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Efecto del anestésico aceite de lipia (Lippia alba) sobre juveniles de lubina (Dicentrarchus labrax)

Authors:

Abstract

The use of natural anesthetics in aquaculture has become increasingly important. In this context, the essential oil of Lippia alba (EOLA) is presented as an alternative to traditional methods to mitigate stress in aquaculture. Therefore, the aims of this study were: i) identify the times of anesthesic induction and recovery in juveniles of sea bass (Dicentrarchus labrax), and ii) analyze the physiological changes experienced by juveniles of D. labrax with sedation doses of EOLA. For the first objective different concentrations of EOLA were tested and sedation, anesthesia, as well as recovery times were recorded. A decrease was observed for the sedation and anesthesia times when anesthetic concentration increased. For the second objective, fish were subjected to a simulated transport for 3 to 6 hours under different conditions (control, 450 μL L-1 of ethanol, 25 μL L-1 and 50 μL L-1 EOLA). After the exposure, plasma samples were taken to analyze different stress parameters (cortisol, glucose, lactate), as well as liver samples to determine metabolites (glycogen, triglycerides) levels and enzymatic activities related to the intermediary metabolism of carbohydrates, lipids and proteins.
ACTAS DEL
XV CONGRESO NACIONAL
Y
I CONGRESO IBÉRICO DE ACUICULTURA
“ACUICULTURA, CULTIVANDO EL FUTURO”
Huelva, 13-16 de octubre de 2015
Organismos organizadores:
Instituto de Investigación y Formación Agraria y Pesquera (IFAPA)
Consejería de Agricultura, Pesca y Desarrollo Rural, Junta de Andalucía
Sociedad Española de Acuicultura (SEA)
Editores:
José Ignacio Navas
Maria Luisa Cordero
Salvador Cárdenas
Editoriales:
IFAPA
SEA
Año de Publicación: 2015
ISBN: 978-84-608-2878-5
Depósito Legal: M-32497-2015
XV Congreso Nacional / I Congreso Ibérico de Acuicultura 11
Efectos diarios y estacionales del régimen de temperatura sobre el eje reproductivo del lenguado
senegalés
M. Aliaga-Guerrero et al. …………………………………………………..…………………….…………… 192
Crecimiento y supervivencia de juveniles post-metamórficos de erizo de mar según la densidad de
cultivo
S. de la Uz et al. …………………………………………………..………………………………………… 194
Standardização de um protocolo de criopreservação de duas espécies de ostras de grande
importância comercial
F. Félix et al. …………………………………………………..……………………………………………..… 196
Estudo preliminar da biologia reprodutiva de Marphysa sanguinea (Montagu, 1815) para fins de
aquicultura intensiva em ecossistemas temperados
S. M. F. Ferreira et al. …………………………………………………..…..………………………………… 198
Ciclo reprodutivo da população de amêijoa-boa, Ruditapes decussatus da Lagoa de Óbidos, Leiria,
Portugal
D. Machado et al. …………………………………………………..………………..………………………… 200
Identificación de marcadores moleculares de la pubertad en la lubina europea (Dicentrarchus
labrax)
P. Medina et al. …………………………………………………..…………………………….……………… 202
Fisiología y bienestar animal
Comunicaciones orales
Aspectos funcionales del intestino de Solea senegalensis aclimatados a diferentes salinidades
ambientales: implicaciones para el cultivo
A. Barany et al. …………………………………………………..…………………………..………………… 206
Influencia de la densidad de cultivo sobre diferentes parámetros fisiológicos en la tenca
H. J. Pula et al. …………………………………………………..……………………………..……………… 208
Efecto de la mezcla de lotes y del ayuno pre-sacrificio sobre el bienestar animal de la trucha
arcoíris.
R. Bermejo-Poza et al. …………………………………………………..……………….……………………
210
Efecto del anestésico aceite de lipia (Lippia alba) sobre juveniles de lubina (Dicentrarchus labrax)
M. Maestro et al. …………………………………………………..…………………………………………… 212
Efecto de la natación moderada y sostenida en el crecimiento muscular de la dorada (Sparus
aurata): factores estimuladores y proteolíticos
E.J. Vélez et al. …………………………………………………..……………………………………….…… 214
Evaluación de la adición de aceite esencial de Myrcia sylvatica (G. Mey). DC (AEMS) en la dieta y
su efecto sobre el crecimiento y fisiología de la dorada (Sparus aurata)
Y.A. Parrado-Sanabria et al. …………………………………………………..………………………...… 216
Capacidad sedante del dióxido de carbono y sus mezclas en dorada
M.D. Hernández et al. …………………………………………………..…………………………..………… 218
Diferentes respostas fisiológicos da corvina (Argyrosomus regius) e da dourada (Sparus aurata) em
semelhantes situações de cultivo
L. Ribeiro et al. …………………………………………………..…………………………..………………… 220
Paneles
Evaluación del estrés en transporte de trucha común (Salmo trutta) mediante el análisis de
leucocitos en sangre
V. Chamorro et al. …………………………………………………..…………………….…………………… 222
Efecto del consumo de alimento comercial sobre el tejido hepático de mújol silvestre (Liza aurata,
Risso 1810)
D. Gonzalez-Silvera et al. …………………………………………………..………………………………… 224
212 Fisiología y bienestar animal – C. Oral
Efecto del anestésico aceite de lipia (Lippia alba) sobre juveniles de lubina
(Dicentrarchus labrax)
M. Maestro1, L.N. Simões2, I. Jerez1, J.A. Martos-Sitcha1,3 y J.M. Mancera1
1 Dpto. Biología, Facultad de Ciencias del Mar y Ambientales, Universidad de Cádiz, Av. República Saharaui s/n, 11510 Puerto Real (Cádiz).
