A cultura de milho (Zea mays L.) tem um papel de destaque mundial, sendo matéria-prima principalmente no ramo de produção de ração. O desenvolvimento de inoculantes com cepas bacterianas é uma alternativa procurada para incrementar na produtividade da cultura e diminuir tanto o impacto ambiental como o custo para o produtor. Bactérias endofíticas e rizobactérias podem interagir com a planta de forma direta, fornecendo substâncias que auxiliam no crescimento vegetal. Dentre essas substâncias estão o ferro, por meio da produção de sideróforos; o fósforo, por meio da solubilização de fosfato e o ácido indol acético (AIA), pela produção direta de fitormônios. Denominadas PGPB (Plant Growth Promoting Bacteria), estas bactérias também podem atuar como antagonistas a fitopatógenos, produzindo enzimas líticas que impedem sua colonização ou por meio de competição por espaço e nutrientes. O objetivo deste trabalho foi caracterizar fisiológica e filogeneticamente, isolados de bactérias com ação de promoção de crescimento em plantas de milho por meio de testes in vivo e sequenciamento do gene ribossomal 16S. De uma coleção de 150 isolados, nove foram identificados por sequenciamento parcial do gene 16S rRNA em sete diferentes gêneros. Todos foram caracterizados quanto à fixação biológica de nitrogênio, solubilização de fosfato, produção de sideróforos, amilase, celulase, lipase, pectinase, protease, quitinase e urease. Também, foi realizada a quantificação da produção de AIA e teste de antagonismo contra seis fungos isolados de folhas de milho (Alternaria sp., Colletotrichum graminicola, Fusarium verticillioides, Cercospora sp., Bipolaris sp. e Diaporthe sp. Os isolados foram inoculados em sementes de milho com medição de comprimento e volume da raiz e do hipocótilo para representação do crescimento vegetal. Os isolados potenciais promotores de crescimento vegetal foram LGMB221 (Achromobacter sp.) e LGMB242 (Klebsiella sp.). Já os potenciais biocontroladores foram LGMB143 (Bacillus sp.) e LGMB152 (Burkholderia sp.). Em uma segunda etapa, uma coleção de 173 isolados bacterianos foi testada para atividade promotora de crescimento, sendo doze selecionados por apresentarem resultados positivos para produção de sideróforos, solubilização de fosfato, atividade de fixação biológica de nitrogênio e produção de AIA. Os isolados foram inoculados em dois híbridos de milho (ATL100 e KWX628) para as seguintes avaliações biométricas: número de folhas (número por planta), diâmetro do colmo (mm), altura (cm), área foliar (cm2), comprimento radicular (cm), massa da raiz seca (g), massa da folha seca (g), nitrogênio e fósforo foliar (mg/g). Para o híbrido ATL100, o isolado LGMB208 apresentou os melhores resultados nas avaliações biométricas e para o híbrido KWX628, os isolados LGMB125, LGMB225, LGMB239 e LGMB274 apresentaram os melhores resultados no total das avaliações das plantas inoculadas. As cepas com melhores desempenhos são promissoras para confecção de inoculantes alternativos para cultura de milho. Palavras-chaves: Zea mays L., PGPB, antagonismo, FBN, 16S rRNA.