Characterization of Calcium Lactate Prepared from Butter Clam Saxidomus purpuratus Shell Powder

Abstract

To facilitate the effective use of butter clam shell as a natural calcium resource, we determined the optimal conditions for calcium lactate (BCCL) preparation with high solubility using response surface methodology (RSM). The polynomial models developed by RSM for pH, solubility and yield were highly effective in describing the relationships between factors (P<0.05). Increased molar ratios of calcined powder (BCCP) from butter clam shell led to reduced solubility, yield, color values and overall quality. The critical values of multiple response optimization to independent variables were 1.75 M and 0.94 M for lactic acid and BCCP, respectively. The actual values (pH 7.23, 97.42% for solubility and 423.22% for yield) under optimization conditions were similar to the predicted values. White indices of BCCLs were in the range of 86.70–90.86. Therefore, organic acid treatment improved color value. The buffer-ing capacity of BCCLs was strong, at pH 2.82 to 3.80, upon the addition of less than 2 mL of 1 N HCl. The calcium content and solubility of BCCLs were 6.2–16.7 g/100 g and 93.6-98.5%, respectively. Fourier transform analysis of infrared spectroscopy data identified BCCL as calcium lactate pentahydrate, and the analysis of microstructure by field emission scanning electron microscopy revealed an irregular form.

Full text

한수지 49(3), 301-309, 2016
301
Copyright © 2016 The Korean Society of Fisheries and Aquatic Science pISSN:0374-8111, eISSN:2287-8815
Korean J Fish Aquat Sci 49(3),301-309,2016
Original Article
서 론
개조개
(
Saxidomus purpuratus
)
는
백합목
백합과에
속하는
종
으로
2013
년에는
2,199
톤이
우리나라
여수
,
남해
및
마산
연
안에서
생산되었고
,
향과
감칠맛이
뛰어나며
지방이
적고
단백
질이
풍부한
고가의
자연산
식용
패류이다
(Ministry of Ocean
and Fisheries, 2014).
최근
수산물
섭취
증가에
따라
가공
및
조
리
중에
다양한
가공부산물이
발생하고
있으며
,
특히
패류의
경
우
2013
년에
346,000
톤
정도가
생산되었고
,
육질을
채취하고
버려지는
패각은
패류
생산량의
50%
정도인
연간
173,000
톤
정도
발생하는
것으로
추정된다
(Ministry of Ocean and Fisher-
ies, 2014).
지금까지
패각은
토양개량
,
비료첨가제
,
사료첨가
제
(Seco et al., 2014; Oliveira et al., 2013),
폐수정화
,
수질정
화
(Kwon et al., 2009)
등
한정된
분야에서
국한적으로
이용되
었다
.
패각은
중량
당
95-99%
가
탄산칼슘으로
이루어져
있어
(Bar-
ros et al., 2009; Kim et al., 2015),
고부가가치
칼슘소재로의
이
용
가능성이
높다
.
현재
우리나라의
식품첨가물공전에는
칼슘
강화용
화학
합성품으로
유기산을
이용하여
,
가용성을
높인
구
연산
칼슘
, L-
글리세로인산칼슘
,
글루콘산
칼슘
,
제일
(
이
,
삼
)
인산칼슘
,
젖산칼슘
등이
허용되고
있다
.
특히
젖산칼슘은
무독
성의
수용성
(Maekawa et al., 1991)
으로
현재
제빵
(Ranhotra et
al., 1997),
두유
(Prabharaksa et al., 1989),
오렌지쥬스
(Sharma
et al., 2001),
요구르트
(Pirkul et al., 1997)
및
높은
흡수율을
가
개조개(
Saxidomus purpuratus
) 패각분말로부터 젖산칼슘의 제조 및 특성
윤인성·이균우·이현지·박성환·박선영
1
·이수광
1
·김진수
1
·허민수*
경상대학교 식품영양학과/해양산업연구소,
1
경상대학교 해양식품공학과/해양산업연구소
Characterization of Calcium Lactate Prepared from Butter Clam
Saxidomus purpuratus
Shell Powder
In Seong Yoon, Gyoon-Woo Lee, Hyun Ji Lee, Sung Hwan Park, Sun Young Park
1
, Su Gwang Lee
1
,
Jin-Soo Kim
1
and Min Soo Heu*
Department of Food and Nutrition/Institute of Marine Industry, Gyeongsang National University, Jinju 52828, Korea
1
Department of Seafood Science and Technology/Institute of Marine Industry, Gyeongsang National University, Tongyeong 53064,
Korea
To facilitate the effective use of butter clam shell as a natural calcium resource, we determined the optimal conditions
for calcium lactate (BCCL) preparation with high solubility using response surface methodology (RSM). The poly-
nomial models developed by RSM for pH, solubility and yield were highly effective in describing the relationships
between factors (
P
<0.05). Increased molar ratios of calcined powder (BCCP) from butter clam shell led to reduced
solubility, yield, color values and overall quality. The critical values of multiple response optimization to independent
variables were 1.75 M and 0.94 M for lactic acid and BCCP, respectively. The actual values (pH 7.23, 97.42% for
solubility and 423.22% for yield) under optimization conditions were similar to the predicted values. White indices
of BCCLs were in the range of 86.70–90.86. Therefore, organic acid treatment improved color value. The buffer-
ing capacity of BCCLs was strong, at pH 2.82 to 3.80, upon the addition of less than 2 mL of 1 N HCl. The calcium
content and solubility of BCCLs were 6.2–16.7 g/100 g and 93.6-98.5%, respectively. Fourier transform analysis of
infrared spectroscopy data identied BCCL as calcium lactate pentahydrate, and the analysis of microstructure by
eld emission scanning electron microscopy revealed an irregular form.
Key words: Butter clam shell, Calcined powder, Calcium lactate, FT-IR, FESEM
This is an Open Access article distributed under the terms of
the Creative Commons Attribution Non-Commercial Licens
(http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/) which permits
unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium,
provided the original work is properly cited.
http://dx.doi.org/10.5657/KFAS.2016.0301 Korean J Fish Aquat Sci 49(3) 301-309, June 2016
Received 11 February 2016; Accepted 26 April 2016
*Corresponding author: Tel: +82. 55.772.1440 Fax: +82. 55.772.1430
E-m ail add res s: heu1837@dreamwiz.com

윤인성
ㆍ
이균우
ㆍ
이현지
ㆍ
박성환
ㆍ
박선영
ㆍ
이수광
ㆍ
김진수
ㆍ
허민수
302
지는
칼슘
보충제
(Lee et al., 1988)
로써
식
·
의약
산업에서
널리
사용되고
있으며
,
다양한
농작물과
절임식품들의
조직
강화제
(Wang et al., 1999)
로도
사용되고
있다
.