E-mail: maria.maestro.cm@hotmail.com
2 Dpto. Fisiologia e Farmacologia, Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil.
3 Instituto de Ciencias Marinas de Andalucía, Consejo Superior de Investigaciones Científicas (ICMAN-CSIC), 11510 Puerto Real (Cádiz).
Abstract
The use of natural anesthetics in aquaculture has become increasingly important. In this context, the essential oil of Lippia alba (EOLA) is
presented as an alternative to traditional methods to mitigate stress in aquaculture. Therefore, the aims of this study were: i) identify the times of
anesthesic induction and recovery in juveniles of sea bass (Dicentrarchus labrax), and ii) analyze the physiological changes experienced by
juveniles of D. labrax with sedation doses of EOLA. For the first objective different concentrations of EOLA were tested and sedation, anesthesia,
as well as recovery times were recorded. A decrease was observed for the sedation and anesthesia times when anesthetic concentration
increased. For the second objective, fish were subjected to a simulated transport for 3 to 6 hours under different conditions (control, 450 μL L-1 of
ethanol, 25 μ L L-1 and 50 μ L L-1 EOLA). After the exposure, plasma samples were taken to analyze different stress parameters (cortisol, glucose,
lactate), as well as liver samples to determine metabolites (glycogen, triglycerides) levels and enzymatic activities related to the intermediary
metabolism of carbohydrates, lipids and proteins.
Resumen
El empleo de anestésicos de origen natural cada vez está más extendido dentro la práctica acuícola. En este contexto, el aceite esencial de
Lippia alba (AELA) se presenta como alternativa a los métodos tradicionales para la mitigación del estrés en acuicultura, por lo que se plantearon
los siguientes objetivos de trabajo: i) identificar los tiempos de inducción y recuperación de sedación y anestesia en juveniles de lubina
(Dicentrarchus labrax) y ii) analizar las modificaciones fisiológicas que sufren los juveniles de D. labrax con dosis de sedación de AELA. Para el
primer objetivo se testaron diferentes concentraciones de AELA y se determinaron los tiempos de sedación y anestesia, así como el tiempo de
recuperación. Se observó una disminución en los tiempos de inducción de sedación y anestesia conforme aumentó la concentración de
anestésico. Para el segundo objetivo los individuos fueron sometidos a un transporte simulado durante 3 y 6 horas bajo diferentes tratamientos
(control, 450 μL L-1 de etanol, 25 μL L-1 y 50 μL L-1 AELA) y se recogieron muestras de plasma para analizar diversos parámetros de estrés
(cortisol, glucosa, lactato), así como muestras de hígado para metabolitos (glucógeno, triglicéridos) y actividad de diversas enzimas relacionadas
con el metabolismo intermediario de carbohidratos, lípidos y proteínas.
Justificación
Los peces empleados en acuicultura están sometidos a numerosos procesos de estrés asociados a la propia
actividad que generan situaciones que comprometen el bienestar de los animales. Por este motivo, se utilizan
anestésicos para atenuar o mitigar el estrés ocasionado y reducir las respuestas fisiológicas (Weber, 2009). Existe
una gran variedad de compuestos químicos (2-fenoxietanol, MS-222, etc.) que se emplean habitualmente; pero,
dada la regulación legal existente y los potenciales efectos negativos sobre los animales y los propios
consumidores, cada vez se tiende a usar más compuestos de origen natural (aceite de clavo, eugenol, etc.) que no
presentan estos inconvenientes. Nuestro estudio consistió en la evaluación del aceite esencial de lipia (Lippia alba)
en la lubina (Dicentrarchus labrax), con el objetivo de determinar los tiempos de sedación y anestesia, así como los
posibles cambios fisiológicos originados en animales sometidos a una situación de transporte simulado con dosis de
sedación.
