО». Одни

авторы в его основу закладывают количество

неэффективных циклов ВРТ (2 иболее; 3 ибо-

лее) [3–5], другие— дополняют информацией

околичестве и качестве перенесенных эмбри-

онов [6]. Например, 8 эмбрионов на стадии

дробления или 4 — на стадии бластоцисты

в2–6 циклах ЭКО [7]. Помнению профессора

L. Polanski (2014), повторные неудачи ВРТ —

это отсутствие имплантации, определяемой

поуровню ХГЧ всыворотке крови на14-й день

после переноса эмбрионов хорошего качества,

вдвух иболее последовательных циклах ЭКО.

При этом общее количество перенесенных эм-

брионов должно быть не менее четырех (для

эмбрионов настадии дробления) или неменее

двух (для бластоцист) [8].

Имеются также некоторые несоответствия

и в определении привычного невынашива-

ния беременности (ПНБ). Так, Королевский

колледж акушеров и гинекологов (RCOG)

иЕвропейское общество репродукции человека

иэмбриологии (ESHRE) определяют ПНБ как

последовательную потерю трех иболее беремен-

ностей до 24 недель, Американское общество

репродуктивной медицины (ASRM)— 2потери

до20 недель. В Российской Федерации тради-

ционно кПНБ относят 2 иболее прерывания

беременности, а обследование пар с данной

проблемой многие рекомендуют начинать уже

с1-го выкидыша [9–11]. Кроме этого, внекото-

рых странах биохимическая беременность (бе-

ременность, зафиксированная по повышению

уровня ХГЧ) невключается впонятие «потери

беременности» [12].

Максимальное число прерываний бере-

менности происходит вI триместре, причем

около 70 % — до 8 недель. Досих пор при-

нято считать, что спорадическое прерывание

беременности наранних сроках— это прояв-

ления естественного отбора: у60 %абортусов

диагностируется аномальный кариотип. При

этом при повторных потерях частота генети-

чески неполноценных эмбрионов значительно

ниже[13]. Помнению многих специалистов,

в80 % случаев причиной повторных прерыва-

ний беременности являются иммунологиче-

ские [14,15]. Среди иммунологических при-

чин принято выделять ауто- иаллоиммунные,

что определяет направленность иммунного

■ Reproductive losses are quite frequent in the modern world. They include: infertility, infertility of unknown etiology,

multiple losses when IVF, recurrent implantation failure, miscarriage, recurrent miscarriage, both in the natural cycle

and after ART management. It is important to note that the classification of some of these categories are not established

yet. The etiology of reproductive losses is extremely diverse. Successful development of pregnancy at early terms is de-

terminedby genetic and immunological factors. Among the reproductive failures of unclear etiology, immunological

causes are 50-80%. Over the past 20 years there are already known many different immunological factors that play role

in the processes of fertilization. In this case, the evidence base on the role of each of them in the pathogenesis of repro-

ductivefailures is only being formed. Currently, the immunological relationship between mother and fetus is considered

asatwo-way communication process: the presentation of fetal antigens on the one hand, and on the other– the recogni-

tion and response to these antigens of the maternal immune system. Implantation of the embryo is accompanied by an

increase in the production of proinflammatory cytokines followed by a sharp change in the cellular composition in the

decidualizing endometrium, and the main population is NK cells. That is why this type of cells have a significant role in

the normal development of pregnancy. The properties of NK cells in the uterus and peripheral blood are significantly

different. To predict the onset and prolongation of pregnancy, peripheral blood NK (activity and quantity) is used. Evalua-

tion of endometrial NK is often performed for the diagnosis of chronic endometritis. Currently, the definition of NK cells

in peripheral blood in many clinics is proposed as a useful diagnostic test to address the issue of further appointment of

immunoglobulins and evaluating the effectiveness of this therapy in patients with reproductive losses.

■ Keywords: recurrent pregnancy loss; recurrent implantation failure; NK-cells; reproductive immunology; IVIg.

ISSN 1684–0461

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

145

ОБЗОРЫ

ответа либо против собственных антигенов,

либо против антигенов плода. За последние

20 лет описано значительное число различ-

ных иммунологических факторов, имеющих

большое значение для процессов оплодот-

ворения, имплантации и плацентации. При

этомдоказательная база ороли каждого им-

мунологического фактора в патогенезе ре-

продуктивных неудач только формируется

(табл.1).

В настоящее время иммунологические взаи-

моотношения между матерью иплодом рассма-

тривают как двусторонний коммуникацион-

ный процесс: содной стороны— презентация

фетальных антигенов, а с другой — распоз-

навание и реагирование на эти антигены ма-

теринской иммунной системы. Определяет

механизмы иммунной привилегированности

прежде всего система врожденного иммуните-

та материнского организма. Имплантация эм-

Биомаркеры

Связь

спривычным

невынаши-

ванием

беременности

Прогности-

ческая

значимость Что нужно сделать?

Аутоантитела

АФА +++ ++

Стандартизация методов оценки

иреференсных значений.

Прогностические исследования

упациентов без лечения

Антитела ктканям

щитовидной железы,

антинуклеарные

антитела

+++ ? Прогностические исследования

упациентов без лечения

Растворимые

иммунологические

маркеры

Цитокины

периферической крови ??

Более чувствительные

инадежные методы

Маннозосвязывающий

лектин ++ + Дополнительные исследования

Клетки иммунной

системы Количество NK

периферической крови +?

Установление референсных

значений вразличные фазы

цикла ипри беременности

Активность NK

периферической крови +?

Эндометриальные

NK-клетки ?/+ ?

Установление референсных

значений вразличные фазы

цикла.

Стандартизация метода

Децидуальные

NK-клетки ?–

Подбор правильных

контрольных образцов

(анеуплоидные выкидыши?)

Т-регуляторные

клетки

периферической крови ??

Установление референсных

значений вразличные фазы

цикла. Стандартизация метода

Генетические

биомаркеры Полиморфизм генов

цитокинов ?–

Более крупные исследования.

Этническая идиагностическая

однородность групп пациентов

Совместимость

супругов посистеме

HLA +++ ++

Исследования сиспользованием

современных методов

Четкое определение критериев

совместимости аллелей

HLA II класса ++ + Более крупные исследования.

Исследования гомогенных

в отношении анамнеза

иэтнической принадлежности

групп

HLA-C, HLA-G + ?

Таблица 1

Иммунологические маркеры репродуктивных потерь

Table 1

Immunological markers of reproductive failure

ISSN 1684–0461

146 ОБЗОРЫ

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

бриона сопровождается усилением продукции

провоспалительных цитокинов за счет при-

влечения лейкоцитов с последующим резким

изменением клеточного состава в децидуали-

зирующемся эндометрии, вкотором основную

популяцию составляют NK-клетки, вследствие

чего им отводят главную роль в нормальном

развитии беременности наранних сроках [16].

Маточная плацентация характеризуется

прикреплением ворсин хориона кматеринской

базальной децидуальной оболочке иустановле-

нием функционального кровотока. Впроцессе

инвазии полуаллогенные клетки трофобласта

находятся втесном взаимодействии спопуля-

цией децидуальных NK-клеток, которые игра-

ют главную роль вангиогенезе имодификации

спиральных артерий, регулируют глубину ин-

вазии трофобласта [17, 18].

NK-клетки (natural killer cells) происходят

из гемопоэтической стволовой клетки: об-

разуется лимфоидная клетка-предшествен-

ник, которая дифференцируется в Т-клетки

(CD3+), В-клетки (CD19+) и натуральные кил-

леры (СD3–CD56+CD16+). Молекула CD16 для

данных клеток является одним из основных

рецепторов, передающих сигнал к активации,

иучаствует вобеспечении реакции антителоне-

зависимой клеточной цитотоксичности, атак-

же индукции секреции цитокинов. NK-клеткам

нетребуется предварительной сенсибилизации

для осуществления своих защитных функций.

Их мишенями становятся все клетки, лишен-

ные молекул главного комплекса гистосовме-

стимости I класса на поверхности мембраны.

Однако натуральные киллеры— это непросто

«киллеры» инфицированных или трансформи-

рованных клеток, помимо этого им присущи

иммунорегуляторные функции засчет продук-

ции различных цитокинов ихемокинов.

Действие NK-клеток тонко регулируется че-

рез сеть активирующих и ингибирующих ре-

цепторов на их поверхности: так называемые

killer immunoglobulin like receptor (KIR), NKG-

рецепторы (natural killer group), цитотоксиче-

ские рецепторы NKp30, NKp44, NKp46 идругие.

Дифференцировка, развитие, функциональные

и фенотипические свойства NK-клеток связа-

ны споследующим изменением репертуара ре-

цепторов, присутствующих наих мембране, что

всвою очередь влияет нанаступление иразви-

тие физиологической беременности [19].

У человека выделяют две функционально

различные подгруппы NK. Большинство кле-

ток периферической крови слабо экспресси-

руют СD56 иинтенсивно экспрессируют CD16

(CD56dim, CD16low). Для них характерно боль-

шое количество лизосомальных гранул, содер-

жащих гранзимы и перфорин. Другие попу-

ляции NK-клеток интенсивно экспрессируют

CD56 и слабо или совсем не экспрессируют

CD16 (CD56bright, CD16dim/low). Они облада-

ют регуляторными свойствами, однако под воз-

действием цитокинов свойства ифункции этих

клеток могут меняться [20]. Распространение

клеток CD56bright ворганизме неограничива-

ется кровью иэндометрием. Эта группа клеток

составляет основную массу лимфоцитов влим-

фатических узлах, миндалинах, желудке, пече-

ни, висцеральной жировой ткани. Ав легких,

почках, молочных железах, костях, селезенке,

наоборот, преобладают CD56dim.

В эндометрии зернистые лимфоциты были

описаны около 100лет назад. Но только спо-

явлением методов иммуногистохимического

анализа в 90-х гг. британскими учеными эти

клетки были отнесены к линии natural killer

cells [21, 22]. После этого был введен термин

uterine natural killer cell (uNK), тоесть маточ-

ные NK-клетки. Вотличие отпериферической

крови, в эндометрии преобладают NK-клетки

CD56bright. Вне зависимости от фазы мен-

струального цикла, uNK-клетки составляют

минимум 30 % отобщего количества эндоме-

триальных лимфоцитов, в секреторную фазу

их количество прогрессивно увеличивается,

ивслучае наступления беременности, наран-

них сроках, достигает 70 % (рис. 1).