또한
젖산칼슘의
기능
으로는
항균작용
(Shelef, 1994),
골밀도
증진
(Mizunuma et al.,
1996),
항충치능
(Shrestha et al., 1982),
항발암
물질
(Reshef et
al., 1990; Wargovich et al., 1990)
로의
사용
등이
보고되었다
.
불용성의
탄산칼슘
(CaCO3,
패각분말의
주성분
)
또는
산화칼
슘
(CaO,
소성분말
)
은
유기산과
반응하여
산성에서
용해도가
높아질
뿐만
아니라
,
흡수율
또한
개선이
된다
(Gurthrie, 1971;
Lee et al., 2015; Park et al., 2015).
유기산
중에서
젖산은
식품
,
섬유산업
,
화장품
및
제약
산업과
같은
다양한
산업에
적용
가능
하여
(Xu and Xu, 2014),
가용성과
흡수율이
개선된
유기산
칼
슘을
제조하는데
이용이
가능하다
.
이를
이용한
젖산칼슘의
제
조는
일정
농도의
젖산용액과
탄산칼슘
또는
산화칼슘을
첨가
한
뒤
반응시키면
무색
결정의
5
수화염
(calcium lactate penta-
hydrated salt)
이
생성된다
(Lee and Kim, 2003).
앞서의
연구
(Kim et al., 2015)
에서
XRD
분석으로
개조개의
패각분말은
calcite
및
aragonite
로
,
소성분말은
portlandite
로
확
인되어
천연칼슘소재로의
이용이
가능하다고
하였다
.
따라서
,
본
연구에서는
개조개
패각분말을
고부가가치의
고순도
칼슘
제로
활용하고자
,
반응표면분석법을
통해
,
유기산인
젖산을
사
용하여
패각의
불용성
소성분말로부터
가용성
젖산칼슘
제조의
최적
조건을
검토하고
이의
특성에
대하여
살펴보고자
하였다
.
재료 및 방법
시약
본
실험에
사용한
시판
산화칼슘
(CaO, calcium oxide,
M.W.=56.08)
은
Junsei Chemical
사
(Tokyo, Japan)
제품을
,
젖산
[CH3CH(OH)COOH, lactic acid, M.W.=90.08]
은
Tedia
Company
사
(Faireld, California, USA)
의
분석
시약급을
구입
하여
사용하였다
.
개조개 패각분말(SP, shell powder) 및 소성분말(CP,
calcined powder)의 제조
개조개
(BC, butter clam) SP
및
CP
는
Kim et al. (2015)
의
방
법에
따라
제조하였다
.
먼저
개조개
패각에
부착된
이물질
제거
를
위한
수세
및
건조
(45℃, 26
시간
)
과정을
거친
다음
,
이를
분
쇄
(HMF-1000A, Hanil Electric, Seoul, Korea)
및
체가름
(256
mesh)
하여
패각분말
(SP)
을
제조하였다
.
소성분말
(CP)
은
패각
분말
(SP)
을
800℃, 8
시간
동안
회화로
(FH-08, Wisetherm digi-
tal mufe furnace, Daihan Scientic Co. Ltd, Seoul, Korea)
내
에서
소성
처리하여
제조하였다
.
가용성 개선 젖산칼슘 제조를 위한 중심합성계획
개조개
CP
로부터
가용성
젖산칼슘
(BCCL, butter clam calci-
um lactate)
의
제조는
반응표면분석법
(RSM, response surface
methodology)
을
사용하여
최적
처리조건을
구명하고자
하였
다
.
즉
,
중심합성계획
(central composite design)
에
따른
독립변
수
(Xi)
는
젖산
(lactic acid, M.W.=90.08)
의
농도
(0.86-1.80 M,
X1)
와
산화칼슘
(CaO, M.W.=56.08)
의
농도
(0.29-1.70 M, X2)
를
5
단계로
부호화한
다음
(Table 1), factorial design (4), star
point (4)
및
central point (3)
로
구성한
11
개의
실험구로
설정
하여
,
액상의
젖산칼슘
반응물을
제조하였다
.
이
11
개의
액상
젖산칼슘을
감압여과장치
(WJ-15, circulating aspirator, Sibata
Scientic Technology Ltd., Tokyo, Japan)
와
여과지
(Advantec
No.2, Toyo Roshi Kaishi Ltd., Tokyo, Japan)
를
이용해
불순물
및
미
반응물을
제거하고
,
여과액을
건조기
(SWOF-105, Dai-
han Scientic, Seoul, Korea)
로
105℃
에서
24
시간
동안
건조하
여
시제
분말
BCCLs
를
제조하였다
.
또한
종속변수
(Yn)
는
pH
(Y1),
용해도
(Y2)
및
수율
(Y3)
로
하였으며
,
이를
3
회
반복
측정
하여
그
평균값을
회귀분석에
사용하였다
.
회귀분석에
의한
예
측
및
확인은
MINITAB
프로그램
(Minitab version 14 Korean,
Minitab Inc., State College, PA, USA)
을
,
독립변수와
종속변
수간의
상관관계는
Maple
프로그램
(Maple software version
12 Korean, Waterloo Maple Inc., Ontario, Canada)
을
이용
하였다
.
회귀분석
결과
,
임계점
(critical point)
이
최대점
(maxi-
mum)
또는
최소점
(minimum)
이
아닌
안장점
(saddle point)
일
경우에는
능선분석
(ridge analysis)
을
하여
최적점을
구하였다
.
Table 1. Experimental range and values of the independent vari-
ables in the central composite design for preparation of calcium
lactate from butter clam
Saxidomus purpuratus
calcined powder
Independent
variable Symbol Range levels
-1.414 -1 0+1 +1.414
Lactic acid (M) X
1
0.86 1.00 1.33 1.67 1.80
CaO (M) X
2
0.29 0.50 1.00 1.50 1.70
pH, 용해도 및 수율
11
개
액상
BCCLs
의
pH
는
pH meter (744, Metrohm, Heri-
sau, Switzerland)
를
사용하여
측정하였으며
,
용해도
(solubility,
%)
는
각
조건
별
액상
BCCLs
에
대해
감압여과
한
후
,
불용성의
잔사를
건조
(105℃, 5
시간
)
하여
중량을
측정하고
,
이를
각
시료
중량으로부터
공제한
값의
백분율로
구하였다
.
