هدفت الدراسة الحالية الى دراسة مكونات حليب الابل العراقية وعزل وتنقية بروتيناته وتقييم كفائتها في تنشيط انواع من الخلايا السرطانية خارج الجسم الحي , تم جمع عينات الحليب من 50 ناقة متواجدة في قضاء الرطبة غرب العراق , ثم تم تقدير المحتوى الكيميائي كالدهن , الرماد , اللاكتوز , البروتين , الاجسام الصلبة الكلية , الاجسام الصلبة اللادهنية , الحموضة , درجة الاس الهيدروجيني , الوزن النوعي , درجة الانجماد للحليب والرطوبة . وتم تحضير بروتينات حليب الابل (الكازائين والشرش) ثم دراسة المحتوى الكلي للبروتين فيها . كما تم تقدير نسبة الاملاح في حليب الابل ودراسة نوعية الاحماض الدهنية وتراكيز المركبات الفعالة وتراكيز الفيتامينات والتركيب الكيميائي للاحماض الدهنية في حليب الابل العراقية . كما وتضمنت الدراسة عزل بروتين الكازائين في وسط حامضي (pH:4.6) وبروتين الشرش والتنقية بعمود التبادل الايوني DEAE- Cellulose . ومن اجل التاكد من نقاوة البروتينات المعزولة اجريت عملية الترحيل الكهربائي على هلام متعدد الاكريلامايد و بجهاز ( HPLC) كروماتوغرافيا السائل عالية الاداء , ولمعرفة تاثير بروتينات الحليب على المحتوى الدقيق للخلايا السرطانية تم اجراء اختبار (HSC)High Screening Content باعتماد بروتينات الكازائين والشرش كمادة مثبطة لخلايا السرطان البشري (A549) Human Lung Adenocarcinoma , ومن اجل تقييم الكفاءة التثبيطية لبروتين الكازائين والشرش ضد انواع مختلفة فقد استعملت اربعة انواع من الخلايا السرطانية A549, MCF7, PC3, HepG2 وتم تحديد نسبة بقاء الخلايا الحية بطريقة اختبار MTT .
اظهر نتائج الدراسة ما يأتي :
- ان حليب الابل يحتوي على تراكيز من الدهن , الرماد , اللاكتوز , البروتين , الاجسام الصلبة الكلية , الاجسام الصلبة اللادهنية , وان درجة الحموضة والاس الهيدروجيني , الوزن النوعي , درجة الانجماد للحليب والرطوبة ضمن الحدود الطبيعية لحليب الابل .
- ان حليب الابل يحتوي على تراكيز عالية من الاملاح المعدنية (الكالسيوم والكلورايد والفسفور والصوديوم والبوتاسيوم ) وبتراكيز اقل (المنغنيز والمغنسيوم والنحاس والحديد والزنك) .
- اظهر تحليل الاحماض الامينية لحليب الابل العراقية انه يحتوي على تراكيز عالية من (الثايرونين والجلوماتيك والسيرين وتربتوفان ) وبتراكيز اقل من ايزوليوسين والتيروسين والثيرونين .
- اظهرت النتائج من تحليل حليب الابل العراقية انه يحتوي على نسب من المركبات الفعالة (اللايسوزايم واللاكتوفرين واللاكتوبيروكسيد وامينوكلوبيولين IgG وامينوكلوبيولين IgA ) .
- واظهرت نتائج تحليل حليب الابل العراقية انه يحتوي تراكيز من الفيتامينات (فيتامينC ونياسين وريبوفلافين وفيتامينB6 وفيتامين B12 والثايمين وان تركيز فيتامين C كان الاعلى.
- بينت نتائج تحليل حليب الابل العراقية انه يحتوي على الاحماض الدهنية المشبعة (كابرليك وكوريك ولوريك وميرستيك وبالمتيك) والاحماض الدهنية غير المشبعة (اللينوليك والاوليك والينولنيك والبيوتريك).
- اظهرت نتائج الفصل لحليب الابل العراقية بعمود التبادل الايوني DEAE-Cellulose ثلاث قمم بروتينية لكل من بروتين الكازائين وبروتين الشرش .
- اشارت نتائج الفصل بجهاز HPLC الى ظهور عدد من القمم التي تشير الى بروتينات مفصولة من حليب الابل العراقيه.
- بينت نتائج الدراسة الحالية ظهور حزم بروتينية مشابهة لبروتين الكازائين القياسي على هلام متعدد الاكريلاميد . وظهور حزم اخرى لبروتين الشرش .
- اشارت نتائج هذه الدراسه الى ظهور حزمتان لبروتين الكازائين وثلاث حزم لبروتين الشرش المعزوله بواسطة عمود المبادل الايوني على هلام الاكريلاميد وتم تعين الاوزان الجزيئيه لهذه البروتينات والمحصوره بين (90000-20000)المتمثله بهذه الحزم.
- عند اجراء التجربة البايولوجية اوضحت نتائج هذه الدراسة امتلاك حليب الابل لفعالية تثبيطية متباينة تجاه محتوى الخلايا السرطانية الاربعة MCF-7, PC3, A549, HepG2 .