Что касается NK-клеток периферической

крови, то, по данным литературы, значитель-

ных изменений вих количестве вфолликуляр-

ную илютеиновую фазы менструального цикла

непроисходит [23, 24]. Входе исследований, из-

учающих изменения активности перифериче-

ских NK-клеток вовремя менструального цик-

ла, были получены неоднозначныерезультаты:

либо отсутствие изменений в течение цик-

ла[24], либо снижение активности NK-клеток

влютеиновой фазе [25, 26].

При физиологическом течении беремен-

ности количество pbNK уменьшается глав-

ным образом в результате уменьшения ко-

личества CD16+ [27]. Кроме того, pbNK при

беременности демонстрируют снижение ци-

тотоксической активности [28]. В первые не-

дели беременности увеличивается экспрессия

ингибирующих рецепторов (различные KIR,

включая CD94/NKG2A), достигая максимума

ктретьему месяцу беременности, с последую-

ISSN 1684–0461

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

147

ОБЗОРЫ

щим снижением добазальных уровней кконцу

беременности[29, 30].

Изменения числа периферических NK-кле-

ток, их фенотипа иактивности впериод бере-

менности может быть свидетельством того, что

эти процессы имеют гормональную регуляцию.

Так, вработах С.В. Ширшева идр. (2008) уста-

новлено, что инкубация клеточных культур

NK-клеток сэстриолом вконцентрации, соот-

ветствующей I триместру беременности, сни-

жает процент лимфоцитов, экспрессирующих

CD16 [31]. При этом в концентрации, харак-

терной для III триместра беременности, гормон

неоказывает достоверного влияния наиссле-

дуемый показатель. Добавление в клеточные

культуры прогестерона в концентрации, со-

ответствующей Iтриместру беременности, до-

стоверно снижает уровень клеток CD3–CD16+.

При этом доза прогестерона, соответствующая

III триместру беременности, напротив, повы-

шает количество клеток CD3–CD16+ вкульту-

ре. Показано, что прогестерон самостоятельно,

атакже опосредованно через синтез прогесте-

рон-индуцируемого блокирующего фактора

(PIBF) способен угнетать цитолитический по-

тенциал NK-клеток [31, 32].

Вопрос пополнения пула маточных NK-

клеток остается на данный момент дискута-

бельным. Предполагается три возможных ис-

точника NK-клеток эндометрия:

• трансэндотелиальная миграция NK-клеток

из периферической крови вслизистую по-

лости матки;

• пролиферация NK-клеток in situ в эндоме-

трии;

• деление идифференцировка стволовых кле-

ток непосредственно всамом эндометрии.

В силу того что свойства NK-клеток вмат-

ке ипериферической крови значительно отли-

чаются (имеют различную цитотоксичность,

секреторный цитокиновый профиль, экспрес-

сируют разные рецепторы, имеют разный им-

мунорегуляторный потенциал), оценить им-

мунные процессы взоне плодово-материнского

контакта по характеристике NK-клеток пери-

ферической крови представляется не совсем

корректным. Нона настоящий момент изуче-

ние NK-клеток является одной изактуальных

и наиболее спорных проблем в области ре-

продуктивной медицины [33, 34]. Втабл.2 и3

приведены исследования, вкоторых пытались

оценить количество и активность NK-клеток

периферической крови иэндометрия, атакже

установить, имеетсяли связь этих показателей

срепродуктивными нарушениями.

Первое исследование, вкотором были полу-

чены данные отом, что уровень pbNK-клеток

может быть прогностическим фактором на-

ступления итечения беременности, проведено

в1995 г. J. Kwak иA. Beer вСША [35]. Врабо-

ту были включены 116 женщин с привычной

потерей плода неясной этиологии, ванамнезе

у которых было 3 и более потерь на ранних

сроках (35 из них были вновь беременны),

и45женщин спервичным бесплодием имного-

кратными неудачами ЭКО. Вгруппу контроля

Рис. 1. Процесс инвазии ворсин трофобласта

Fig. 1. The process of trophoblast villus invasion

ISSN 1684–0461

148 ОБЗОРЫ

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

Год Авторы Дизайн исследования Группы пациентов Результат

активность NK количество NK

1995 J. Kwak,

A. Beer

[54]

Оценивался

субпопуляцион ный состав

лимфоцитов, наличие АФА.

ПНБ— 3 иболее потери,

неудачи ВРТ— 3 иболее

ПНБ (116 жен.)

берем. инеберем.,

неудачи ВРТ

(45жен.), контроль

берем. инеберем.

–

Повышено (%)

уженщин сПНБ

наранних сроках,

уАФА-позитив-

ных женщин

наиболее высокий

уровень CD56+16+

1995 K. Higu-

chi et al.

[55]

ПНБ— 3 иболее потери ПНБ, контроль Повышена уженщин

сПНБ наранних

сроках

Повышено (%)

уженщин сПНБ

наранних сроках

2000 P. Em-

mer et

al. [56]

NK-клетки хранились

вжидком азоте.Затем

оценивалось их взаимо-

действие сК562 пореакции

высвобож дения Cr51

(ПНБ— 2 иболее потери

до16 нед.)

ПНБ (планирующие

беременность),

контроль

Выше вгруппе ПНБ

–

2001 E. Ntri-

valas et

al. [57]

Оценивалась экспрессия

CD94; CD69 наpbNK

изо лированно, затем

при культи вировании

склетками ED27, HT-29,

НТВ-26 (линейные

клет ки трофобласта,

коло ректального рака,

аденокарциномы молочной

железы)

ПНБ неясной

этиологии (22чел.),

St неясной этиологии

снеудачами ЭКО

(18чел.), контроль

(13)

Повышена вгруппе

ПНБ ибесплодия

посравнению

сконтролем. При

культивировании

склетками ED27

иHT-29 активность

достоверно

повышалась вовсех

группах

–

2002 S.S. Sou-

za et al.

[58]

ПНБ— 2 иболее потери ПНБ (нормаль ный

кариотип родителей),

контроль

Несколько ниже

вгруппе контроля Различий

неполучено

2003 H. Ya-

ma da et

al. [59]

Оценивали активность

NK-клеток наэтапе

планирования ипри

наступлении беременности

пореакции высвобождения

Cr51 при взаимодействии

сК562. IПНБ— 2 иболее

потери; II ПНБ— 3 иболее

потери после живорождения

I иII ПНБ (113 чел.),

у40 изних— ПНБ

неясной этиологии

У женщин сс/в

инормальным

кариотипом

достоверно выше,

чем вгруппе

живорождения

–

2006 R. Rous-

sev et al.

[60]

Определение активности

NK-клеток сК562

вприсутствии ВВИГ,

Intralid иHLA-G

ПНБ (110 чел.)

инеудачи ВРТ

(165 чел.)

Дозозависимое угнетение активности

NK. Вболее низких концентрациях

эффективнее оказались IL иHLA-G

2007 C. Rerri-

cone et

al. [61]

Оценивалось количество

NK-клеток (проточная

цитофлуориметрия)

ПНБ + АФС, ПНБ без

АФС, ПНБ неясной

этиологии; контроль

Наиболее высокие показатели NK

получены вгруппе ПНБ неясного генеза,

затем ПНБ + АФС, затем ПНБ без АФС.

Чем выше уровень NK, тем раньше

прерывалась беременность

2012 G. Sacks

et al.

[62]

Многократные неудачи

ВРТ— 3 иболее попытки

переноса свежих

либо замороженных

эмбрионов. Биохимическая

беременность

расценивалась как

выкидыш

Неудачи ВРТ

(171чел.), контроль В группе снеудачами

ВРТ достоверно

повышена. При

делении группы

взависимости

отпродолжительности

St или количества

попыток ВРТ

различий не получено

В группе

снеудачами

ВРТ достоверно

повышено

Примечание: ПНБ — привычное невынашивание беременности; АФА — антифосфо-липидные антитела;

ВРТ— вспомогательные репродуктивные технологии; ВВИГ — внутривенное введение иммуноглобулинов;

АФС — антифосфолипидный синдром

Таблица 2

Оценка NK-клеток в периферической крови при репродуктивных потерях

Table 2

Peripheral blood NK cell testing in reproductive failure

ISSN 1684–0461

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

149

ОБЗОРЫ

вошли 22здоровые беременные всроке 4–6не-

дель гестации и17 фертильных небеременных

женщин. Каждой пациентке проводился ана-

лиз субпопуляционного состава лимфоци-

тов периферической крови (CD3, CD4, CD8,

CD19, CD56). Было установлено, что уровень

NK-кле ток выше 18 % впериферической крови

является абсолютно «плохим» прогностиче-

скимфактором течения беременности (увсех

женщин беременность прервалась), а уровень

12–18 % — относительно неблагоприятным

маркером. Аналогичные результаты были по-

лучены вдругих исследованиях [36, 37].

С этого момента интерес к NK-клеткам

иих роли врепродукции значительно возрос.

Появилось большое количество работ, вкото-

рых было изучено содержание NK-клеток как

впериферической крови, так ивэндометрии.

Использовались методы проточной цитоме-

трии (материал для исследования — кровь

и эндометрий), иммуногистохимии (эндоме-

трий). Результаты варьировали взависимости

от того, в какую фазу менструального цикла

происходил забор крови/эндометрия; крите-

риев включения в исследование (2, 3 и более

потери беременности; первичное или вторич-

ное невынашивание или бесплодие и т. д.).

Оценка количества NK-клеток осуществлялась

ивабсолютных, ивотносительных значениях

отобщего числа циркулирующих лимфоцитов

[38, 39].

В 2014 г. в Великобритании был проведен

метаанализ, включавший всебя данные 22ра-

бот, опубликованных в MEDLINE, Embase,

Cochrane Library и Web of Science в период

с1950 по2012 г. Было показано, что количество

Год Автор Дизайн исследования Группы пациентов Результаты

1996 M. Lachapelle

et al. [63] БЭ на18–25 д.ц.

Проточная цитометрия.

ПНБ— 3 иболее

последовательных с/в

до12 нед.

Группа ПНБ— 20 чел.

(нормальный кариотип

родителей, без АФС)

В группе ПНБ

NK сфенотипом

CD16brightCD56dim выше,

чем вконтроле

1999 S. Quenby

et al. [64] БЭ 19–22 д.ц.

Иммуногистохимия.

ПНБ— 3иболее потери

беременности

ПНБ— 22 чел.

(нормальный кариотип

родителей, без АФС,

исключены эндокринные

причины) иконтроль

Более высокий процент

CD16+ иCD56+

посравнению сконтролем

1999 K. Clifford

et al. [65] БЭ 20–23 д.ц.

Иммуногистохимия.

ПНБ— 3иболее потери

беременности

ПНБ— 29 чел.