Solubility (%) = (Sample, g - Residue, g) / Sample, g × 100
수율
(Yield, %)
은
각
조건별
액상
BCCLs
에
대해
감압여과
한
여과액을
건조하여
(105℃, 5
시간
)
얻어진
가용성
분말의
무게
를
측정한
후
,
시료
중량의
백분율로
구하였다
.
Yield (%) = Dried ltrate, g / Sample, g ×100

개조개 패각으로 제조한 젖산칼슘의 특성
303
색차(Hunter's color value) 및 White index
시제
BCCLs
의
색차는
명도
(L, lightness),
적색도
(a, redness;
-a, greenness),
갈색도
(b, brownness; -b, blueness)
에
대해
직
시색차계
(ZE-2000, Nippon Denshoku Indusries Co., Tokyo,
Japan)
를
사용하여
측정하였으며
,
색차계는
사용하기
전
cali-
bration plate (L=96.92, a=-0.38, b=0.64)
를
이용하여
보정하였
다
.
또한
백색도는
다음
식으로부터
구하였다
.
White index = 100 - (100 -
L
)2 +
a
2 +
b
2
완충능
완충능은
Cho et al. (2001a)
의
방법을
다소
수정한
Lee et al.
(2015)
의
방법에
따라
측정하였다
.
일정량의
젖산칼슘
시료
(1
g)
를
탈이온수
(20 mL)
에
용해시키고
, 2,000
g
에서
15
분간
원
심분리한
후
,
상층액
(10 mL)
에
대해
1 N HCl
을
0.1 mL
씩
첨가
하면서
pH
의
변화를
측정하였다
.
무기질 분석
무기질
분석
시료는
Kim et al. (2015)
의
방법에
따라
0.1 g
의
BCCLs
에
5 mL
의
6 N HCl
을
가하여
습식분해를
2
회
반복한
후
, 0.1 N HCl
을
사용하여
10 mL
를
정용하여
조제하였다
.
분석
용
시료는
ICP (inductively coupled plasma spectrophotome-
ter, Optima 4300 DV, PerkinElmer, Inc., Waltham, MA, USA)
를
사용하여
223±1 kPa
및
0.8 L/min
의
조건에서
분석하였다
.
칼슘 용해도
칼슘의
용해도
(calcium solubility, %)
는
Lee et al. (2015)
의
방법에
따라
, 20 mL
의
탈이온수에
각각
5 g
의
시판
CaO
및
BCCLs
를
첨가
후
상온에서
3
시간동안
진탕하면서
용해한
후
,
원심분리
(2,000
g
, 15 min)
하였다
.
그
다음
불용성의
잔사를
건
조
(105℃, 5
시간
)
하여
중량을
측정하고
,
이를
각
시료
중량으로
부터
공제한
값의
백분율로
구하였다
.
Calcium solubility (%) = (Sample, g - Residue, g)
/ Sample, g × 100
FT-IR 및 미세구조 분석
BCCL
의
구조
분석은
Kim et al. (2015)
의
방법에
따라
, FT-
IR (Fourier transform infrared spectrometer, Smart-APEX II
Ultra, Buruker Optics Inc., Billerica, MA, USA)
을
사용하여
4,000-400 cm-1
영역에서
측정하였으며
,
미세구조의
분석은
시
료를
금
코팅
(gold coating)
처리한
다음
, 15 KV, 2,000
배
비
율로
전계방출형
주사전자
현미경
(FESEM, Field Emission
Scanning Electron Microscope, Philps XL-30S FEG, Eind-
hoven, Netherlands)
으로
분석하였다
.
결과 및 고찰
중심합성계획에 의한 젖산칼슘 제조
반응표면분석법의
중심합성계획에
따라
독립변수는
젖산
농
도
(X1, M)
및
산화칼슘
(CaO, CP)
농도
(X2, M)
로
하고
, 11
개
의
실험구로
설정하여
시료
(factorial design, 4
개
실험구
; star
point, 4
개
실험구
; central point, 3
개
실험구
)
를
제조한
다음
,
종
속변수로서
pH,
용해도
(%)
및
수율
(%)
에
대한
결과를
Table 2
에
나타내었다
.
4
개의
factorial design
실험구
(Code 1-4)
의
경우
,
상대적
으로
CP
의
첨가
비율이
높은
Code 3
은
pH (10.89),
용해도
(23.10%)
및
수율
(170.54%)
이
첨가비율이
낮은
다른
3
개의
실
험구
(Code 1, 2
및
4)
에
비해
용해도
(92.08-97.68%)
및
수율
(237.20-663.04%)
이
현저히
낮은
수준이었다
. 4
개의
star point
실험구
(Code 5-8)
의
경우에는
,
상대적으로
젖산첨가
비율이
높
은
실험구
(Code 6
및
7)
의
용해도
(
각각
95.00
및
93.13%)
와
수
율
(
각각
413.75
및
845.31%)
은
CP
첨가
비율이
높은
Code 5
와
8
에
비해
높은
경향을
나타냈다
.
또한
3
개의
central point
실험구
(Code 9-11)
는
모두
동일한
code level
로
제조된
결과로
pH
는
10.73-11.21,
용해도는
71.07-79.46%,
수율은
314.02-
318.39%
이었다
.
Lee et al. (2015)
은
개조개
소성분말로부터
반응표면분석법
을
이용하여
제조한
초산칼슘의
용해도는
25.36-84.55%
범위
로
,
본
실험의
젖산칼슘
(23.10-97.68%)
이
다소
높은
경향이었
다
.
또한
Cho et al. (2001a)
및
Kim et al. (2003)
은
갑오징어
갑
소성분말은
용해도가
낮고
, pH
는
12.9
부근으로
알칼리성이어
서
식용으로
이용하기에는
제약이
많아
유기산
(
초산
및
젖산
)
처리를
통해
pH
를
낮추면서
가용성은
개선된다고
하였고
,
아울
러
초산으로
처리한
것이
젖산으로
처리한
것에
비하여
중성
부
근의
유지가
용이하다고
보고하였다
. Ko and No (2002a)
는
타
조알
껍질분말
,
소성분말
및
젖산칼슘의
용해도는
각각
0.58%,
3.43%
및
97.7%
라고
하였으며
,
소성처리
및
젖산처리
과정을
통해
각각
약
6
배
및
168
배가량의
용해도가
개선되었으며
,
유기
산
처리가
칼슘제로서의
체내
이용률을
높일
수
있다고
(Cho et
al., 2001b)
하였다
. Kang et al. (2005)
은
꼬막
패각
소성분말로
부터
제조한
젖산
처리
농도별
젖산칼슘의
수율은
373-393%
라
고
하였으며
,
젖산농도와
꼬막
패각
소성분말의
비율에
따른
큰
차이를
나타내지는
않는다고
보고하였다
.
