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Ecología Aplicada, 7(1,2), 2008 Presentado: 31/07/2008
ISSN 1726-2216 Aceptado: 09/10/2008
Depósito legal 2002-5474
© Departamento Académico de Biología, Universidad Nacional Agraria La Molina, Lima – Perú
.
EFECTO ECOTOXICOLÓGICO DEL METOMILO EN Corydoras LACÉPÈDE, 1803
(SILURIFORMES: CALLICHTHYIDAE) Y SU CARACTERIZACIÓN
LEUCOCITARIA
ECOTOXICOLOGICAL EFFECT OF METHOMYL ON Corydoras LACÉPÈDE, 1803
(SILURIFORMES: CALLICHTHYIDAE) AND ITS LEUKOCYTE
CHARACTERIZATION
José Iannacone
1,2
y Lorena Alvariño
2
Resumen
El metomilo es un carbamato inhibidor de la acetilcolinesterasa que actúa por contacto-
sistémico y es uno de los agroquímicos de mayor uso como insecticida-acaricida para el control de
un amplio rango de plagas agrícolas. En el Perú es escasa la información publicada de aspectos
hematológicos de osteictios para su uso potencial como biomarcador fisiológico de respuesta
subletal en bioensayos ecotoxicológicos. Los objetivos del presente trabajo fueron: 1) evaluar el
efecto ecotoxicológico agudo del metomilo sobre el pez amazónico ornamental Corydoras
arcuatus Elwin, 1939 (Callichthyidae) a 2, 4, 6, 8, 24 y 48 h de exposición, y 2) caracterizar los
leucocitos de C. arcuatus, Corydoras leucomelas Eigenmann & Allen, 1972 y Corydoras
leopardus Myers, 1933, y determinar los valores de referencia cuantitativos. Los bioensayos con
metomilo se realizaron en envases plásticos de 1000 mL. Se encontraron valores de CL
50
(mg IA
L
-1
) de 10.84; 3.18; 0.28; 0.01; 0.002 y < 0.002 a 2, 4, 6, 8, 24 y 48 h, respectivamente. La TL
50
a
la concentración más baja de 3.2 mg L
-1
fue 4.83 h. La extracción de la sangre, se llevó a cabo por
el método de punción cardiaca, realizándose luego extensiones teñidas con Giemsa y con Wright.
No se encontraron diferencias en los recuentos leucocitarios observados en ambos procedimientos
de tinción, pero con ligeras diferencias entre sexos. No se encontraron diferencias significativas
entre las especies de Corydoras examinadas. Cuantitativamente, se encontró la siguiente
secuencia: linfocitos (64.6%)> monocitos (18.4%)> neutrófilos (8.2%)> eosinófilos (5.2%)>
basófilos (3.2%). Los parámetros hematológicos obtenidos son un aporte al conocimiento de este
género y pudieran potencialmente ser empleados como biomarcadores de respuesta subletal para
los bioensayos ecotoxicológicos.
Palabras claves: Metomilo, efecto letal, riesgo ambiental, Amazonía, Corydoras, leucocitos,
parámetros hematológicos
Abstract
Methomyl is a carbamate acetylcholinesterase inhibitor that acts by contact and systemically
and is one of the agrochemicals of mayor use as insecticide-acaricide to control a broad spectrum
of agricultural pests. Peru lacks information regarding hematological aspects of bony fishes which
could be used as potential physiological biomarkers of sub lethal responses in ecotoxicological
bioassays. Aims of the current research were: 1) evaluate acute toxicological effect of methomyl
on an ornamental Amazonian fish Corydoras arcuatus Elwin, 1939 (Callichthyidae) at 2, 4, 6, 8,
24 and 48 h exposure, and 2) characterize leukocytes of C. arcuatus, Corydoras leucomelas
Eigenmann & Allen, 1972 and Corydoras leopardus Myers, 1933, and determinate quantitative
reference values. Bioassays with methomyl were performed on plastic pots of 1000 mL. Values
of LC
50
(mg AI L
-1
) were 10.84; 3.18; 0.28; 0.01; 0.002 and < 0.002 at 2, 4, 6, 8, 24 and 48 h,
respectively. LT
50
at the lower concentration of 3.2 mg L
-1
was 4.83 h. Blood extraction, was done
by the cardiac puncture method, and smears were stained with Giemsa and Wright. Differences on
leukocytes counts were not observed in both staining procedures, but slight differences between
sexes were found Non significant differences between species of Corydoras were observed.
Quantitatively, the following sequence was found: lymphocytes (64.6%)> monocytes (18.4%)>
neutrophiles (8.2%)> eosinophiles (5.2%)> basophiles (3.2%). Blood parameters obtained
contribute to the knowledge of this genus and could be potentially employed as biomarkers of
sublethal responses in ecotoxicological bioassays.
Key Words: Amazonía, Corydoras, lethal effect, methomyl, leukocytes, hematological
parameters, environmental risk
ECOTOXICOLOGIA DE METOMILO EN Corydoras.