(нормальный кариотип

родителей, без АФС,

исключены эндокринные

причины) иконтроль

Повышенное количество

CD56+ уженщин

спотерями до13 нед.

2002 P. Emmer

et al. [66] Соскоб изполости матки

после прервавшейся/

замершей беременности.

Иммуногистохимия.

ПНБ— 2иболее потери

до16 нед.

ПНБ— 9 чел.

(нормальный кариотип

родителей, без АФС)

иконтроль

Повышенная экспрессия

CD56+ иCD16+

2004 S. Shimada

et al. [67] БЭ всередину лютеиновой

фазы. Проточная

цитометрия. ПНБ—

2иболее потери

ПНБ— 20 чел.

(нормальный кариотип

родителей, без АФС,

тромбофилии, исключены

эндокринные причины)

иконтроль

Не получено различий

2002 T. Michimata

et al. [68] БЭ 18–21 д.ц.

Иммуногистохимия.

ПНБ— 2иболее потери

ПНБ— 17 чел.

(нормальный кариотип

родителей, без АФС,

исключены эндокринные

причины) иконтроль

Не получено различий

Примечание: ПНБ— привычное невынашивание беременности; АФС— антифосфолипидный синдром; БЭ—

биопсия эндометрия

Таблица 3

Оценка NK-клеток в эндометрии при репродуктивных потерях

Table 3

Endomethrial NK cell testing in reproductive failure

ISSN 1684–0461

150 ОБЗОРЫ

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

NK-клеток достоверно неотличалось вгруппах

пациенток сбесплодием иПНБ ифертильных

женщин. Однако вэтомже метаанализе ужен-

щин срепродуктивными потерями количество

периферических NK-клеток в абсолютных

числах достоверно отличалось по сравнению

с контролем [40]. Вместе с тем нужно учиты-

вать, что вданный метаанализ вошли работы,

в которых осуществлялись разные методи-

ческие подходы к оценке NK-клеток (разные

фазы менструального цикла, учет стрессорных

воздействий, наличие вирусных заболеваний,

различные особенности лабораторной диа-

гностики и т. д.). Но,несмотря на отсутствие

единых стандартизированных норм и правил

определения NK-клеток в периферической

крови, в мировых иммунологических клини-

ках порепродуктологиианализ насодержание

и активность NK-клеток является обязатель-

ным диагностическим маркером для расче-

та рисков неудач беременностей, в последнее

время совместно сдругими маркерами рассма-

тривается как показание для назначения имму-

нотерапии— внутривенного введения иммуно-

глобулинов (ВВИГ).

Препараты иммуноглобулинов для вну-

тривенного введения занимают все более зна-

чимое место в практической медицине, в том

числе вакушерстве, гинекологии ирепродук-

тологии. Впервые с1935 г. в практику вошло

парентеральное применение иммуноглобули-

на человека вкачестве средства лечения кори.

Внутривенное введение иммуноглобулинов

стало возможным после того, как E.J. Cohn et

al. в1946 г. описали метод выделения иммуно-

глобулинов путем спиртового фракционирова-

ния плазмы человека [41]. Несмотря надока-

занную эффективность ВВИГ при целом ряде

иммунопатологий, их клиническое применение

в первую очередь ограничивается из-за высо-

кой стоимости, ав репродуктологии из-за от-

сутствия единых показаний, сроков, доз вводи-

мых препаратов иконтроля иммунологических

показателей [42, 43].

Основным механизмом иммуностимулиру-

ющего действия ВВИГ является нейтрализация

антигена за счет естественного титра антител,

содержащихся впрепаратах. Также ВВИГ спо-

собно сдвигать Тх1-Тх2 в сторону активации

клеточного иммунного ответа [44, 45].

Возможно, положительный эффект приме-

нение ВВИГ у пациенток с репродуктивными

потерями связан сблагоприятными отсрочен-

ными процессами, основанными на иммуно-

модулирующем действии нормальных антител

наТ- иВ-лимфоциты имакрофаги, снижении

интенсивности повреждения мембран клеток

ферментами системы комплемента, а также

на ингибировании синтеза алло- и аутоанти-

тел потипу механизма обратной связи исни-

жении количества и цитотоксической актив-

ности NK-клеток [46]. Поэтому применение

ВВИГ в комплексной терапии тяжелых форм

репродуктивных неудач иммунологической

этиологии может быть патогенетически обо-

снованным[47].

Применение ВВИГ врепродуктологии счи-

тается off-label: нет клинических рекоменда-

ций, четких показаний и правил применения

иммуноглобулинов при неудачах имплантации

иранних потерях беременности [48]. Вакушер-

стве не существует обязательных показаний

для назначения иммуноглобулинов, но допу-

стимо использование ВВИГ в двух направле-

ниях: как заместительную терапию при иммун-

ной защите от инфекционных заболеваний

бактериальной и смешанной этиологии и для

регуляции или модуляции иммунитета при

состояниях, в основе которых лежат иммуно-

логические механизмы (аллоиммунные, транс-

плацентарные). Фармакокинетика эндогенных

высокомолекулярных белков при ВВИГ значи-

тельно отличается отвведения синтетических

препаратов, их биодоступность приближается

к100 %, апродолжительность действия состав-

ляет 3–4 недели. Впроведенных исследованиях

поприменению ВВИГ обращают на себя вни-

мание различия в подходах к формированию

групп пациенток, использование различных

схем идозировки иммуноглобулинов, при этом

вбольшинстве случаев эффективность терапии

оценивают на основании исходов беременно-

сти (аименно живорождение), аконтроль им-

мунологических показателей непроводят [49].

Впервые терапия ВВИГ была назначена па-

циенткам спривычными потерями при отсут-

ствии положительных результатов после при-

менения преднизолона игепарина. Упациенток

с верифицированным диагнозом антифосфо-

липидного синдрома эффективность ВВИГ

достигала 70–80 % [50, 51]. У женщин с ПНБ

неясной этиологии результаты были неодно-

значны[52]. Так, из10 контролируемых иссле-

дований, вкоторых применялось ВВИГ, только

в четырех частота живорождения достоверно

была выше. В остальных 6 этот показатель

не отличался. Важно отметить, что в каждом

из этих исследований количество пациентов

ISSN 1684–0461

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

151

ОБЗОРЫ

было разным (от30 до150); терапию иммуно-

глобулинами начинали как до беременности,

на этапе планирования, так и во время бере-

менности — с 6–8 недель; группы пациенток

формировались либо наосновании акушерско-

го анамнеза, либо на основании иммунологи-

ческого обследования; дозы и кратность вво-

димых иммуноглобулинов заметно отличались

(табл. 4). В5 работах терапия начиналась еще

наэтапе планирования беременности, ив4 из5

была доказана эффективность. В 3 исследова-

ниях показания кВВИГ основывались нетоль-

ко на акушерском анамнезе, но и на данных

иммунологического обследования, ивкаждом

изних эффективность была доказана. Следует

обратить внимание, что только водном изис-

следований определялся кариотип абортусов,

то есть процент потерь беременности ввиду

аномального кариотипа не учитывался вовсе,

а это те потери, на которые никакой метод

не смог бы повлиять. Можно также сказать

отом, что, поданным некоторых авторов, эф-

фективность ВВИГ зависела от вида ПНБ:

частота живорождений была выше в группе

вторичного ПНБ, чем при первичном ПНБ [52].

Чтоже касается пациенток сбесплодием неяс-

ного генеза имногократными неудачами ВРТ,

поданным метаанализа, проведенного в2013 г.

Li et al., вкоторый вошло около 8000 пациен-

тов, эффективность ВВИГ доказана утех, кому

терапия назначалась наосновании иммуноло-

гического обследования идонаступления бе-

ременности [53].

Таким образом, несмотря на интенсивные

исследования, роль NK-клеток и методы кор-

рекции их функциональной активности в ре-

продукции остаются спорными. Однако уже

сейчас можно утверждать, что NK-клетки яв-

ляются иммунологическим маркером неблаго-

получия в процессе наступления и развития

беременности. Но нужно помнить о том, что

NK — это интегральный показатель, кото-

рый зависит от многих факторов (пола, воз-

Год Авторы Сроки, схемы, дозы икратность внутривенного введения

иммуноглобулинов

1994 German RSA IVIg Study

Group [69] После наступления беременности («+» тест)— 30г, затем по20г каждые

3 недели до25–26 недель

1995 O.B. Christiansen et al.

[70] После наступления беременности— 35г в5/6 нед., 25г в7/8, 30г в28,

30, 32, 34 недели

1995 C.B. Coulamn et al. [71] До наступления беременности— 500мг/кг/месяц втечение 4 циклов.

При беременности— 500мг/кг/месяц до30–32 недель или дородов

1998 M.D. Stephenson et al. [72] До наступления беременности— 500мг/кг/месяц в фолликулярную

фазу втечение 6 циклов

1999 B. Jablonowska et al. [73] После наступления беременности— 20г каждые 3 недели

2002 O.B. Christiansen et al. [74] После наступления беременности— по0,8 г/кг до20 недель, затем

по1г/кг с20-й по26-ю неделю

2004 G. Triolo et al. [75] После наступления беременности— 0,4 г/кг/день втечение 2 дней.

Затем 1 раз вмесяц до31-й недели

2008 E.E. Winger et al. [76] До наступления беременности— 400мг/кг/месяц. Один раз

втечение1–3 менструальных циклов, затем после наступления

беременности («+» тест)— однократно

Таблица 4

Схемы, дозировки и кратность внутривенного введения иммуноглобулинов у пациенток с репродуктивными потерями

Table 4

Schemes, dosages and brevity of IVIG in patients with reproductive losses

Рис. 2. Содержание различных иммунологических

клеток в эндометрии в зависимости от фазы менстру-

ального цикла

Fig. 2. The content of various immunological cells in the en-

dometrium, depending on the phase of the menstrual cycle

ISSN 1684–0461

152 ОБЗОРЫ

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

раста, фазы менструального цикла, наличия

беременности, стресса, физической актив-

ности, наличия вирусных инфекций и т. д.).

Функциональная активность NK-клеток может

быть критерием для назначения иммуномоду-

лирующей терапии, вчастности ВВИГ, атакже

маркером контроля ее эффективности.

В настоящее время основной задачей, кото-

рая стоит перед исследователями, является раз-

работка стандартизированного метода оценки

активности NK-клеток и их количества в пе-

риферической крови, атакже разработка норм

(референсных значений) для здоровых фер-

тильных женщин иженщин спатологией.

Литература

1. Choudhury S. Human reproductive failure I: Immu-

nological factors. Human Reproduction Update.

2001;7(2):113-34. doi:10.1093/humupd/7.2.113.