이상의
실험
결과와
관련한
연구들에서
폐기되는
칼슘자원
(
난각
,
패각
,
뼈
)
으로부터
칼슘원으로
이용하기
위해서는
유기
물
제거를
위해
소성처리
과정이
필수적이며
,
가용성
개선을
위
해서는
적정
유기산
처리
조건의
최적화가
필요할
것으로
판단
되었다
.
개조개
CP
와
젖산처리
농도의
최적화를
위해
, pH,
용해도
및
수율의
결과
(Table 2)
에
대하여
MINITAB
통계
프로그램
으로
RSREG (response surface analysis by least-squares

윤인성
ㆍ
이균우
ㆍ
이현지
ㆍ
박성환
ㆍ
박선영
ㆍ
이수광
ㆍ
김진수
ㆍ
허민수
304
regression)
를
실시한
후
, 1
차항
(linear; X1, X2),
이차항
(qua-
dratic; X1
2, X2
2)
및
교차항
(cross-product; X1X2)
과
같은
회
귀방정식의
계수들과
이들의
유의성은
5%
수준에서
유의성
이
인정되어
(
데이터
미제시
),
이를
정리하여
작성한
pH (Y1),
용해도
(Y2),
및
수율
(Y3)
에
대한
반응모형
방정식은
각각
11.0033-1.1455X1+3.0946X2-1.3810X1
2 - 2.0910X2
2, 76.427 +
18.612X1 - 20.300X2 + 18.228X1X2
및
315.71 + 72.44X1-
203.75X2 + 93.59X2
2
이었다
.
3
개의
종속변수
(Yn)
에
대한
반응
모형방정식의
결정
계수
(R2)
는
pH (Y1),
용해도
(Y2),
수율
(Y3)
의
경우
모두
88.1%
이
상으로
적합한
모델이라고
판단되었으며
,
P
-value
또한
0.004
이하로
유의성이
인정되었다
(
데이터
미제시
).
반응
모형
방정
식을
토대로
구한
독립변수
(
젖산
및
CP
의
농도
)
와
이에
따른
개
별
종속변수
(
각각
pH,
용해도
,
수율
)
의
예측
값은
Table 3
에
나
타내었다
.
pH (Y1)
에
대한
젖산농도
(X1)
와
CP
농도
(X2)
의
부호화된
값
(code value)
의
경우
,
각각
0.9329, -0.4170
이었고
,
이를
실제
값
(uncoded value)
으로
환산하면
,
각각
1.64 M, 0.79 M
이었다
.
이
조건에서
제조한
BCCL
의
pH
는
7.00
으로
예측되었다
.
용해도
(solubility, Y2)
에
대한
젖산농도
(X1)
및
CP
농도
(X2)
의
실제
값
(uncoded value)
은
1.45 M
및
0.29 M
이었으며
,
이
조건에서의
용해도는
95.00%
로
예측
되었다
.
또한
,
수율
(yield, Y3)
의
경우
,
실제
값
(uncoded value)
은
각각
1.33 M
및
0.82 M
이었고
,
이
조
건에서의
예측
수율은
400.00%
이었다
.
한편
, BCCL
의
pH,
용
해도
및
수율을
모두
충족할
수
있는
최적
젖산농도
(X1)
와
CP
농도
(X2)
의
부호화된
값
(code value)
은
각각
1.2502
및
-0.1149
으로
,
이를
실제
값
(uncoded value)
으로
환산하면
각각
1.75 M
과
0.94 M
이었다
.
이들
최적
조건을
적용하여
BCCL
을
제조
한
다음
pH,
용해도
및
수율을
측정한
결과
(Table 4)
는
각각
pH
7.23, 97.42%, 423.22%
로
이들의
예측치인
pH 7.00,
용해도
95.65%,
수율
416.71%
에
비하여
3.3%
이내의
오차범위를
나
타내었다
.
색차(Hunter's color value) 및 White index
시제
BCCLs
의
색차는
Table 5
에
나타내었으며
,
먼저
젖산
Table 2. Central composite design and responses of dependent variables for preparation calcium lactate from butter clam
Saxidomus purpu-
ratus
calcined powder to independent variables
Code Coded levels of variable Response Coefcients
Assessed by
X
1
Lactic acid (M) X
2
CaO (M) Y
1
pH Y
2
Solubility (%) Y
3
Yield (%)
1-1 (1.00) -1 (0.50) 4.34 97.68 451.96
Factorial design
(4 points)
2 1 (1.67) -1 (0.50) 3.32 93.75 663.04
3-1 (1.00) 1 (1.50) 10.89 23.10 170.54
4 1 (1.67) 1 (1.50) 10.68 92.08 237.20
5-1.414 (0.86) 0 (1.00) 11.27 35.71 200.36
Star points
(4 points)
6 1.414 (1.80) 0 (1.00) 5.66 95.00 413.75
7 0 (1.33) -1.414 (0.29) 3.21 93.13 845.31
8 0 (1.33) 1.414 (1.70) 10.88 32.21 192.84
9 0 (1.33) 0 (1.00) 10.73 78.75 314.73
Central points
(3 points)
10 0 (1.33) 0 (1.00) 11.07 71.07 318.39
11 0 (1.33) 0 (1.00) 11.21 79.46 314.02
Table 3. Optimal conditions of multiple responses for preparation
of calcium lactate from butter clam
Saxidomus purpuratus
cal-
cined powder using MINITAB program
Dependent
variables
Independent
Variables
Critical value Predicted
value
Coded Uncoded
Y
1
pH
X
1
0.9329 1.64 7.00
X
2
-0.4170 0.79
Y
2
Solubility (%)
X
1
0.3387 1.45 95.00
X
2
-1.4142 0.29
Y
3
Yield (%)
X
1
0.0000 1.33 400.00
X
2
-0.3556 0.82
Mutiple
response
optimization
X
1
1.2502 1.75 Y
1
: 7.00
Y
2
: 95.65
Y
3
: 416.71
X
2
-0.1149 0.94
Table 4. Experimental and predicted results of verication in prep-
aration of calcium lactate from butter clam
Saxidomus purpuratus
calcined powder under optimized conditions
Dependent variables Predicted values Experimental values
Y
1
pH 7.00 7.23±0.32
Y
2
Solubility (%) 95.65 97.42±1.42
Y
3
Yield (%) 416.71 423.22±0.23
Experimental values are mean of three determinations.