- وعند دراسة التركيز المثبط لنصف الخلايا المدروسة IC50 تجاه هذه الخلايا وجد انه كان اكثر فعالية تجاه الخلايا (A549) ثم (MCF-7) ثم (HepG2) ثم (PC3) لبروتينات الشرش . والتركيز المثبط لنصف الخلايا المدروسة لبروتين الكازائين كان اكثر فعالية عند الخلايا (HepG2) ثم (PC3) ثم (MCF-7) ثم (A549) . اظهر تنتائج اختبار المحتوى الخلوي الدقيق (HSC) الذي اظهرته بروتينات حليب الابل ضد الاجزاء الخلوية باستعمال مجهر الفلورسنت Flourescence microscope حدوث انخفاض في عدد الخلايا السرطانية المستخدمة من نوع Human Lung Adenocarcinoma(A549) مع حدوث تغيرات مظهرية في شكل وحجم الميتوكوندريا والانوية مع حدوث تنشيط ملحوظ في Cytochrome C بفعل المعاملة ببروتين الكازائين والشرش في حليب الابل العراقية وهذا ما يشير السمية الموجودة في هذه البروتينات تجاه الخلايا السرطانية عند مقارنتها مع الخلايا غير المعاملة وخلايا السيطرة الموجبة .
- اظهرت نتائج معاملة خلايا (A549) بتراكيز من بروتين الكازائين فعالية تباينت حسب التركيز المستخدم وتبعاً للجزء الذي تاثر بهذه الفعالية فنجد ان تركيز 6.25 مايكروغرام/مل من بروتين الكازائين قد اعطى فعالية تجاه المادة النووية الكلية Total Nuclear Intensity ويليها التركيز 25 مايكروغرام/مل ثم التركيز 12.5 مايكروغرام/مل ثم التركيز 50 مايكروغرام/مل ثم التركيز 100 مايكروغرام/مل . في حين ان التركيز 100 مايكروغرام/مل من الكازائين اعطى اعلى فعالية تجاه نفاذية غشاء الخليةCell Membrane Permeability ثم التركيز(25, 12.5, 6.25, 50) مايكروغرام/مل . في حين ان التركيز 100 مايكروغرام/مل من الكازائين اعطى اعلى فعالية تجاه Cytochrom C ثم التراكيز (150, 25, 12.5, 6.25) مايكروغرام/مل , والتركيز 6.25 مايكروغرام/مل من الكازائين اعطى اعلى فعالية تجاه غشاء الميتوكوندريا Mitochondrial Membrane Potential ثم التراكيز (12.5, 25, 50, 100) مايكروغرام/مل .
- واظهرت نتائج معاملة الخلايا (A459) بتراكيز من بروتين الشرش فعالية تباينت تبعا للتركيز والجزء الذي تثار بهذه الفعالية فنجد ان تركيز 6.25 مايكروغرام/مل من بروتين الكازائين قد اعطى فعالية تجاه المادة النووية الكليةTotal Nuclear Intensity ثم التراكيز (12.5, 25, 100, 50) مايكروغرام/مل . والتركيز 6.25 مايكروغرام/مل اعطى اعلى فعالية تجاه نفاذية الغشاء الخلوي Cell Membrane Permeability ثم التركيز(12.5, 25, 100, 50) مايكروغرام/مل . والتركيز 6.25 مايكروغرام/مل اعطى اعلى فعالية تجاه Cytochrom C ثم التراكيز (12.5, 50, 100, 25) مايكروغرام/مل , والتركيز 25 مايكروغرام/مل اعطى اعلى فعالية تجاه غشاء الميتوكوندريا Mitochondrial Membrane Potential ثم التراكيز (100, 50, 12.5, 6.25) مايكروغرام/مل .
- تم تحديد نسبة بقاء الخلايا حية بطريقة اختبار MTT اذ تم استخدام اربعة انواع من الخلايا السرطانية المدروسة لاظهار التاثير السام لبروتينات الكازائين والشرش اتجاهها . كان التاثير متبايناً تبعاً لنوع الخلايا السرطانية المستخدمة والتراكيز المستخدمة , اظهرت النتائج ان التركيز (2.0) مايكروغرام/مل امتلك اعلى فعالية تجاه الخلايا السرطانية الاربعة بينما اعطى التركيز (0.5) مايكروغرام/مل اقل فعالية تجاه الخلايا السرطانية وكانت نسبة بقاء الخلايا الحية الاعلى عنده . وكانت العلاقة عكسية ما بين التراكيز ونسبة بقاء الخلايا المستخدمة .
- اظهرت الدراسة الحالية ان السمية الخلوية لبروتينات الشرش المعزول من حليب الابل العراقية تجاه الخلايا الاربعة المدروسة وجود تاثير قاتل للخلايا السرطانية المستخدمة وكذلك اعتماداً على التراكيز المستخدمة حيث نلاحظ ان نسبة بقاء الخلايا الحية كانت الاعلى عند التركيز (0.5) مايكروغرام/مل وكانت الفعالية الاعلى تجاه هذه الخلايا الحية عند التركيز (2.0) مايكروغرام/مل أي ان العلاقة كانت عكسية ما بين التركيز ونسبة بقاء الخلايا الحية .