2. Edmonds DK, Lindsay KS, Miller JF, et al. Early embry-

onic mortality in women. Fertil Steril. 1982;38(4):447-53.

doi: 10.1016/S0015-0282(16)46579-9.

3. Sermondade N, Delarouzière V, Ravel C, et al. Char-

acterization of a recurrent poor-quality embryo mor-

phology phenotype and zygote transfer as a rescue

strategy. Reprod Biomed Online. 2012;24(4):403-9.

doi: 10.1016/j.rbmo.2012.01.004. Epub 2012 Jan 24.

4. Tan B, Vandekerckhove P, Kennedy R, Keay S. Investi-

gation and current management of recurrent IVF treat-

ment failure in the UK. BJOG: An International Journal

of Obstetrics and Gynaecology. 2005;112(6):773-780.

doi: 10.1111/j.1471-0528.2005.00523.x.

5. Debrock S, Melotte C, Spiessens C, Peeraer K. Pre-

implantation genetic screening for aneuploidy of

embryos after in vitro fertilization in women aged

at least 35 years: a prospective randomized trial.

Fertil Steril. 2010;93(2):364-73. doi: 10.1016/j.fertn-

stert.2008.10.072. Epub 2009 Feb 26.

6. Margalioth E, Ben-Chetrit A, Gal M, Eldar-Geva T.

Investigation and treatment of repeated implanta-

tion failure following IVF-ET. Human Reproduction.

2006;21(12):3036-3043. doi:10.1093/humrep/del305.

7. Firouzabadi RD, Ahmadi S, Oskouian H, Davar R.

Comparing GnRH agonist long protocol and GnRH

antagonist protocol in outcome the first cycle of ART.

Arch Gynecol Obstet. 2010;281(1):81-5. doi: 10.1007/

s00404-009-1073-5. Epub 2009 Apr 9.

8. Polanski L, Baumgarten M, Quenby S. What ex-

actly do we mean by ‘recurrent implantation failure’?

A systematic review and opinion. Reproductive Bio-

Medicine Online. 2014;28(4):409-423. doi:10.1016/j.

rbmo.2013.12.006.

9. Кошелева Н.Г., Плужникова Т.А. Невынашивание

беременности // Мир медицины. – 1998. – № 11–12. –

С. 43. [Kosheleva NG, Pluzhnikova TA. Nevynashivanie

beremennosti. Mir mediciny. 1998;(11-12):43.

(In Russ.)]

10. Сидельникова В.М., Сухих Г.Т. Невынашивание

беременности: руководство для практикующих

врачей. – М., 2011. [Sidel’nikova VM, Suhih GT.

Nevynashivanie beremennosti: rukovodstvo dlja

praktikujushhih vrachej. Moscow, 2011. (In Russ.)]

11. Сидельникова В.М. Привычная потеря беремен-

ности. – M.: Триада-Х, 2002. [Sidel’nikova VM.

Privychnaja poterja beremennosti. Moscow, Triada-X;

2002. (In Russ.)]

12. Bashiri A, Harlev A, Agarwal A. Recurrent Pregnancy

Loss. 1st ed. Cham: Springer International Publishing;

2016.

13. Беспалова О.Н. Генетические факторы риска не-

вынашивания беременности: автореф. дис. … д-ра

мед. наук. – СПб., 2009. [Bespalova ON. Geneticheskie

faktory riska nevynashivanija beremennosti [dissertation].

Saint Petersburg; 2009. (In Russ.)]

14. Тетруашвили Н.К. Ранние потери беременности

(иммунологические аспекты, пути профилакти-

ки и терапии): автореф. дис. … д-ра мед. наук. –

М., 2008 [Tetruashvili NK. Rannie poteri beremennosti

(immunologicheskie aspekty, puti profilaktiki i terapii).

[dissertation] Moscow, 2008. (In Russ.)]

15. Сельков С.А. Иммунологические аспекты невы-

нашивания беременности: автореф. дис. … д-ра

мед. наук. – СПб., 1996. [Sel’kov SA. Immunologicheskie

aspekty nevynashivanija beremennosti. [dissertation]

Saint Petersburg; 1996. (In Russ.)]

16. Газиева И.А. Иммунопатогенетические механиз-

мы формирования плацентарной недостаточно-

сти и ранних репродуктивных потерь: автореф.

дис. … канд. мед. наук. – Екатеринбург, 2014.

[Gazieva IA. Immunopatogeneticheskie mehanizmy

formirovanija placentarnoj nedostatochnosti i rannih

reproduktivnyh poter’. [dissertation] Ekaterinburg;

2014. (In Russ.)]

17. Сотникова Н.Ю. Иммунные механизмы регуля-

ции инвазии трофобласта // Российский имму-

нологический журнал. – 2010. – № 4. – С. 9–13.

[Sotnikova NJu. Immunnye mehanizmy reguljacii

invazii trofoblasta. Rossijskij immunologicheskij

zhurnal. 2010;(4):9-13. (In Russ.)]

18. Айламазян Э.К., Павлов О.В., Сельков С.А. Роль

иммунной системы фетоплацентарного комплек-

са в механизмах преждевременного прерывания

беременности // Акушерство и гинекология. –

2004. – № 2. – С. 9–15. [Ajlamazjan JeK, Pavlov OV,

Sel’kov SA. Rol’ immunnoj sistemy fetoplacentarnogo

kompleksa v mehanizmah prezhdevremennogo

preryvanija beremennosti. Akusherstvo i ginekologija.

2004;(2):9-15. (In Russ.)]

ISSN 1684–0461

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

153

ОБЗОРЫ

19. Mikhailova V, Belyakova K, Selkov S, Sokolov D. Pe-

culiarities of NK cells differentiation: CD56dim and CD-

56bright NK cells at pregnancy and in non-pregnant state.

Medical Immunology (Russia). 2017;19(1):19-26.

doi: 10.15789/1563-0625-2017-1-19-26.

20. Михайлова В.А., Сельков С.А., Соколов Д.И.

Фенотипические и функциональные харак-

теристики NK-клеток при беременности //

Акушерство и гинекология. – 2011. – № 5. – С. 4–9.

[Mihajlova VA, Sel’kov SA, Sokolov DI. Fenotipicheskie

i funkcional’nye harakteristiki NK-kletok pri bere-

mennosti. Akusherstvo i ginekologija. 2011;(5):4-9.

(In Russ.)]

21. Bulmer JN, Morrison L, Longfellow M, et al. Granulat-

ed lymphocytes in human endometrium: histochemi-

cal and immunohistochemical studies. Hum Reprod.

1991Jul;6(6):791-8. doi: 10.1093/oxfordjournals.hum-

rep.a137430.

22. Starkey PM, Clover LM, Rees MC. Variation during

the menstrual cycle of immune cell populations in hu-

man endometrium. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol.

1991;39(3):203-7. doi: 10.1016/0028-2243(91)90058-S

23. Northern AL, Rutter SM, Peterson CM. Cyclic changes

in the concentrations of peripheral blood immune cells

during the normal menstrual cycle. Proc Soc Exp Biol

Med. 1994;207(1):81-8. doi: 10.3181/00379727-207-

43795.

24. Yovel G, Shakhar K, Ben-Eliyahu S. The effects of sex,

menstrual cycle, and oral contraceptives on the num-

ber and activity of natural killer cells. Gynecol Oncol.

2001;81(2):254-62. doi: 10.1006/gyno.2001.6153.

25. Souza SS, Castro FA, Mendonça HC, et al. Influ-

ence of menstrual cycle on NK activity. J Reprod

Immunol. 2001;50(2):151-9. doi: 10.1016/S0165-

0378(00)00091-7

26. Григорьева В.В., Сельков С.А., Шапахова О.В.,

Малыгин А.М. Активность естественных киллеров

при различных формах невынашивания

беременности // Aкушерство и гинекология. –

1991. – № 4. – С. 26–28. [Grigor’eva VV, Sel’kov SA,

Shapahova OV, Malygin AM. Aktivnost’ estestvennyh

killerov pri razlichnyh formah nevynashivanija bere-

mennosti. Akusherstvo i ginekologija. 1991;(4):26-8.

(In Russ.)]

27. Gregory CD, Shah LP, Lee H, et al. Cytotoxic reac-

tivity of human natural killer (NK) cells during normal

pregnancy: a longitudinal study. J Clin Lab Immunol.

1985;18(4):175-81.

28. Gregory CD, Lee H, Scott IV, Golding PR. Phenotypic

heterogeneity and recycling capacity of natural killer

cells in normal human pregnancy. J Reprod Immunol.

1987;11(2):135-45. doi: 10.1016/0165-0378(87)90017-9.

29. Ponte M, Cantoni C, Biassoni R. Inhibitory receptors

sensing HLA-G1 molecules in pregnancy: decidua-

associated natural killer cells express LIR-1 and CD94/

NKG2A and acquire p49, an HLA-G1-specific recep-

tor. Proc Natl Acad Sci USA. 1999;96(10):5674-9.

doi: 10.1073/pnas.96.10.5674.

30. Dosiou C, Giudice L. Natural Killer Cells in Preg-

nancy and Recurrent Pregnancy Loss: Endocrine

and Immunologic Perspectives. Endocrine Reviews.

2005;26(1):44-62. doi:10.1210/er.2003-0021.

31. Ширшев С.В., Некрасова И.В., Орлова Е.Г. Ре-

гуляция фенотипического созревания NK и NKT

клеток гормонами репродукции // Вестник Перм-

ского университета. – 2008. – Вып. 9(25). –

С. 100–103. [Shirshev SV, Nekrasova IV, Orlova EG.

Reguljacija fenotipicheskogo sozrevanija NK i NKT

kletok gormonami reprodukcii. Vestnik Permskogo

universiteta. 2008;9(25):100-3. (In Russ.)]

32. Laskarin G, Strbo N, Sotosek V, Rukavina D, et al. Pro-

gesterone directly and indirectly affects perforin expres-

sion in cytolytic cells. Am J Reprod Immunol. 1999;42(5):

312-20. doi: 10.1111/j.1600-0897.1999.tb00107.x.

33. Roussev R, Ng S, Coulam C. Natural Killer Cell Func-

tional Activity Suppression By Intravenous Immuno-

globulin, Intralipid and Soluble Human Leukocyte

Antigen-G. American Journal of Reproductive Im-

munology. 2007;57(4):262-269. doi:10.1111/j.1600-

0897.2007.00473.x.

34. Choudhury S. Human reproductive failure II: Immu-

nogenetic and interacting factors. Human Repro-

duction Update. 2001;7(2):135-160. doi:10.1093/hu-

mupd/7.2.135.