개조개 패각으로 제조한 젖산칼슘의 특성
305
칼슘
제조의
주재료인
개조개
패각분말
(BCSP, butter clam
shell powder)
과
개조개
소성분말
(BCCP, butter clam calcined
powder)
의
명도
(81.26
및
87.33),
적색도
(1.38
및
0.32),
갈색
도
(3.15
및
5.39)
그리고
white index
는
80.95
및
86.23
이었
다
(Kim et al., 2015).
시제
BCCLs
의
명도를
나타내는
L
값은
87.52-91.34
범위로
, BCSP
와
BCCP
에
비해
개선된
것으로
확인되었다
.
적색도는
시제
BCCLs
의
값은
BCSP
보다
낮은
-1.62-1.38
범위였다
.
갈색도
(b, brownness; -b, blueness)
의
경
우
, Code 6
및
7
의
갈색도는
각각
9.11, 6.06
로서
BCCP
보다
높
은
값을
나타낸
반면
,
이를
제외한
나머지
8
개의
시제
BCCLs
의
갈색도는
-0.06-4.44
의
범위였다
.
이상의
색차
값으로부터
산출
한
시제
BCCLs
의
백색도
(white index)
는
86.70-90.86
범위로
서
소성처리
및
유기산
처리과정을
통해
백색도는
개선되었다
.
한편
,
가다랑어
뼈
(Kim et al., 2000a),
갑오징어
갑
(Cho et al.,
2001b),
타조알
껍질
(Ko and No, 2002b)
의
소성처리를
통해
백
색도가
개선되었다고
하였으며
,
갑오징어
갑
초산칼슘
(Kim et
al., 2003),
개조개
초산칼슘
(Lee et al., 2015),
바지락
초산칼슘
(Park et al., 2015),
꼬막
젖산칼슘
및
구연산칼슘
(Kang et al.,
2005)
의
경우도
유기산처리를
통한
칼슘제의
제조과정에서
백
색도가
개선됨을
확인할
수
있었다
.
완충능
시판
산화칼슘
(CaO)
과
중심합성계획에
따라
제조한
시제
BCCLs
의
완충능은
Fig. 1
에
나타내었다
.
시제
BCCLs
용액
(5%, w/v)
의
pH
는
젖산농도
/CP
첨가비율에
따라
pH 3.26-
12.20
범위였으며
,
이는
젖산농도에
비하여
CP
의
첨가
비율이
상대적으로
높을수록
pH
는
높아지는
경향이었다
.
한편
시판
산
화칼슘의
경우
, pH
는
12.75
였으며
, 0.8 mL
의
1 N HCl
첨가
Table 5. Hunter's color values and white index of calcium lactate from butter clam
Saxidomus purpuratus
calcined powder
Code L a b white index
1
BCSP 81.26 ±0.01 1.38 ±0.01 3.15 ±0.01 80.95
1
BCCP 87.33 ±0.03 0.32 ±0.01 5.39 ±0.01 86.23
187.52 ±0.01
j
0.21 ±0.01
d
4.44 ±0.01
c
86.75
287.80 ±0.02
i
1.38 ±0.00
a
3.28 ±0.01
d
87.29
388.59 ±0.04
g
1.05 ±0.01
b
-0.06 ±0.01
j
88.54
490.20 ±0.02
d
0.22 ±0.01
d
1.29 ±0.01
g
90.11
588.65 ±0.02
f
-0.36 ±0.01
h
2.48 ±0.01
e
88.38
691.34 ±0.02
a
-1.62 ±0.02
i
9.11 ±0.01
a
87.32
788.16 ±0.02
h
0.14 ±0.01
e
6.06 ±0.00
b
86.70
890.50 ±0.02
c
-0.10 ±0.01
g
0.88 ±0.01
h
90.46
991.08 ±0.02
b
-0.03 ±0.01
f
2.00 ±0.01
f
90.86
10 89.04 ±0.04
e
1.00 ±0.01
c
0.30 ±0.00
i
88.99
1Date were quoted from our previous paper (Kim et al., 2015).
Values represent the mean±SD of n=3.
Means with different letters within the same column are signicantly different at
P
<0.05 by Duncan's multiple range tests.
Fig. 1. Buffering capacity of calcium lactate prepared from butter
clam
Saxidomus purpuratuss
calcined powder.
0
3
6
9
12
0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0
pH
1 N HCl, mL
CaO 1
2 3
4 5
6 7
8 9
10 11
4.5
96.8 97.5 97.7 97.9 97.5 97.3 98.5 93.6 97.9 97.9 97.6
0
30
60
90
120
CaO 12345678910 11
Solubility, %
Sample
시
11.54
로
강한
완충능을
알칼리
영역에서
나타내었다
.
시제
BCCLs
에
대하여
1 N HCl
을
0.1 mL
단위로
첨가하면서
pH
의
변화를
검토한
완충능은
초기
0.1 mL
의
첨가에서
pH 3.24-
12.10
범위를
나타내었으며
, 1.0 mL
의
첨가에서는
pH 3.00-
4.41
범위로
완만한
pH
감소를
나타내었으며
,
약산성
영역에
서
완충능을
나타내었다
.
아울러
2 mL
의
첨가에서도
pH 2.82-
3.80
범위를
나타내어
완충능이
유지되는
것을
확인
할
수
있었
다
.
따라서
시제
BCCLs
칼슘
강화소재로서
다양하게
응용
가
능할
것으로
판단되었다
.
무기질 분석
앞서의
연구결과
(Kim et al., 2015)
에서
BCCP
의
칼슘함량
은
51,140 mg/100 g
이었으며
,
이를
사용하여
중심합성계획

윤인성
ㆍ
이균우
ㆍ
이현지
ㆍ
박성환
ㆍ
박선영
ㆍ
이수광
ㆍ
김진수
ㆍ
허민수
306
에
따라
제조한
시제
BCCLs
의
무기질
함량은
Table 6
과
같
다
.