Diciembre 2008
__________________________________________________________________________________________
Introducción
El metomilo es un carbamato inhibidor de
acetilcolinesterasa que actúa por contacto-sistémico
(Strickman, 1985; Farré et al., 2002; Michaud &
Grant, 2003; Li et al., 2008) y es uno de los
agroquímicos de mayor uso como insecticida-
acaricida en el Perú para el control de un amplio rango
de plagas agrícolas (Morishita 2001; El-Aw et al.,
2008). Es usado también como molusquicida,
garrapaticida y contra arañas; así como en cebos para
el control de la mosca doméstica. La mayoría de sus
productos comerciales están clasificados por la
USEPA (Agencia de Protección Ambiental de la
Estados Unidos) como clase I. El metomilo en el Perú
es clasificado como extremadamente tóxico Clase Ib.
Existen evidencias que el metomilo es un plaguicida
que tiene efecto como Disruptor endocrino (DE). La
dosis de aplicación de metomilo para el control de
plagas en la agricultura es como promedio de 1.35 g
IA L
-1
(Panger & Echevarría, 2007).
La ictiohematología es una disciplina que estudia
la sangre en los peces, que incluye a la célula
sanguínea desde la perspectiva morfológica,
bioquímica y funcional y a los órganos
hematopoyéticos, las enfermedades relacionadas y
cualquier fenómeno o patología que relacione las
células y sus órganos productores (Valenzuela et al.,
2003, 2008). Las oscilaciones en las condiciones
abióticas como los tóxicos causan modificaciones
fisiológicas en los niveles de algunos parámetros
sanguíneos (Centeno et al., 2007; Valenzuela et al.,
2002). En adición, se ha determinado que estos
parámetros pueden estar también influenciados por
factores tales como la especie, la edad, el fotoperíodo,
el estado nutricional y la metodología empleada
(Hrubec et al., 2000; Iannacone et al., 2006a,b;
Centeno et al., 2007). La variación de los parámetros
hematológicos pueden ser utilizados como indicadores
de contaminación (Landman et al., 2005).
Corydoras Lacépède, 1803 (Siluriformes:
Callichthyidae) conocido como "basurerito", "limpia
fondos“ o “shirui”, es un pez amazónico característico
de aguas limpias (Britto & Lima, 2003). Es un género
bentónico de corrientes lentas y de fondos arenosos.
Las especies más importantes del género tienen
importancia en acuarofilia o como peces ornamentales
(Kaatz & Lobel, 1999; Ortiz & Iannacone, 2008).
Corydoras tiene 143 especies validas (Reis, 2003;
Artoni et al., 2006), de las cuales 26 se han registrado
para el Perú. Está distribuido en Sudamerica en una
diversidad de hábitats. En Corydoras paleatus Jenyns,
1842, se ha evaluado la toxicidad del fenitrotion,
metilparation y de las microcistinas (Fanta et al.,
2003; Sarikaya et al., 2004; Cazenave et al., 2006).
Los objetivos del presente trabajo fueron: 1)
evaluar el efecto toxicológico letal del metomilo sobre
el pez amazónico ornamental Corydoras arcuatus
Edwin, 1939 (Callichthyidae) a 2, 4, 6, 8, 24, 48 h de
exposición, y 2) determinar los valores de referencia
cuantitativos de los leucocitos de C. arcuatus,
Corydoras leucomelas Eigenmann & Allen, 1972 y
Corydoras leopardus Myers,1933.
Materiales y métodos
Metomilo
CAS = 16752-77-5. La formulación de polvo
soluble (PS) del metomilo, S-metil N-
(metilcarbamoyloxi) tioacetimidato (C
5
H
10
N
2
O
2
S, PM
= 162,21) empleada, fue representativa del mercado
Nacional Peruano (Lannate® 90, Categoría Ib,
extremadamente tóxica). El metomilo presenta una
toxicidad aguda oral en ratas de DL
50
= 17 mg Kg
-1
y
una toxicidad aguda dermal de DL
50
> 5000 mg Kg
-1
.
Su punto de ebullición es 79°C, su presión de vapor es
6.65 mPa a 25° C, su constante de la Ley de Henry fue
1.8 x 10-10 atm m
3
/mol, su coeficiente de partición
octanol-agua (Kow) = 1.29-1,33, su densidad a 20°C
es de 1.3, su solubilidad en agua es de 57.9 g L
-1
a 25°
C, no es reactiva, no es corrosiva y no es volátil. Su
GUS (Grado de difusión a las aguas subterráneas)
indica un valor intermedio de 1.57. No es considerado
mutagénico, teratogénico o carcinogénico. Su dosis de
aplicación promedio en los ecosistemas agrícolas es de
0.22- 1.8 lb·acre
-1
.
Bioensayos ecotoxicologicos
Los especimenes adultos de C. arcuatus “shirui”
procedentes de Iquitos, Loreto, Perú fueron obtenidos
de un acuario del distrito de Breña, Lima, Perú.