35. Beer A, Kwak J, Ruiz J. Immunophenotypic profiles

of peripheral blood lymphocytes in women with recur-

rent pregnancy losses and in infertile women with mul-

tiple failed in vitro fertilization cycles. American Journal

of Reproductive Immunology. 1996;35(4):376-382.

doi: 10.1111/j.1600-0897.1996.tb00497.x.

36. Michou VI, Kanavaros P, Athanassiou V. Fraction of the

peripheral blood concentration of CD56+/CD16–/CD3-

cells in total natural killer cells as an indication of fertility

and infertility. Fertil Steril. 2003;80(Suppl 2):691-7.

37. Thum MY, Bhaskaran S, Abdalla HI, et al. An in-

crease in the absolute count of CD56dimCD16+CD69+

NK cells in the peripheral blood is associated with a

poorer IVF treatment and pregnancy outcome. Hum

Reprod. 2004;19(10):2395-400. Epub 2004 Aug 19

38. The Role of Natural Killer Cells in Human Fertility. Sci-

entific Impact Paper No. 53, 2016. URL: https://www.

rcog.org.uk/globalassets/documents/guidelines/sci-

entific-impact-papers/sip_53.pdf (дата обращения:

13.04.2017).

39. Чугунова А.А., Зайнулина М.С., Селютин А.В. Со-

держание основных субпопуляций иммунокомпе-

тентных клеток у беременных с невынашивание

и антифосфолипидным синдромом при лече-

ISSN 1684–0461

154 ОБЗОРЫ

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

нии препаратами иммуноглобулинов // Акушер-

ство и гинекология. – 2012. – № 2. – С. 30–35.

[Chugunova AA, Zajnulina MS, Seljutin AV. The content

of main subpopulations of immunocompetent cells in

pregnant women with miscarriage and antiphospholipid

syndrome during intravenous immunoglobulin

treatment. Obstetrics and Gynecology. 2012;(2):30-5.

(In Russ.)]

40. Clark D, Coulam C, Stricker R. Is intravenous immuno-

globulins (IVIG) efficacious in early pregnancy failure? A

critical review and meta-analysis for patients who fail in

vitro fertilization and embryo transfer (IVF). Journal of As-

sisted Reproduction and Genetics. 2006;23(9-10):383.

doi: 10.1007/s10815-006-9057-x

41. Cohn EJ, Strong LE, et al. Preparation and properties

of serum and plasma proteins; a system for the sepa-

ration into fractions of the protein and lipoprotein com-

ponents of biological tissues and fluids. J Am Chem

Soc. 1946;68:459-75. doi: 10.1021/ja01207a034.

42. Агаджанова A.A., Сидельникова В.М. Опыт примене-

ния препарата Гамимун-Н у больных с антифосфо-

липидным синдромом и привычным невынашиванием

беременности // Материалы VII Российского форума

«Мать и дитя». – М., 2005. – С. 28 [Agadzhanova AA,

Sidel’nikova VM. Opyt primenenija preparata Gamimun-N

u bol’nyh s antifosfolipidnym sindromom i privychnym

nevynashivaniem beremennosti. Materialy VII Rossijs-

kogo foruma “Mat’ i ditja”. (conference proceedings)

Moscow; 2005:28. (In Russ.)]

43. Егорян Л.С. Иммуноглобулины в профилакти-

ке внутриутробных инфекций: автореф. дис. …

канд.мед. наук. – Ростов на/Д, 2006. [Egorjan LS.

Immunoglobuliny v profilaktike vnutriutrobnyh infekcij.

[dissertation]. Rostov-on-Don; 2006 (In Russ.)]

44. Сельков С.А., Соколов Д.И., Чепанов С.В. Имму-

норегуляторные эффекты иммуноглобулинов для

внутривенного ведения // Медицинская иммуноло-

гия. – 2013. – Т. 15. – № 1. – С. 5–12. [Sel’kov SA,

Sokolov DI, Chepanov SV. Immunoreguljatornye

jeffekty immunoglobulinov dlja vnutrivennogo

vedenija. Medicinskaja immunologija. 2013;15(1):5-12.

(In Russ.)]

45. Формуляр по использованию препаратов иммуно-

глобулинов для внутривенного введения в неонато-

логии // Н.Н. Володин, ред. Протоколы диагностики,

лечения и профилактики внутриутробных инфек-

ций у новорожденных детей . – М., 2001. – С. 72–90.

[Formuljar po ispol’zovaniju preparatov immunoglobuli-

nov dlja vnutrivennogo vvedenija v neonatologii.

N.N. Volodin, ed. Protokoly diagnostiki, lechenija

i profilaktiki vnutriutrobnyh infekcij u novorozhdjonnyh

detej. Moscow; 2001: P. 72-90. (In Russ.)]

46. Carp H. Recurrent Pregnancy Loss. 2nd ed. Tel Aviv:

CRS Press; 255-261.

47. Чепанов С.В., Соколов Д.И., Шляхтенко Т.Н. Экс-

периментальное обоснование эндотелиопротек-

торного эффекта иммуноглобулинов для внутри-

венного ведения при акушерской патологии // Аку-

шерство и гинекология. – 2016. – № 5. – С. 82–89.

[Chepanov SV, Sokolov DI, Shlachtenko TN, et al.

Experimental rationale for the endothelial protective

effect of intravenous immunoglobulins in obstetric

disease. Obstetrics and Gynecology. 2016;(5):82-9.

(In Russ.)]

48. Ушкалова Е.А., Шифман Е.М. Проблема

нерегламентированного применения иммуно-

глобулина для внутривенного введения

в акушерстве // Акушерство и гинекология. –

2011. – № 3. – C. 74–80. [Ushkalova EA, Shifman EM.

Problema nereglamentirovannogo primenenija im-

munoglobulina dlja vnutrivennogo vvedenija v akush-

erstve. Akusherstvo i ginekologija. 2011;(3):74-80

(In Russ.)]

49. Seshadri S, Sunkara S. Natural killer cells in female in-

fertility and recurrent miscarriage: a systematic review

and meta-analysis. Human Reproduction Update.

2013;20(3):429-438. doi:10.1093/humupd/dmt056.

50. Moraru M, Carbone J, Alecsandru D, et al. Intravenous

immunoglobulin treatment increased live birth rate in

a Spanish cohort of women with recurrent reproduc-

tive failure and expanded CD56(+) cells. Am J Re-

prod Immunol. 2012;68(1):75-84. doi: 10.1111/j.1600-

0897.2012.01135.x. Epub 2012 Apr 18.

51. Кривонос М.И., Зайнулина М.С., Чепанов С.В.,

и др. Клинико-иммунологические аспекты ведения

женщин с неудачами ВРТ // Журнал акушерства

и женских болезней. – 2014. – № 5. – C. 89–94.

[Krivonos MI, Zaynulina MS, Chepanov SV, et al. Clinical

and immunological aspects of treatment women with

repeated in-vitro fertilization failure. Journal of Obstetrics

and Women’s Diseases. 2014;(5):89-94. (In Russ.)]

52. Hutton B, Sharma R, Fergusson D, et al. Use of in-

travenous immunoglobulin for treatment of recurrent

miscarriage: a systematic review. BJOG. 2007;114(2):-

134-42. Epub 2006 Dec 12.

53. Li J, Chen Y, Liu C, et al. Intravenous immunoglobulin

treatment for repeated IVF/ICSI failure and unexplained

infertility: a systematic review and a meta-analysis. Am

J Reprod Immunol. 2013;70(6):434-47. doi: 10.1111/

aji.12170.

54. Kwak JY, Beaman KD, Gilman-Sachs A, et al. Up-

regulated expression of CD56+, CD56+/CD16+, and

CD19+ cells in peripheral blood lymphocytes in preg-

nant women with recurrent pregnancy losses. Am

J Reprod Immunol. 1995;34(2):93-9. doi: 10.1111/

j.1600-0897.1995.tb00924.x.

55. Higuchi K, Aoki K, Kimbara T, Hosoi N. Suppression

of natural killer cell activity by monocytes following im-

ISSN 1684–0461

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

155

ОБЗОРЫ

munotherapy for recurrent spontaneous aborters. Am

J Reprod Immunol. 1995;33(3):221-7. doi: 10.1111/

j.1600-0897.1995.tb00888.x.

56. Emmer PM, Nelen WL, Steegers EA, et al. Peripheral

natural killer cytotoxicity and CD56(pos)CD16(pos) cells

increase during early pregnancy in women with a his-

tory of recurrent spontaneous abortion. Hum Reprod.

2000;15(5):1163-9. doi: 10.1093/humrep/15.5.1163.

57. Ntrivalas EI, Kwak-Kim JY, Gilman-Sachs A, et al. Sta-

tus of peripheral blood natural killer cells in women

with recurrent spontaneous abortions and infertility of

unknown aetiology. Hum Reprod. 2001;16(5):855-61.

doi: 10.1093/humrep/16.5.855.

58. Souza SS, Ferriani RA, Santos CM, Voltarelli JC. Immu-

nological evaluation of patients with recurrent abortion.

J Reprod Immunol. 2002;56(1-2):111-21. doi: 10.1016/

S0165-0378(01)00145-0.

59. Yamada H, Morikawa M, Kato EH, et al. Pre-concep-

tional natural killer cell activity and percentage as pre-

dictors of biochemical pregnancy and spontaneous

abortion with normal chromosome karyotype. Am J Re-

prod Immunol. 2003;50(4):351-4. doi: 10.1034/j.1600-

0897.2003.00095.x.

60. Roussev R, Ng S, Coulam C. Natural Killer Cell Functional

Activity Suppression By Intravenous Immunoglobulin, In-

tralipid and Soluble Human Leukocyte Antigen-G. Ameri-

can Journal of Reproductive Immunology. 2007;57(4):

262-269. doi: 10.1111/j.1600-0897.2007.00473.x.

61. Perricone C, De Carolis C, Giacomelli R, et al. High

levels of NK cells in the peripheral blood of patients

affected with anti-phospholipid syndrome and recur-

rent spontaneous abortion: a potential new hypothe-

sis. Rheumatology. 2007;46(10):1574-8. doi: 10.1093/

rheumatology/kem197.

62. Sacks G, Yang Y, Gowen E, et al. Detailed analysis of pe-

ripheral blood natural killer cells in women with repeated

IVF failure. Am J Reprod Immunol. 2012;67(5):434-42.

doi: 10.1111/j.1600–0897.2012.01105.x.

63. Lachapelle MH, Miron P, Hemmings R, Roy DC. En-

dometrial T, B, and NK cells in patients with recurrent

spontaneous abortion. Altered profile and pregnancy

outcome. J Immunol. 1996 15;156(10):4027-34.