먼저
칼슘
(Ca)
함량의
경우
, Code 2 (6,485 mg/100 g)
와
7
(6,200 mg/100 g)
을
제외하면
, 9
개의
시제
BCCLs
의
칼슘함
량은
11,201- 16,659 mg/100 g
의
범위였다
.
칼륨
(K)
의
함량은
11
개의
시제
BCCLs
는
30.78-81.98 mg/100 g
으로
젖산농도와
BCCP
첨가량
조건에
따라
칼륨
함량에
차이를
나타내었다
.
이
는
젖산농도에
비해
상대적으로
BCCP
의
첨가량이
많은
경우
,
높은
함량을
보여
이에
따른
차이라
추정되었다
.
시제
BCCLs
의
마그네슘
(Mg)
의
함량은
0.00-10.98 mg/100 g
이었으며
,
나
트륨
(Na)
의
경우
, 152.74-444.03 mg/100 g
을
나타내었다
.
가다랑어
뼈
소성분말
(Kim et al., 2000b)
의
칼슘은
36,300
mg/100 g,
갑오징어
갑
소성분말
(Cho et al., 2001b)
의
칼슘이
약
70,518 mg/100 g,
타조알
껍질
소성분말
(Ko and No, 2002b)
의
경우는
49,980 mg/100 g,
그리고
바지락
소성분말
(Kim et
al., 2015)
의
칼슘
함량은
44,890 mg/100 g
으로
시료의
종류에
따라
칼슘함량에
차이가
있었다
.
한편
,
다슬기
소성
분말로부터
식초를
사용하여
제조한
초산칼슘
(Lee et al., 2004)
의
칼슘함량
은
사용한
식초의
종류
따라
16,310-27,150 mg/100 g
의
범위였
으며
,
개조개
초산칼슘
(Lee et al., 2015)
의
경우
, 20,671-22,769
mg/100 g
범위
, Kim et al. (2003)
은
갑오징어
갑
소성분말로부
터
제조한
초산
및
젖산칼슘의
칼슘함량은
각각
21,320-25,700
mg/100 g
및
12,060-12,650 mg/100 g
범위
,
타조알
껍질
젖산
칼슘
(Ko and No, 2002a)
의
칼슘함량은
39,700 mg/100 g
이라
고
보고하였다
.
이상의
결과와
연구보고에서
가용성
개선을
위
하여
소성
처리하는
경우
칼슘함량이
증가하는
것은
고온가열
처리에
의해
이물질
및
유기물의
제거
이외에도
주성분인
탄산
칼슘으로부터
이산화탄소가
휘발하여
산화칼슘이
되어
칼슘이
차지하는
비율이
상대적으로
증가하기
때문이다
.
또한
,
이의
유
기산
처리를
통해
유기산과
산화칼슘인
소성분말간의
몰
농도
비에
따른
화학반응으로
일정
칼슘함량
수준의
유기산
칼슘이
생성되는
것이
확인되었다
.
칼슘 용해도
중심합성계획에
따라
제조한
11
개의
시제
BCCLs
와
시판
CaO
의
20% (w/w)
용액에
대한
칼슘
용해도는
Fig. 2
와
같다
.
시판
CaO
의
칼슘
용해도는
4.5%
이었으며
,
시제
BCCLs
의
경
우에는
93.6-98.5%
범위의
칼슘
용해도를
나타내었다
.
본
실험
에서는
100 mL
의
탈이온수에
시판
CaO
는
0.9 g,
시제
BCCLs
는
18.7-19.7 g
이
용해되었다
.
따라서
,
불용성의
산화칼슘에
비
하여
,
유기산
처리과정을
통한
젖산칼슘의
용해도는
약
21.8
배
개선되었다
.
한편
,
산화칼슘
(M.W. 56.08)
과
젖산칼슘
(M.W.
308.29)
의
분자량을
고려한
순
칼슘용해도
(net calcium solu-
bility, %)
는
시판
CaO
가
0.63%,
그리고
시제
BCCLs
는
2.43-
2.56%
로
환산됨으로써
,
순
칼슘용해도는
약
3.8
배
개선된
것
으로
나타났다
.
앞서의
연구
(Lee et al., 2015)
에서
개조개
20%
Fig. 2. Comparison of calcium solubility of calcium lactate from
butter clam
Saxidomus purpuratus
calcined powder.
0
3
6
9
12
0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0
pH
1 N HCl, mL
CaO 1
2 3
45
6 7
89
10 11
4.5
96.8 97.5 97.7 97.9 97.5 97.3 98.5 93.6 97.9 97.9 97.6
0
30
60
90
120
CaO 12345678910 11
Solubility, %
Sample
Table 6. Minerals content (mg/100 g sample) of calcium lactate from butter clam
Saxidomus purpuratus
calcined powder
Code Ca KMg Na
115191.35 ±114
b
32.55 ±1.89
i
10.98 ±0.10
a
190.56 ±1.41
h
26485.15 ±106
h
50.10 ±1.80
f
7.40 ±0.11
c
189.06 ±1.91
h
316659.20 ±203
a
40.90 ±0.96
g
1.74 ±0.06
e
444.03 ±11.92
a
414756.94 ±14
c
30.78 ±0.47
i
0.87 ±0.00
g
176.61 ±1.75
i
512917.50 ±20
e
81.98 ±1.37
a
0.28 ±0.02
j
358.75 ±2.48
b
614562.50 ±27
c
53.98 ±1.13
d
10.55 ±0.07
b
211.38 ±1.37
f
76200.10 ±45
i
50.62 ±0.87
df
6.21 ±0.04
d
152.74 ±1.47
j
812105.30 ±10
f
64.20 ±0.60
b
0.00 ±0.01
k
325.07 ±2.58
c
913465.57 ±30
d
60.48 ±0.21
c
0.45 ±0.01
i
242.02 ±2.62
e
10 16590.00 ±324
a
52.98 ±1.70
de
1.05 ±0.07
f
290.25 ±2.38
d
11 11201.49 ±258
g
38.06 ±2.57
h
0.60 ±0.05
h
202.04 ±3.16
g
Values represent the mean±SD of n=3.
Means with different letters within the same column are signicantly different at
P
<0.05 by Duncan's multiple range tests.

개조개 패각으로 제조한 젖산칼슘의 특성
307
(w/w)
초산칼슘
용액의
칼슘용해도는
97.0-99.6%
이었으며
,
분
자량을
고려한
순
칼슘
용해도는
4.27-4.38%
라고
하였다
.