Material y métodos
En un primer experimento, se determinaron los tiempos de sedación, anestesia y recuperación para juveniles de D.
labrax según los criterios establecidos por Small (2003). Se probaron 9 concentraciones distintas (25, 35, 50, 100,
200, 300, 400, 600 y 800 μL L-1) (n = 9; peso medio: 57,45 ± 9,77 g), en base al trabajo de Toni et al. (enviado) con
Sparus aurata. Posteriormente, en una segunda experiencia, se evaluaron las posibles modificaciones fisiológicas
generadas en una situación de estrés por transporte simulado durante 3 y 6 horas, con 4 diferentes tratamientos (n =
8) (control, 450 μL etanol L-1 y 25 y 50 μ L L-1 de AELA), además del control a tiempo inicial. Al final de cada periodo
de transporte simulado se recogieron muestras de plasma para analizar diversos parámetros de estrés (cortisol,
glucosa, lactato), así como muestras de hígado para determinar los metabolitos (glucógeno, triglicéridos) y la
actividad de diversas enzimas relacionadas con el metabolismo intermediario de carbohidratos, lípidos y proteínas.
Resultados y discusión
La concentración ideal obtenida para inducir la sedación en los juveniles de D. labrax con AELA fue de 25 μ L L-1,
acorde a lo establecido por Toni et al. (enviado) para S. aurata. Sin embargo, la concentración ideal determinada
para anestesia (600 μL L-1) fue superior a lo establecido para otras especies. En la corvina (Argyrosomus regius) se
estableció una concentración ideal de anestesia de 200 μ L L-1 (Cárdenas, 2013) y en el caso de S. aurata de 100 μL
L-1 (Toni et al., enviado). Estos resultados muestran la resistencia de la lubina y sugieren un efecto especie-
dependiente del AELA. En cuanto a la efectividad del AELA como sedante en una situación de transporte simulado,
nuestros resultados mostraron como los parámetros relacionados con el estrés y el metabolismo intermediario
XV Congreso Nacional / I Congreso Ibérico de Acuicultura 213
variaron en función de la concentración de aceite y el tiempo de transporte. La Fig. 1 muestra los niveles de cortisol
y glucosa plasmáticos, así como el glucógeno y la actividad glucógeno fosforilasa (GPasa) en hígado. Estas
variaciones en el metabolismo energético y en los parámetros de estrés sugieren que durante las 3 primeras horas
la concentración de 25 μL L-1 de AELA sería efectiva para la sedación de los juveniles de D. labrax durante un
proceso de transporte; sin embargo a las 6 h parece que el aceite pierde su efectividad, originando un estrés
adicional sobre los animales.
Figura 1. A) Glucosa (mM), y B) cortisol (ng mL-1) plasmático; C) glucógeno (mg glucosa g peso fresco-1) y D)
actividad GPasa (U mg prot-1) hepática en los juveniles de D. labrax tras la simulación de transporte durante 3 h
(barras rellenas) y 6 h (barras rayadas). Todos los resultados se expresan como media ± SEM (n = 8). Las letras
minúsculas representan diferencias significativas para cada tratamiento a las 3 h; las letras mayúsculas para cada
tratamiento a las 6 h (ANOVA a una vía, p < 0.05). AELA: Aceite Esencial de Lippia alba.
Bibliografía
Cárdenas Romo, C. 2013. Efecto de los anestésicos aceite de lippia (Lippia alba) y aceite de clavo (Eugenia
aromatica) en juveniles de corvina (Argyrosomus regius). Tesis de Máster, Universidad de Cádiz. 64 pp.
Small B.C. 2003. Anesthetic efficacy of metomidate and comparison of plasma cortisol responses to tricaine
methanesulfonate, quinaldine and clove oil anesthetized channel catfish Ictalurus punctatus. Aquaculture 218:
177-185.
Toni C., J.A. Martos-Sitcha , B. Baldisserotto, B.M. Heinzmann, L. de Lima Silva, G. Martinez-Rodriguez y J.M.
Mancera. (enviado). Sedative effect of 2-phenoxyethanol and essential oil of Lippia alba on stress response in
gilthead sea bream (Sparus aurata).
Weber, R.A., J. B. Peleteiro, L.O. García Martín y M. Aldegunde. 2009. The efficacy of 2-phenoxyethanol,
metomidate, clove oil and MS-222 as anaesthetic agents in the Senegalese sole (Solea senegalensis, Kaup
1858). Aquaculture 288: 147-150.
Agradecimientos
Este trabajo ha sido financiado por el proyecto AGL2013-48835-C2-1-R (MINECO, España) concedido a J.M.M.
Glucosa (mM)
0
500
1000
1500
Control
t0Control Etanol AELA 25 AELA 50
3 h 6 h 3 h 6 h 3 h 6 h 3 h 6 h
abA ab aa
b
A
AB
B
AB
Glucógeno
(mg glucosa g peso fresco1)
A B
C D
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