64. Quenby S, Bates M, Doig T. Pre-implantation endome-

trial leukocytes in women with recurrent miscarriage.

Hum Reprod. 1999;14(9):2386-91. doi: 10.1093/hum-

rep/14.9.2386.

65. Clifford K, Flanagan AM, Regan L. Endometrial

CD56+ natural killer cells in women with recur-

rent miscarriage: a histomorphometric study. Hum

Reprod. 1999;14(11):2727-30. doi: 10.1093/hum-

rep/14.11.2727.

66. Emmer PM, Steegers EA, Kerstens HM. Altered phe-

notype of HLA-G expressing trophoblast and de-

cidual natural killer cells in pathological pregnancies.

Hum Reprod. 2002;17(4):1072-80. doi: 10.1093/hum-

rep/17.4.1072.

67. Shimada S, Kato EH, Morikawa M, Iwabuchi K, et al. No

difference in natural killer or natural killer T-cell popula-

tion, but aberrant T-helper cell population in the endome-

trium of women with repeated miscarriage. Hum Reprod.

2004;19(4):1018-24. doi: 10.1093/humrep/deh159.

68. Michimata T, Ogasawara MS, Tsuda H, et al. Dis-

tributions of endometrial NK cells, B cells, T cells,

and Th2/Tc2 cells fail to predict pregnancy out-

come following recurrent abortion. Am J Reprod

Immunol. 2002;47(4):196-202. doi: 10.1034/j.1600-

0897.2002.01048.x.

69. Intravenous immunoglobulin in the prevention of re-

current miscarriage. The German RSA/IVIG Group.

Br J Obstet Gynaecol. 1994;101(12):1072-7.

doi: 10.1111/j.1471-0528.1994.tb13584.x.

70. Christiansen OB, Mathiesen O, Husth M, et al. Place-

bo-controlled trial of treatment of unexplained second-

ary recurrent spontaneous abortions and recurrent

late spontaneous abortions with i. v. immunoglobulin.

Hum Reprod. 1995;10(10):2690-5. doi: 10.1093/ox-

fordjournals.humrep.a135769.

71. Coulam CB, Krysa L, Stern JJ, Bustillo M. Intrave-

nous immunoglobulin for treatment of recurrent preg-

nancy loss. Am J Reprod Immunol. 1995;34(6):333-7.

doi: 10.1111/j.1600-0897.1995.tb00960.x.

72. Stephenson MD, Dreher K, Houlihan E, Wu V. Pre-

vention of unexplained recurrent spontaneous abor-

tion using intravenous immunoglobulin: a prospective,

randomized, double-blinded, placebo-controlled trial.

Am J Reprod Immunol. 1998;39(2):82-8. doi: 10.1111/

j.1600-0897.1998.tb00339.x.

73. Jablonowska B, Selbing A, Palfi M, Ernerudh J. Preven-

tion of recurrent spontaneous abortion by intravenous

immunoglobulin: a double-blind placebo-controlled

study. Hum Reprod. 1999;14(3):838-41. doi: 10.1093/

humrep/14.3.838.

74. Christiansen OB, Pedersen B, Rosgaard A, Husth M.

A randomized, double-blind, placebo-controlled trial

of intravenous immunoglobulin in the prevention of

recurrent miscarriage: evidence for a therapeutic ef-

fect in women with secondary recurrent miscarriage.

Hum Reprod. 2002;17(3):809-16. doi: 10.1093/hum-

rep/17.3.809.

75. Triolo G, Ferrante A, Ciccia F, Accardo-Palumbo A.

Randomized study of subcutaneous low molecu-

lar weight heparin plus aspirin versus intravenous

immunoglobulin in the treatment of recurrent fetal

loss associated with antiphospholipid antibodies.

Arthritis Rheum. 2003;48(3):728-31. doi: 10.1002/

art.10957.

76. Winger EE, Reed JL.Treatment with tumor necrosis fac-

tor inhibitors and intravenous immunoglobulin improves

ISSN 1684–0461

156 ОБЗОРЫ

2017 ТОМ LXVI ВЫПУСК 3

live birth rates in women with recurrent spontaneous

abortion. Am J Reprod Immunol. 2008;60(1):8-16.

doi: 10.1111/j.1600–0897.2008.00585.x.

■ Адреса авторов для переписки (Information about the authors)

Алана Олеговна Агнаева — ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта»,

Санкт-Петербург. E-mail: forlucky999@mail.ru.

Alana O. Agnaeva— FSBSI “The Research Institute of Obstetrics,

Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott”, Saint

Petersburg, Russia. E-mail: forlucky999@mail.ru.

Олеся Николаевна Беспалова — д-р мед. наук, ведущий науч-

ный сотрудник I акушерского отделения патологии беремен-

ности. ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта», Санкт-Петербург.

E-mail:shiggerra@mail.ru.

Olesya N. Bespalova— MD, PhD, DMSc, Leading researcher of the

1st obstetric pregnancy pathology department. FSBSI “The Research

Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after

D.O. Ott”, Saint Petersburg, Russia. E-mail: shiggerra@mail.ru.

Дмитрий Игоревич Соколов — д-р биол. наук, зав.лабораторией

межклеточных взаимодействий, отдел иммунологии и межклеточ-

ных взаимодействий. ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта», Санкт-

Петер бург. E-mail:falcojugger@yandex.ru.

Dmitriy I. Sokolov— DBSc, Head of Laboratory of Intercellular

Interactions, Department of Immunology and Intercellular

Interactions. FSBSI “The Research Institute of Obstetrics, Gynecology

and Reproductology named after D.O. Ott”, Saint Petersburg, Russia.

E-mail: falcojugger@yandex.ru.

Сергей Алексеевич Сельков — д-р мед. наук, профессор, заслужен-

ный деятель науки, заведующий отделом иммунологии и меж-

клеточных взаимодействий. ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта»,

Санкт-Петербург. E-mail:selkovsa@mail.ru.

Sergey A. Selkov— MD, professor, Head of the Department of

Immunology and Intercellular Interactions. FSBSI “The Research

Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after

D.O. Ott”, Saint Petersburg, Russia. E-mail: selkovsa@mail.ru.

Игорь Юрьевич Коган— профессор, ученый секретарь. ФГБНУ

«НИИ АГиР им. Д.О. Отта», Санкт-Петербург. E-mail:ikogan@

mail.ru.

Igor Yu. Kogan— professor, scientific secretery. FSBSI “The Research

Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after

D.O. Ott”, Saint Petersburg, Russia. E-mail:ikogan@mail.ru.

REGULATION OF PERIPHERAL B-LYMPHOCYTE DIFFERENTIATION IN RECURRENT MISCARRIAGE

Article

Full-text available

Oct 2021

The important role of immune disorders in recurrent miscarriage has been proven. Clarification of the character of B-lymphocyte differentiation and its regulation factors in women with threatened miscarriage and recurrent miscarriage in history is an urgent problem, since it will reveal the immune mechanisms of the pathogenesis of this pathology. Purpose: to establish the features of B-lymphocyte differentiation and factors of its regulation in women with a history of recurrent miscarriage and threatening spontaneous miscarriage at the time of examination. Were examined pregnant women aged 18-40 years at a gestation period of 5-12 weeks. The main group consisted of 60 pregnant women with a threatening spontaneous miscarriage at the time of examination and a history of recurrent miscarriage. As a control, 35 pregnant women with uncomplicated pregnancy were examined. The comparison group consisted of 25 primary pregnant women with threatened spontaneous miscarriage at the time of examination. The material for the study was peripheral venous blood. Subpopulations of B-lymphocytes CD19 ⁺ , CD19 ⁺ IgD ⁺ , CD20 ⁺ IgM ⁺ , CD20 ⁺ IgG ⁺ were determined by flow cytometry; CD19 ⁺ CD20 ⁻ CD38 ⁺ , CD19 ⁺ CD27 ⁻ , CD19 ⁺ CD27 ⁺ . Serum levels of BAFF and APRIL were assessed by enzyme-linked immunosorbent assay. In the main group, an increase in the proportion of B-cells, CD20 ⁺ IgM ⁺ -lymphocytes and memory cells was recorded in the peripheral blood, along with a decrease in the level of naive cells and plasma cells. In the comparison group, an increase in the proportion of immature IgM ⁺ B-cells, circulating memory cells, along with a decrease in naive B-lymphocytes, was registered. in the main group there was a pronounced decrease in the serum BAFF level compared with the control and comparison groups. Analysis of the APRIL content showed a pronounced downward trend in groups with threatened miscarriage relative to healthy pregnant women. Thus, threatening habitual and sporadic miscarriages were associated with a shift in the differentiation of B-lymphocytes towards immature forms and a lack of regulatory influence of BAFF and APRIL, which is reflected in the disruption of B-cell homeostasis and weakening of humoral effector mechanisms at the systemic level. The revealed changes may indicate a single mechanism for the development of a threatening spontaneous miscarriage, the severity of which increases with repeated loss of pregnancy. These changes can lead to an increase in effector cytotoxic mechanisms and an increase in proinflammatory cytokines, which can lead to the development of damaging reactions in the fetoplacental complex, which can be reflected in the clinical picture of the threat of termination of pregnancy.

CRONIC ENDOEMTRITIS DIAGNOSIS WITH PLASMA CELLS DETECTION: PRESENT AND FUTURE. REVIEW

Article

Jan 2023

Chronic endometritis (CE) is a persistent inflammation of the endometrium, which can lead to infertility and other reproductive disorders. The diagnosis of CE is based on various histological criteria, the main of which is the presence of stromal plasma cells, however, standardized methods for their assessment have yet to be investigated. In this review, we will discuss modern approaches to the verification of endometrial stromal plasma cells, as well as methods of its objectification using various immunohistochemical markers and methods based on artificial intelligence.