본
실
험의
개조개
젖산칼슘은
개조개
초산칼슘에
비하여
단순
용해
도는
비슷한
수준이었으나
,
순
칼슘용해도에서는
55.5-60.0%
수준으로
초산칼슘에
비해
상대적으로
칼슘의
가용성이
낮은
것으로
나타났다
.
이는
갑오징어갑
소성분말로
제조한
초산
및
젖산칼슘의
순
칼슘
용해도가
각각
5.27-5.30%
와
1.35-1.38%
(w/v)
를
나타내어
초산칼슘의
용해도가
젖산칼슘
용해도
보다
높다고
한
보고와
유사하였다
(Kim et al., 2003).
이상의
결과와
연구보고에서
소성분말로부터
유기산처리는
획기적으로
칼슘
의
가용성을
높였으며
,
사용
유기산의
분자량이
작을수록
순
칼
슘
용해도가
높다는
것이
확인
되었다
.
FT-IR 및 SEM 분석
최적조건에서
제조한
BCCL
의
FT-IR
을
이용한
결정구조
분
석
(Fig. 3)
에서
,
시제
BCCL
의
spectrum
은
C-X
흡수밴드인
547 cm-1, C-H
흡수밴드인
672, 766, 859
및
2984 cm-1, C-O
흡수밴드인
1031, 1281 cm-1, C=C
흡수밴드인
1,438 cm-1,
C=C/C-H
흡수밴드인
1484 cm-1, C=O
흡수밴드인
1,578 cm-
1, O-H
흡수밴드인
3,375 cm-1
가
검출되었으며
,
젖산칼슘
5
수
화물
(calcium lactate pentahydrate)
로
동정되었다
.
한편
,
앞서
의
연구
(Kim et al., 2015)
에서
BCCP
의
spectrum
은
C-H
흡
수밴드인
703, 875 cm-1, C-O
흡수밴드인
1,141 cm-1, C=C/C-
H
흡수밴드인
1,484 cm-1, C=O bond
흡수밴드인
1,781 cm-1
및
O-H bond
흡수밴드인
3,614 cm-1
가
검출되어
, portlandite
(
수산화칼슘
)
로
동정되었다
. Park et al. (2008)
은
탄산칼슘의
polymorphs
로서
calcite
와
aragonite
를
이용한
젖산칼슘의
FT-
IR
스펙트럼
특징은
3,000-3,500 cm-1
범위에서
강한
O-H
결합
과
1,500-1,750 cm-1
범위에서의
카르보닐
결합이라고
하였으
며
, Lee and Kim (2003)
의
다슬기
분말
젖산칼슘의
FT-IR
분
석에서도
젖산칼슘의
전형적인
특징인
O-H
결합
, C=O
결합
,
C-H
결합이
각각
3,000-3,500 cm-1, 1,500-1,750 cm-1, 1,300-
1,400 cm-1
파장범위에서
나타난다고
하여
,
본
연구결과와
일
치하는
경향이었다
.
주사
전자
현미경
(FESEM)
에
의한
개조개
CP
의
미세구조
(Kim et al., 2015)
는
다공성이
없는
1-10 μm
의
비정형의
결정
구조로
확인되었으며
,
개조개
소성분말로
제조
한
BCCL
의
미세구조
(Fig. 3)
에서도
마찬가지로
비정형
결정
(irregular crystal)
으로
관찰되었다
.
한편
,
침강성
탄산칼슘으로
제조한
젖산칼슘의
SEM
관찰을
통해
판상형의
결정이라고
하
여
본
실험결과와는
형태상에서
차이를
나타내었다
(Park et al.,
2008).
이러한
차이는
젖산칼슘의
제조에
있어
,
칼슘원의
차이
(
산화칼슘과
침강성
탄산칼슘
)
에
기인하는
것으로
판단되었다
.
패류의
대표적인
가공부산물인
패각은
칼슘소재뿐만
아니라
,
칼슘
용해도를
높인
유기산
칼슘의
제조를
통한
칼슘강화
식품
Fig. 3. FT-IR Spectra (Left) and Scanning electron micrograph (×2,000) (Right) of calcined powder (BCCP, Up) and calcium lactate (BCCL,
Bottom).

윤인성
ㆍ
이균우
ㆍ
이현지
ㆍ
박성환
ㆍ
박선영
ㆍ
이수광
ㆍ
김진수
ㆍ
허민수
308
소재로의
이용
가능성이
높다고
판단되었다
.
References
Barros MC, Bello PM, Bao M and Torrado JJ. 2009. From waste
to commodity: transforming shells into high purity cal-
cium carbonate. J Cleaner Prod 17, 400-407. http://dx.doi.
org/10.1016/j.jclepro.2008.08.013.
Cho ML, Heu MS and Kim JS. 2001a. Food component char-
acteristics of cuttle bone as a mineral source. J Korean Fish
Soc 34, 478-482.
Cho ML, Heu MS and Kim JS. 2001b. Study on pretreatment
methods for calcium extraction from cuttle bone. J Korean
Fish Soc 34, 483-487.
Guthrie HA. 1971. Introductory Nutrition, 2nd edn. Mosby,
Saint Louis, U.S.A., 109-111.
Kang MS, Soh GS and Shin DH. 2005. Purity improvement of
calcium lactate and calcium citrate prepared with shell of
Anadarac tegillarca granosa. J Fd Hyg Safety 20, 128-133.
Kim HS, Lee MY and Lee SC. 2000b. Characteristics of sepiae
os as a calcium source. J Korean Soc Food Sci Nutr 29, 743-
746.
Kim JS, Cho ML, Heu MS, Cho TJ, An HJ and Cha YJ. 2003.
Solubility improvement of cuttle bone powder using or-
ganic acids. J Korean Fish Soc 36, 11-17. http://dx.doi.
org/10.5657/kfas.2003.36.1.011.
Kim JS, Cho ML and Heu MS. 2000a. Preparation of calcium
powder from cooking skipjack tuna bone and its char-
acteristics. J Korean Fish Soc 33, 158-163. http://dx.doi.
org/10.3746/jkfn.2007.36.6.766.
Kim JS, Jung NY, Jang SJ, Lee HJ, Park SH, Kim MJ and Heu
MS. 2015. Characteristics of the shells and calcined pow-
ders from the butter clam Saxidomus purpuratus and little-
neck clam Ruditapes philippinarum as a natural calcium re-
source. Korean J Fish Aquat Sci 48, 168-177. http://dx.doi.
org/10.5657/KFAS.2015.0168.
