Content uploaded by Stanimir Enchev
Author content
All content in this area was uploaded by Stanimir Enchev on Nov 25, 2015
Content may be subject to copyright.
КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ
Известия ТСХА, выпуск 3, 2013 год
УДК 633.81:632.952
ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИГРИБНОГО ДЕЙСТВИЯ
ЭФИРНЫХ МАСЕЛ ЧАЙНОГО ДЕРЕВА (MELALEUCA ALTERNIFOLIA),
ШАЛФЕЯ (SALVIA OFFICINALIS) И ЭВКАЛИПТА (EUCALYPTUS
GLOBULUS) НА ГРИБ ALTERNARIA SSP,
ИЗОЛИРОВАННОГО ИЗ СТЕВИИ (STEVIA REBA UDIANA)
М. ГЕОРГИЕВА-АНДРЕЕВА, С. ЕНЧЕВ
(Институт земледелия, Болгария)
Испытывалось антигрибное действие трех эфирных масел (чайного дерева, шалфея
и эвкалипта) на Alternaria ssp., изолированного из стевии (Stevia rebaudiana) в различных кон
центрациях (0,2%, 0,15, 0,1, 0,05, 0,025%) в условиях in vitro. Исследуемые эфирные масла
ограничивали рост мицелия гриба Alternaria ssp. Масло чайного дерева обладало наиболее
сильным действием на рост гриба (33-62%), чуть меньшим было воздействие масла шалфея
(29-46%). Масло эвкалипта проявляло умеренное действие по ингибированию роста мицелия
гриба (19-36%). Противогрибной эффект эфирных масел нарастал с увеличением их концен
трации.
Ключевые слова: эфирные масла, Alternaria ssp., антигрибное действие, чайное дере
во, шалфей, эвкалипт, стевия.
Stevia rebbandiana Bertoni — многолетнее субтропическое растение из сем.
Asteraceae, произрастает в Парагвае. Его выращивают из-за листьев, в которых
содержатся сладкие вещества — главным образом стевиозиды, которые не влияют
на метаболизм кровяного сахара и не содержат энергетических калорий [4, 10]. Они
являются природными безвредными подслащивающими веществами, способными
заменить сахар. Именно из-за этих качеств растение представляет собой объект ис
следования во многих странах мира, включая и Болгарию. Так как стевия приндле-
жит к семейству Asteraceae, в отличие от других субтропических растений, ее можно
выращивать в широком диапазоне почвенно-климатических зон, и интродуцировать
в различные страны.
При выращивании на почвах с высоким содержанием органических веществ,
какими являются почвы в Северо-Восточной Болгарии, чувствительность растения
к грибным патогенам возрастает [5].
Одним из наиболее часто встречаемых грибных заболеваний, о котором со
общают многие авторы, является коричневая пятнистость листьев стевии [6, 7, 9].
Коричневые некрозы на листьях стевии, вызываемые грибами рода Alternaria,
132
ухудшают качество и уменьшают торговую стоимость листьев растения [3, 8, 11].
Патоген предпочитает более старые листья, в которых накоплено больше пита
тельных веществ, соответственно и больше стевиозидов. Применение химических
средств против этого заболевания привело бы к накоплению фунгицидных остат
ков в листьях, это вызывает необходимость поиска альтернативных биологиче
ских средств контроля. Такой альтернативой являются эфирные масла, продуци
руемые некоторыми лекарственными растениями. По мнению Ahmet et al. (2005)
образование эфирных масел растениями представляет собой защитный механизм
против патогенов и вредителей. Поэтому они обладают антигрибным и антибак
териальным действием, и их можно применять в качестве естественных фун
гицидов.
Целью настоящего исследования является оценка противогрибного действия
трех эфирных масел — чайного дерева, шалфея и эвкалипта на рост мицелия гриба
Alternarict ssp., а также оценка их потенциала как биологических средств, предназна
ченных для борьбы с исследуемым патогеном.
Материалы и методы исследования
Исследование осуществлено в 2011 г. в лаборатории защиты растений Зем
ледельческого института в городе Шумен, Болгария, где для этой цели из заболев
ших листьев растения Stevia rebandiana был изолирован в чистую культуру гриб
Alternarict ssp.