Immunological testing for female infertility: a modern view on the problem

Article

Jul 2024

Introduction. According to various estimates, in Russia 10 to 20 % of people of reproductive age are infertile. Changes in the immune system play a key role in the etiology and treatment of various infertility forms. The active introduction of immunological testing into clinical practice can potentially improve the results of infertility diagnostics and treatment. Aim: to analyze the current literature data on immunological testing in female infertility, as well as to assess its potential role in infertility diagnostics and treatment. Materials and Methods. There was conducted a search for publications in the electronic databases PubMed and eLibrary by using the following keywords and their combinations: "infertility", "immunology", "immune system", "immunological testing", "diagnostics", "treatment". The articles were evaluated in accordance with the PRISMA recommendations. Ultimately, 88 publications were included in the review. Results. Testing for antiphospholipid antibodies (APA) may be useful for women undergoing assisted reproductive technology (ART) therapy, as these antibodies increase the risk of pregnancy complications and thrombotic risks associated with ovarian stimulation, but studies assessing AFA effect on in vitro fertilization (IVF) outcomes have ambiguous results. The presence of antithyroid antibodies (ATA) may be associated with infertility, so their assessment is indeed important to determine treatment tactics. It has been suggested that antinuclear antibodies (ANA) may affect reproductive function by disrupting trophoblast cell development and interfering with RNA transcription, which may lead to lowered reproductive success. Studies have shown that patients with a positive ANA data have a lower incidence of pregnancy and a higher rate of miscarriages after IVF procedure. The human herpes virus type 6 (HHV-6) affects female fertility and is often the cause of spontaneous termination of pregnancy. B-cell lymphoma protein 6 (BCL-6) can serve as an important prognostic biomarker to identify individuals with endometriosis and related reproductive disorders, including idiopathic infertility. Evaluation of endometrial decidualization can be a useful tool to assess readiness for endometrial implantation and provide opportunities for targeted therapeutic interventions. The issue of testing for NK-cells in patients undergoing infertility screening remains controversial due to the difficulties of standardizing testing recommendations. Conclusion. To date, there is a limited number of reliable data on the role of various immunological tests in infertility diagnostics and treatment. With the exception of testing for AFA in patients with RPL, as well as for thyroid-stimulating hormone (TSH) and anti-thyroperoxidase antibodies (TPOAb) in patients undergoing therapy using various types of assisted reproductive technologies, the remaining immunological tests provide scant data to justify their routine use in clinical practice. The major limitations of existing studies are coupled to a small patient sample, as well as heterogeneity of inclusion criteria, patient groups and research methods.

Analysis of the differentiation of peripheral B-lymphocytes in pregnant women with a habitual miscarriage

Article

Jun 2021

The frequency of recurrent miscarriage among all desired pregnancies is 2-5 %. The important role of immune disorders in early termination of pregnancy has been proven. Elucidation of the nature of differentiation of B-lymphocytes in women with threatened miscarriage and habitual miscarriage in the anamnesis seems relevant, since it will clarify the immune mechanisms of the pathogenesis of this pathology. Aim of the study was to assess the nature of differentiation and type of the cytokine-producing function of peripheral B lymphocytes in women with a threatening spontaneous miscarriage and recurrent miscarriage in history. Material and methods . Pregnant women aged 18-40 years at a gestation period of 5-12 weeks were examined. The main group consisted of 60 pregnant women with a threatening spontaneous abortion at the time of the examination and a history of recurrent abortion. 35 pregnant women with uncomplicated pregnancy were examined as a control group. The comparison group consisted of 25 primary pregnant women with threatened spontaneous abortion at the time of the examination. The material for the study was peripheral venous blood. Subpopulations of B lymphocytes CD20+CD5+, CD20+CD5-, CD19+IgD+, CD20 ⁺ IgM ⁺ , CD20 ⁺ IgG+; CD19 ⁺ CD20 ⁻ CD38 ⁺ , CD19 ⁺ CD27 ⁻ , CD19 ⁺ CD27 ⁺ , CD19 ⁺ IgD ⁺ CD27 ⁺ , CD19 ⁺ IgD ⁺ CD27 ⁻ , CD20 ⁺ IL-4 ⁺ , CD20 ⁺ IL ⁻ 6 ⁺ , CD20 ⁺ IL-10 ⁺ were determined by the method of flow cytometry. Results and discussion . In the main group, an increase in the proportion of B cells in the peripheral blood was recorded, mainly due to B2 lymphocytes, CD20 ⁺ IgM ⁺ lymphocytes and memory cells, along with a decrease in the level of naive cells and plasma cells, as well as lymphocytes spontaneously expressing IL-6 and IL-10. Thus, the threatening habitual miscarriage is associated with a shift in B-lymphocyte differentiation towards immature forms. A decrease in the number of CD20 ⁺ IL-10 ⁺ cells in patients of the main group can lead to a weakening of the suppressor associated with IL-10 and subsequent impairment of the maternal organism’s tolerance to a semi-allogeneic fetus. Similar changes in the differentiation and functional activity of B-lymphocytes were also observed with a threatening loss of the first pregnancy, which may indicate a single mechanism for the development of a threatening spontaneous miscarriage, the severity of which increases with repeated loss of pregnancy.

Comprehensive molecular and morphological study of abortion material in missed abortion of the first trimester

Article

Full-text available

Jan 2022

BACKGROUND: Missed abortion is the main cause of reproductive loss in the first trimester, and genetic causes come first in the etiology of this disease. The immunological aspects of the mother-fetus system are currently widely discussed. In this regard, the study of the immunological relationship between the mothers body and the fetus in missed abortion, depending on the chorion karyotype, as well as after suffering reproductive loss, is a topical task, as it can optimize the methods of examining patients with missed abortion and identify factors that contribute to the development of recurrent miscarriage. AIM: The aim of this study was to investigate the morphological and immunohistochemical characteristics of abortion material in missed abortion, depending on the presence of chorionic chromosomal abnormalities and the patients history of reproductive losses. MATERIALS AND METHODS: We performed a comprehensive morphological and immunohistochemical study (CD56, HLA-DR-II) of abortion material in 273 cases of missed abortion. Group 1 consisted of patients with different variants of chorionic chromosomal abnormalities (n = 169); group 2 included subjects with a normal karyotype of the chorion (n = 104). The data analysis was carried out taking into account the anamnesis of patients, depending on the presence of reproductive losses. RESULTS: We revealed the morphological features of the abortion material in missed abortion in cases with chromosomal abnormalities of the chorion: pronounced edema, sclerosis, necrosis of chorionic villi, more pronounced inflammatory changes in the form of moderate and severe macrophage infiltration of the decidual tissue and endometrium, and accumulations of leukocytes as microabscesses. It has been proven that the severity of inflammatory changes in abortuses depends only on the chorion karyotype and does not depend on either the duration of the presence of an unviable fetal egg in the uterine cavity, or the patients history of reproductive losses. It was shown that the CD56 and HLA-DR-II expressions in the abortion material depend on the patients history of reproductive losses, regardless of the chorion karyotype. CONCLUSIONS: In patients with an unburdened obstetric and gynecological history in the first missed abortion, it is advisable only to determine the chorion karyotype in order to identify the cause of missed abortion. The immunohistochemical study of the abortion material with the determination of the CD56 and HLA-DR-II expressions is important in repeated missed abortions, regardless of the chorion karyotype.

The role and significance of the uterine natural killers in healthy pregnancy (Literature review)

Article

Dec 2020

The review provides the latest up-to-date data regarding the role and function of uterine natural killer cells (uNK), their origin and dif-ferentiation, the effect of cytokines produced by them on the process of placentation and angiogenesis; also reflects the features of the interaction of trophoblast with maternal uNK in physiological pregnancy. In maternal-fetal interface special attention is given to representatives of innate immunity, the so-called uterine natural killers, which, having characteristic phenotypic properties and inter-acting with trophoblast cells, provide and form not only maternal immunological tolerance, but also participate in the regulation of differentiation of stromal cells, play a key role in vascular remodelling and protect the fetus from the pathological effects of foreign agents. The presence of natural killer cells has been recognised in human endometrium for 30 years, but despite considerable research effort, the role of uNK cells in normal pregnancy remains uncertain. Only a comprehensive assessment of the regulatory effect of uNK cells, taking into account the latest world studies in this field, will allow us to evaluate and understand their key values in the physiological course of pregnancy.

Inflammatory response and its role in antenatal transformation of the cervix

Article

Full-text available

Feb 2020

Understanding how the cervical tissue changes before childbirth is one of the most significant issues of modern-day obstetrics. This article reviews current original research findings by domestic and foreign authors in the field of antenatal cervical transformation mechanisms. Cellular and humoral components of inflammation in the cervix are presented as the most significant causes of morphological changes in cervical tissues. The perspectives of further research in the field have been stated in this review.

Natural killer cells in female infertility and recurrent miscarriage: A systematic review and meta-analysis

Article

Full-text available

Nov 2013
HUM REPROD UPDATE

INTRODUCTIONEmbryo implantation is a complex process involving maternal hormonal changes, immune responses and maturational events in the embryo. A pregnancy could fail when these events are not synchronized. It is speculated that in women, an elevation of natural killer (NK) cells may have an effect on reproductive performance, and NK cell levels in blood are currently being used as a diagnostic test to guide the initiation of therapies in patients with infertility.METHODS We conducted a systematic review to evaluate the (i) levels of NK cells in blood and endometrium in infertile versus fertile women, (ii) association between NK cells and IVF outcome, (iii) levels of NK cells in blood and endometrium in women with recurrent miscarriage (RM) versus controls. The following electronic databases were searched: Medline, EMBASE, Cochrane Library, Web of Science and National Research Register.RESULTSA total of 22 studies were included. Meta-analysis of studies that evaluated peripheral and uterine NK (uNK) cell percentages in infertile versus fertile women showed no significant difference between the two groups [standardized mean difference (SMD) -0.33; 95% confidence intervals (CI) -1.06, 0.4; P = 0.37; SMD -1.82; 95% CI -4.80, 1.17; P = 0.23 respectively]. Pooling of studies that reported peripheral NK cells as numbers showed significantly higher NK cell numbers in infertile women compared with fertile controls (SMD 3.16; 95% CI 1.07, 5.24; P = 0.003). Meta-analysis of studies that evaluated the role of NK cells in IVF outcome showed no significant difference in live birth rates in women with elevated NK cells or NK cell activity compared with women without elevated peripheral NK cells or NK cell activity (NK activity assessed using a cytotoxicity assay) (relative risk 0.57; 95% CI 0.06, 5.22; P = 0.62). Meta-analysis of studies that evaluated peripheral NK cell percentages in women with RM versus controls showed significantly higher NK cell percentages in women with RM (SMD 1.36; 95% CI 0.04, 2.69; P = 0.04). Meta-analysis of studies that evaluated peripheral NK cell numbers showed significantly higher NK cell numbers in women with RM compared with controls (SMD 0.81; 95% CI 0.47, 1.16; P < 0.00001). Meta-analysis of studies that evaluated uNK cells showed no significant difference in women with RM compared with controls (SMD 0.40; 95% CI -1.24, 2.04; P = 0.63).CONCLUSIONS Further research is needed before NK cell assessment can be recommended as a diagnostic tool in the context of female infertility or RM. There is no clear explanation as to why the results differ when data for NK cells are expressed as numbers or a percentage. On the basis of current evidence, NK cell analysis and immune therapy should be offered only in the context of clinical research.