Ko MK and No HK. 2002a. Preparation of calcium lactate from
ostrich egg shell. J Korean Soc Food Sci Nutr 31, 241-245.
http://dx.doi.org/10.3746/jkfn.2002.31.2.241.
Ko MK and No HK. 2002b. Studies on characteristics of ostrich
egg shell and optimal ashing conditions for preparation of
calcium lactate. J Korean Soc Food Sci Nutr 31, 236-240.
http://dx.doi.org/10.3746/jkfn.2002.31.2.236.
Kwon YT, Lee CW and Yun JH. 2009. Development of vermi-
cast from sludge and powdered oyster shell. J Clean Prod 17,
708-711. http://dx.doi.org/10.1016/j.jclepro.2008.11.014.
Lee GK, Kim YM and Min YC. 1988. The production of cal-
cium lactate by Lactobacillus sporogenes. II. Production of
calcium lactate. Korean J Food Nutr 1, 102-107.
Lee HJ, Jung NY, Park SH, Song SM, Kang SI, Kim JS and Heu
MS. 2015. Characteristics and preparation of calcium acetate
from butter clam (Saxidomus purpuratus) shell powder by
response surface methodology. J Korean Soc Food Sci Nutr
44, 888-895. http://dx.doi.org/10.3746/jkfn.2015.44.6.888.
Lee MY, Lee YK and Kim SD. 2004. Quality characteristics
of calcium acetate prepared with vinegars and ash of black
snail. J Korean Soc Food Sci Nutr 33, 593-597.
Lee YK and KIM SD. 2003. Preparation and characteristics
of calcium lactate from black snail. Nutraceuticals Food 8,
166-172.
Maekawa A, Matsushima Y, Onodera H, Shibutani M, Yoshida
J, Kodama Y, Kurokawa Y and Hayashi Y. 1991. Long-term
toxicity/carcinogenicity study of calcium lactate in F344
rats. Food Chem Toxcol 29, 589-594.
Ministry of Ocean and Fisheries. 2014. Yearbook of marine
resource. [Internet] Retrieved from http://www.mof.go.kr/
article/view.do?articleKey=5197&boardKey=32&menuKe
y=396&currentPageNo=1 on Jun 2015.
Mizunuma H, Okano H, Soda MY, Tokizawa S, Kagami I, Mi-
yamoto S, Honjo SI and Ibuki Y. 1996. Calcium supplements
increase bone mineral density in women with low serum
calcium levels during long-term estrogen therapy. Endocr J
43, 411-415. http://dx.doi.org/10.1507/endocrj.43.411.
Oliveira DA, Benelli P and Amante ER. 2013. A literature review
on adding value to solid residues: egg shells. J Clean Prod
46, 42-47. http://dx.doi.org/10.1016/j.jclepro.2012.09.045.
Park JW, Cho KH, Park JK, Ahn JW and Han C. 2008. A study
on the synthesis of calcium lactate using precipitated cal-
cium carbonate. J Korean Ind Eng Chem 19, 173-178.
Park SH, Jang SJ, Lee HJ, Lee GW, Lee JK, Kim YJ, Kim JS
and Heu MS. 2015. Optimization of calcium acetate prepa-
ration from littleneck clam (Ruditapes philippinarum) shell
powder and its properties. Korean J Food Sci Technol 47,
321-327. http://dx.doi.org/10.9721/kjfst.2015.47.3.321.
Pirkul T, Temiz A and Erdem YK. 1997. Fortication of yoghurt
with calcium salts and its effect on starter microorganisms
and yoghurt quality. Inter Dairy J 7, 547-552. http://dx.doi.
org/10.1016/s0958-6946(97)00030-7.
Prabharaksa C, Olek AC and Steinkraus KH. 1989. Enrichment
of soybean milk with calcium. Acta Biotechnol 9, 9-16.
http://dx.doi.org/10.1002/abio.370090103.
Ranhotra GS, Gelroth JA, Leinen SD and Schneller FE. 1997.
Bioavailability of calcium in breads fortied with different
calcium sources. Cereal Chem 74, 361-363. http://dx.doi.
org/10.1094/cchem.1997.74.4.361.
Reshef R, Rozen P, Fireman Z, Fine N, Barzilai M, Shasha SM
and Shkolnik T. 1990. Effect of a calcium-enriched diet on
the colonic epithelial hyperproliferation induced by N-meth-
yl-N'-nitro-N-nitrodoguanidine in rats on a low calcium and
fat diet. Cancer Res 50, 1764-1767.
Seco N, Fernandez-Sanjurjo MJ, Nunez-Delgado A and Alva-
rez E. 2014. Spreading of mixtures including wastes from
the mussel shell treatment industry on an acid soil: effects
on the dissolved aluminum species and on pasture produc-

개조개 패각으로 제조한 젖산칼슘의 특성
309
tion. J Clean Prod 70, 154-163. http://dx.doi.org/10.1016/j.
jclepro.2014.02.038.
Sharma M, Beuchat LR, Doyle MP and Chen J. 2001. Survival
of Salmonellae in pasteurized, refrigerated calcium-fortied
orange juice. J Food Prot 64, 1299-1304.
Shelef LA. 1994. Antimicrobial effects of lactates: a review. J
Food Prot 57, 445-415.
Shrestha BM, Mundorff SA and Bibby BG. 1982. Preliminary
studies on calcium lactate as an anticaries food additive.
Caries Res 16, 12-17. http://dx.doi.org/10.1159/000260570.
Wang L, Sondi I and Matijevic E. 1999. Preparation of uniform
needle-like aragonite particles by homogeneous precipita-
tion. J. Colloid Interface Sci 218, 545-553. http://dx.doi.
org/10.1006/jcis.1999.6463.
Wargovich M, Allnutt D, Palmer C, Anaya P and Stephens LC.
1990. Inhibition of the promotional phase of azoxymetha-
neinduced colon carcinogenesis in the F344 rat by calcium
lactate: Effect of simulating two human nutrient density lev-
els. Cancer Lett 53, 17-25. http://dx.doi.org/10.1016/0304-
3835(90)90005-i.
Xu K and Xu P. 2014. Efcient calcium lactate production by
fermentation coupled with crystallization-based in situ prod-
uct removal. Bioresour Technol 163, 33-39. http://dx.doi.
org/10.1016/j.biortech.2014.04.002.