Для биологического испытания действия эфирных масел чайного дерева, шал
фея и эвкалипта против роста мицелия гриба были заложены агаровые блоки диа
метром 8 мм из активно растущей четырехдневной культуры гриба на среду Чапека,
содержащую эфирные масла в следующих концентрациях — 0,2%; 0,15; 0,1; 0,05
и 0,025%. В контрольном варианте агаровые блоки были посажены в чистую среду
Чапека. Каждый вариант был заложен в 5-и повторностях. Чашки поместили в термо
стат на 7 дней при температуре 25 °С. На 8-й день учитывали диаметр колоний. Про
цент ингибирования мицелия был подсчитан по формуле Deans and Svoboda (1990):
IE (%) = [(С - T)/C]
х
100,
где IE — процент ингибирования; С — исследуемый показатель в контрольном ва
рианте; Т — исследуемый показатель в вариантах с различными концентрациями;
100 — коэффициент.
Статистическая обработка данных была осуществлена методом дисперсионно
го анализа [1].
Результаты и их обсуждение
Из результатов, представленных на рисунке, видно, что все три экстракта
лекарственных растений — чайного дерева, шалфея и эвкалипта в пяти исследуе
мых концентрациях, оказывали подавляющее действие на развитие мицелия гриба
Alternaria ssp.
Процент ингбирования варьировал от 19% (масло эвкалипта в концентрации
0,025%) до 62% (масло чайного дерева в концентрации 0,2%). С увеличением содер
жания эфирных масел в питательной среде нарастало и их подавляющее воздействие
на гриб Alternaria ssp.
133
Влияние концентраций эфирных масел чайного дерева, шалфея и эвкалипта на рост мице
лия гриба Alternaria ssp.
Наиболее сильное иротивогрибиое действие из всех вариантов опыта было
отмечено в пробах, содержащих масло чайного дерева (от 33% при концентрации
0,025%, до 62% при концентрации 0,2%). Ингибирование гриба в высокой степени
отмечено и в вариантах с маслом шалфея (от 29% при концентрации 0,025%, до 46%
при концентрации 0,2%).
Радиальный рост мицелия гриба в вариантах с эфирным маслом эвкалипта
изменялся менее значительно (от 19% при концентрации 0,025%, до 36% при кон
центрации 0,2%) по сравнению с контролем, что свидетельствует о более слабом
действии данного масла против исследованного патогена.
134
В таблице отражены результаты статистической обработки полученных дан
ных. Итоги применения трех эфирных масел в различных концентрациях были оце
нены путем сравнения радиального роста мицелия гриба Alternaria ssp. различных
вариантов с контрольным.
Данные испытаний показывают, что различия между полученными величина
ми в вариантах с маслами лекарственных растений в пяти испытуемых концентраци-
Средний диаметр колоний гриба Alternaria ssp. на питательных средах,
содержащих эфирные масла в различных концентрациях, по сравнению с контролем
Варианты Средний
диаметр, мм t-критерий Достоверность
Концентрация 0,20%
Чайное дерево 1,98-0,41 7,97 ***
Шалфей 2,84-0,41 5,86 ***
Эвкалипт 3,38-0,43 4,32 **
Концентрация 0,15%
Чайное дерево 2,3-0,42 7,1 ***
Шалфей 3,22-0,47 4,32 **
Эвкалипт 3,64-0,39 4,13 **
Концентрация 0,1%
Чайное дерево 2,74-0,41 6,1 ***
Шалфей 3,48-0,40 4,43 **
Эвкалипт 3,86-0,45 3,12 *
Концентрация 0,05%
Чайное дерево 3,22-0,45 4,56 **
Шалфей 3,4-0,43 4,31 **
Эвкалипт 3,9-0,46 2,98 **
Концентрация 0,025%
Чайное дерево 3,52-0,40 4,33 **
Шалфей 3,74-0,46 3,28 *
Эвкалипт 4,24-0,49 2,1
Контроль 5,26
Примечание. Звездочками отмечено наличие существенных различий по t-критерию при разных
уровнях достоверности — * Р 5% > 2,306; ** Р 1 % > 3,355; *** Р 0,1 % > 5,041.
135
ях и в контрольной пробе являются статистически достоверными (за исключением
варианта с эвкалиптом в концентрации 0,025%).
Результаты подтверждают очень высокую достоверность разницы по отно
шению к противогрибному действию чайного дерева в концентрациях 0,2%, 0,15
и 0,1%, и шалфея в концентрации 0,1%, по сравнению с контрольным вариантом.
Масло чайного дерева имеет хорошее ингибирующее действие против гриба
Alternaria ssp. и в более низкой концентрации в питательной среде — 0,05 и 0,025%.
Противогрибные свойства подтверждены в вариантах с шалфеем в концентрациях
0,15%, 0,1, 0,05% и с эвкалиптом в концентрациях 0,2%, 0,15, 0,05%. Эфирное масло
эвкалипта является достоверно эффективным против патогена в концентрации в сре
де 0,01%, а эфирное масло шалфея — в концентрации 0,025%.