Chapter-04 Recurrent Pregnancy Loss

Chapter

Jan 2010

Neerja Agarwal

Intravenous immunoglobulin for treatment of recurrent miscarriage

Article

Dec 1994
Br J Obstet Gynaecol

Objective This study was undertaken to verify a specific effect of intravenous immunoglobulin on the outcome of pregnancy in patients with a history of recurrent miscarriage as an alternative to immunotherapy with allogeneic leucocytes. Study design In a randomised double‐blind multicentre study 64 patients with a history of unexplained primary recurrent miscarriage were treated with intravenous immunoglobulin (verum) or 5% human albumin (placebo) infusions during their following pregnancy. Results Success rates for both verum and placebo, were compared excluding seven patients with explained miscarriage (20/27 (74%) versus 21/30 (70%)) and without any such exclusion (20/33 (61%) versus 21/31 (68%)). The difference between the two groups was not statistically significant. Conclusions A specific effect of intravenous immunoglobulin in primary recurrent miscarriage could not be demonstrated. These results imply the possibility of psychological influence, i.e. a placebo effect of intravenous immunoglobulin, on the outcome of pregnancy. Since success rates for both verum and placebo were in the same range as for treatment with allogeneic leucocytes, psychological effects might be responsible also for other kinds of immunotherapy for prevention of recurrent miscarriage. However, it cannot be excluded that success rates only reflect background values as reported for recurrent miscarriage patients without any treatment.

What exactly do we mean by ‘recurrent implantation failure’? A systematic review and opinion

Article

Apr 2014
REPROD BIOMED ONLINE

Recurrent implantation failure (RIF) is an iatrogenic condition, being the result of repetitive unsuccessful cycles of IVF or intracytoplasmic sperm injection (ICSI) treatment. The aim of this review was to assess the definitions of RIF used in literature as well as suggest a uniform definition of this condition. A systematic search of MEDLINE, Embase and Cochrane Library was conducted. The most commonly stated definitions described RIF as ‘three or more failed treatment cycles’ or ‘two or more’ failed cycles. Other identified definitions were based solely on the number of embryos transferred in previous cycles or combined the number of previously failed cycles with the number of transferred embryos. Several other definitions were also identified. This review highlights the lack of uniformity of the definition of RIF. Based on the available literature and the expert opinion of the authors, RIF should be defined as the absence of implantation after two consecutive cycles of IVF, ICSI or frozen embryo replacement cycles where the cumulative number of transferred embryos was no less than four for cleavage-stage embryos and no less than two for blastocysts, with all embryos being of good quality and of appropriate developmental stage.

Intravenous Immunoglobulin Treatment for Repeated IVF/ICSI Failure and Unexplained Infertility: A Systematic Review and a Meta-Analysis

Article

Dec 2013
AM J REPROD IMMUNOL

Intravenous immunoglobulin (IVIG) has been introduced empirically into IVF/ICSI programs with the hopes of improving in vitro fertilization (IVF) success. However, the effects of IVIG have been inconsistent. We investigated the effects of IVIG on hard outcomes, including implantation rate, clinical pregnancy rate, live birth rate, miscarriage rate, and live birth rate per embryo transferred. The PubMed, EMBASE, and CNKI databases were searched up to June of 2013 and 10 studies were included. Case-controlled studies comparing IVIG with placebo in IVF/ICSI women and/or unexplained infertility were included. Using fixed and random effects models, the pooled risk ratios (RR) with 95% confidence intervals (CIs) were calculated. The use of IVIG was significantly associated with a higher implantation rate and RR was 2.708 (95%CI: 1.302-5.629) compared with the placebo. The clinical pregnancy rate and the live birth rate were significantly increased in patients randomized to IVIG; RR was 1.475 (95%CI: 1.191-1.825) for the clinical pregnancy rate and RR was 1.616 (95%CI: 1.243-2.101) for the live birth rate. Moreover, the miscarriage rate was significantly less in patients randomized to IVIG (0.352, 95%CI: 0.168-0.738), but the live birthrate per embryo transferred was not (2.893; 95%CI: 0.810-10.331) less. Our results strongly support that IVIG is a useful treatment option for women undergoing repeated IVF failure.

Intravenous Immunoglobulin Treatment Increased Live Birth Rate in a Spanish Cohort of Women with Recurrent Reproductive Failure and Expanded CD56+ Cells

Article

Apr 2012
AM J REPROD IMMUNOL

Natural killer (NK, CD3(-)CD56(+)/CD16(+)) and NKT-like cells (CD3(+)CD56(+)/CD16(+)) activity is considered among the key factors for reproductive success. In the absence of immunological screening, beneficial effects of intravenous immunoglobulin (IVIG) in preventing recurrent reproductive failure (RRF) have not been reported. Here, we analyse the IVIG influence on pregnancy success in women with RRF and circulating NK or/and NKT-like cells expansion. One hundred fifty-seven women with previous recurrent miscarriage and/or recurrent implantation failure after in vitro fertilization were consecutively studied. Sixty-four patients with CD56(+) cell expansion, no apparent underlying disease and who maintained their desire to conceive were selected. Forty of them received IVIG during pregnancy. Overall, the clinical pregnancy rate for the women under IVIG therapy was 92.5% and the live birth rate was 82.5%. Significantly lower pregnancy and live birth rates (25% and 12.5%, respectively) were observed for the patients with recurrent pregnancy loss and NK/NKT-like cells expansion without IVIG. After three cycles of IVIG, NK cell percentages decreased significantly and these values persisted throughout gestation. Intravenous immunoglobulin therapy for women with RRF and NK or NKT-like cell expansion was a safe and beneficial therapeutic strategy that associated with high clinical pregnancy and live birth rates.

Human reproductive failure I: Immunological factors

Article

Mar 2001

Human reproductive failure may be a consequence of aberrant expression of immunological factors during pregnancy. Although the relative importance of immunological factors in human reproduction remains controversial, substantial evidence suggests that human leukocyte antigens (HLA), antisperm antibodies, integrins, the leukaemia inhibitory factor (LIF), cytokines, antiphospholipid antibodies, endometrial adhesion factors, mucins (MUC1) and uterine natural killer cells contribute to reproductive failure. In contrast, fewer data support the roles of anti-trophoblast antibodies, anti-endometrial antibodies, T-cells, peripheral natural killer cells, anti-HLA antibodies, blocking antibodies and suppressor cells in reproductive failure. Although immunological factors involved in reproductive failure have been studied traditionally using assays for antibodies and/or antigens, detailed research on these factors demonstrates conflicting results in humans. Maternal and fetal immunology is also difficult to investigate in humans. For these reasons, molecular assays may serve as a valuable alternative to investigate how the immune system affects reproductive outcome. In Part I of this review, immunological factors involved in human reproductive failure are summarized and critically evaluated. Immunogenetic and interacting factors in human reproductive failure will be summarized and evaluated in Part II.

Human reproductive failure II: Immunogenetic and interacting factors

Article

Mar 2001

Studies in humans suggest that reproductive failure may be influenced by immunological factors or by genes encoding immunological factors and regulatory mechanisms controlling immunological expression. Using molecular methods, immunological factors can be clearly studied in an immunogenetic context. One example, the major histocompatibility complex (MHC), known as the human leukocyte antigens (HLA) in humans and MHC in other mammals, affects many different stages of reproduction. Studies in some outbred, and in closely related, human populations indicate that HLA, or HLA-linked, genes and HLA regulatory factors affect gamete development, embryo cleavage, blastocyst and trophoblast formation, implantation, fetal development and survival. Studies in non-human mammals indicate that MHC, or MHC-linked, genes such as the grc complex, Ped/Qa-2, t haplotypes and MHC regulatory factors, have similar reproductive effects. Human reproductive failure may also be a consequence of disruption of interacting factors, including interactions between HLA antigens, cytokines and natural killer (NK) cells. In this review, we highlight the importance of immunogenetic and interacting factors in human reproductive failure. We argue that studies in closely related human populations and animal models may contribute to a better understanding of the ways in which immunogenetic and interacting factors are involved in human reproduction.

Characterization of a recurrent poor-quality embryo morphology phenotype and zygote transfer as a rescue strategy

Article

Jan 2012

Some patients in IVF programmes repeatedly display an abnormal embryonic development characterized as soon as day 2 post fertilization by a high rate (>60%) of highly fragmented embryos (>= 40% of cytoplasmic fragments) leading to recurrent IVF failures. This study postulated that, for various maternal reasons, some embryos were unable to withstand the in-vitro environment and an early pronucleate-stage transfer was proposed to these couples. Fifty-three patients with recurrent IVF failures (a mean of 2.8 +/- 1.0 previous attempts) characterized by low embryonic quality (a mean of 62.7% of the embryos with extended fragmentation) were included this transfer protocol. As in previous cycles, the mean number of oocytes retrieved and the fertilization rate were normal. The mean number of zygotes per transfer was 2.24. Fourteen clinical pregnancies were obtained, representing a pregnancy rate and a delivery rate per oocyte retrieval of 26.4% and 18.9%, respectively. Recurrent heavy and early embryo fragmentation in vitro characterizes around 3% of IVF couples and leads to lack of transfer or implantation failure. These data on fresh zygote transfers are encouraging and may provide a valid alternative solution for some of these patients.

Detailed Analysis of Peripheral Blood Natural Killer Cells in Women with Repeated IVF Failure

Article

Feb 2012
AM J REPROD IMMUNOL

To analyse the peripheral blood NK cells in women with repeated IVF failure (RIF) and a fertile control group to determine which parameters best differentiate the two populations. Peripheral blood from the luteal phase of 171 women with RIF and 33 fertile controls was analysed by four-colour flow cytometry for NK cell concentration, subset differentiation and the activation marker CD69. Women with RIF had significantly increased NK cell numbers as determined by concentration (P < 0.05) and percentage of lymphocytes (P < 0.001), increased concentration of the CD56(dim) subtype (P < 0.05), and increased concentration of activated CD56(dim) CD69(+) cells (P = 0.0001). There was no correlation between any NK cell parameters with the length of infertility or number of embryo transfer cycles. Peripheral blood NK cell activity is significantly higher in women with RIF than in fertile controls. Future trials of immune therapy in women undergoing IVF should target those with high NK activity.

Role of natural killer cells in reproductive failure

Abstract and Figures

Recommended publications

Uterine natural killer cells, implantation failure and recurrent miscarriage

Could the Defects in the Endometrial Extracellular Matrix During the Implantation Be a Cause for Imp...

Endometrial receptivity and the luteal phase

Serum activity of matrix metalloproteinases -2 and -9