Масло чайного дерева при использвании в концентрации 0,2% имеет самое
высокое ингибирующее действие против роста мицелия гриба Alternaria ssp., по
сравнению с маслами шалфея и эвкалипта, применяемыми в той же концентрации,
а также является достоверно более эффективным, чем масло эвкалипта в концентра
ции 0,15%.
Выводы
Масла трех лекарственных растений — чайного дерева, шалфея и эвкалипта,
проявляют ингибирующее действие на мицелий грибов рода Alternaria во всех пяти
испытываемых концентрациях.
Противогрибное действие эфирных масел нарастает с увеличением их концен
трации.
Процент ингибирования роста мицелия варьирует от 19% (от масла эвкалипта
в концентрации 0,025%) до 62% (от масла чайного дерева в концентрации 0,2%).
Наиболее сильное ингибирующее действие отмечено в вариантах, содержащих
масло чайного дерева (от 33 до 62%). Высокую степень воздействия на мицелий по
казало и масло шалфея (от 29 до 46%), а действие эвкалипта — более умеренное
(19-36%).
Библиографический список
1. Запранов 3., Димова Д. Ръководство за упражнения по опитно дело и биометрия.
Земиздат-София. 1995.
2. Ahmet, С., Saban К., Hamdullah К., Егсст К. Antifungal properties of essential oil and
rude extracts of Hypericum linarioides Bosse. Biochem. Syst. Ecol., 2005. 33: 245-256. DOI:
10.1016/j.bse.2004.08.006.
3. Child L.C. Stevia Business Planrebaudiana Bertoni. Thesis. University Nacional de
Colombia. Bogota. 2003. 81 p.
4. Gregersen S., Per B. Jeppesen, Jens J. Holst, Kjeld Herman sen II Metabolism. 2004.
V. 53. № 1. 2004. P. 73-76.
5. Herbotecnia. Hee-Yerba Caa sweet.http://www.herbotecnia.com.ar/aut-stevia.html. 2004.
(Consulted 07/02/2008).
6. Hilal, Arafa A. and Mohanted A. Baiuomv. II Egypt. J. Agric. Res. 2000. 78(4).
P. 1435-1448.
7. Ishiba C., Yokovama T„ Tani T. Black spot disease of stevia caused by Alternaria. Annals
of the Phytopathological Society of Japan 1982. 48(1). P. 44-51.
8. Martinez, P. T. The Sweet Grass, History, Uses and Cultivation of Stevia rebaudiana Bertoni
Health Sciences. Madrid. 2000. 125 p.
136
9. Maiti, С. К. ,S. Sen, R. Acharva andK. Acharya First report ofAltemaria altemata causing
leaf spot onStevia rebaudiana Plant Pathology. 2007. 56, 723.
10. Wingardir R.E., Brown J.R, Enderlin F.E., Dale, JA„ Seitz C.T. //Experientia. 1980. 36.
P. 519-520.
11. ZanonЛ.С. Yerba Dulce, report agronomic about growing Stevia rebaudiana. Secretary
of Agriculture Antioquia. Medellin. 2000. 24 p.
RESEARCH ON ANTIFUNGAL ACTIVITY OF ESSENTIAL OILS FROM
TEA TREE (MELALEUCA ALTERNIFOLIA), SAGE (SALVIA OFFICINALIS)
AND EUCALYPTUS (EUCALYPTUS GLOBULUS) AGAINST ALTERNARIA
SSP. ISOLATED FROM STEVIA (STEVIA REBA UDIANA)
M. GEORGIEVA-ANDREEVA, S. ENCHEV
(Agricultural Institute, Bulgaria)
The antifungal activity of three essential oils (tea tree, sage and eucalyptus) againstAlternaria
ssp., isolated from Stevia rebaudiana were tested at different concentrations (0,2%, 0,15%, 0,1%,
0,05%, 0.025%) in vitro. The essential oils investigated reduced the my celia growth of Alternaria ssp.
The tea tree oil was most effective in inhibiting the mvcelia growth of Alternaria ssp. (33% — 62%),
followed by sage oil (29%-46%). The eucalyptus oil exhibited moderate activity and mvcelia growth
inhibition offungus variedfrom 19% to 36%. Antifungal activity of the essential oils increased with
rising concentration.
Key words: essential oils, Alternaria ssp., antifungal activity, tea tree, sage, eucalyptus,
stevia.
Георгиева-Андреева Мариела — институт земледелия, бул. Симеон велики 3, Шу
мен, 9700 (Болгария). E-mail: staniinir_en@abv.bg.
137