Cuatrocientos peces fueron trasladados al laboratorio
de Ecofisiología Animal de la Facultad de Ciencias
Naturales y Matemática de la Universidad Nacional
Federico Villarreal en baldes de plástico de 4 L de
capacidad. Antes de la aclimatación en el laboratorio
se descartaron los individuos que hubieran sufrido
daños mecánicos durante el transporte. Los peces
adultos fueron colocados una semana previa a las
pruebas ecotoxicológicas en acuarios de vidrio de 90
cm de largo x 40 cm ancho x 30 cm de alto, en agua
de grifo declorinada de Lima, Perú reposada y
oxigenada (Oxígeno disuelto > 8 mg L
-1
) (Castillo,
2004). Se implantó un calentador en el acuario para
alcanzar la temperatura de 25-26°C. Los parámetros
físicos como la temperatura y el pH (7.6-7.9) del
cultivo parcial se midieron tres veces por semana. El
fotoperiodo fue aproximadamente de 12:12. Los peces
seleccionados presentaron una apariencia externa
saludable para su uso en los ensayos toxicológicos y
presentaron los siguientes parámetros biométricos:
Longitud total (cm) = 4.81 ± 0.29; longitud estándar
(cm) = 3.88 ± 0.25, y peso (g) = 3.08 ± 0.36. Los
peces no fueron alimentados al menos 24 h antes del
experimento, ni tampoco durante el experimento con
el objetivo de mantener una adecuada calidad del
agua. Las pruebas de toxicidad se realizaron con
cuatro repeticiones, y cinco concentraciones más el
control. Se emplearon cinco concentraciones de
J. IANNACONE Y L. ALVARIÑO
Ecol. apl. Vol. 7 N
os
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metomilo (IA): 3,2 mg IA L
-1
, 16 mg IA L
-1
, 80 mg IA
L
-1
, 400 mg IA L
-1
y 2000 mg IA L
-1
. Se empleó un
factor de dilución de 0.2. Los bioensayos se realizaron
en envases plásticos de 1000 mL a los que se
transfirieron 5 individuos y se realizaron lecturas a 2,
4, 6, 8, 24, 48 h de exposición. Se usó como criterio
de mortalidad la carencia de movilidad. Los peces
muertos fueron removidos inmediatamente. La
eficacia de los tratamientos y las repeticiones se
evaluó a través de un análisis de varianza (ANDEVA)
de dos vías, previa transformación de los datos a raíz
cuadrada del arcoseno. En el caso de existir
diferencias significativas entre los tratamientos y
entre las repeticiones se realizó la prueba de Tukey.
Los cálculos de la mortalidad corregida se
realizaron mediante la fórmula de Abbott en caso de
muerte natural en el testigo cuando la mortalidad fue
menor al 20% (Iannacone & Alvariño, 2007) Los
valores de CL
50
(Concentración letal media) en mg L
-1
y TL
50
(Tiempo letal medio) en h fueron calculados
usando el programa computarizado Probit versión 1.5
(Weber, 1993). El modelo de regresión fue verificado
usando el Chi-cuadrado. Se emplearon los modelos
GENEEC (Parker et al., 1995), PRZM-2 (Carousel et
al., 2005) y EXAMII (Burns, 2004) para determinar la
CAE (concentración ambiental esperada) del
metomilo en el agua, y se calculó el cociente de riesgo
(CR) en el ambiente acuático (Iannacone et al., 2007;
Panger & Echevarría, 2007).
Caracterización leucocitaria
34 individuos de Corydoras exportados como
ornamentales fueron obtenidos de un acuario de Jesús
María, Lima, Perú: C. leucomelas (n = 26), C.
arcuatus (n = 1) y C. leopardus (n = 7). Los peces
fueron aclimatados en acuarios de 60 cm x 20 cm x 30
cm por 48 h en el laboratorio, en agua de grifo
declorinada de Lima, Perú con las características
físico-químicas señaladas por Iannacone et al.
(2006b). A cada ejemplar se le determinó el sexo
(machos, hembras o indiferenciados), se registró su
longitud total (cm), longitud estándar (cm), peso
corporal (P en g). Posteriormente se les anestesió con
Lidocaína al 2% (Xilocaína®), y se realizó la
extracción de la sangre mediante el método de
punción cardiaca, realizándose luego extensiones
teñidas con Giemsa y con Wright, y el recuento
leucocitario a un microscopio óptico con aumento de
1000x en un total de 100 células (Orün & Erdemil,
2002). Para todos los parámetros analizados se
determinó su media y su desviación estándar. Los
análisis estadísticos se realizaron para los 34
individuos de Corydoras, para C. leucomelas y para
C. leopardus. No se efectuaron para C. arcuatus por
solo evaluarse un solo individuo. Se empleó el
coeficiente de correlación de Pearson (r) entre los
parámetros biométricos de Corydoras y el conteo
leucocitario. Se comparó si el número de los diferentes
leucocitos eran diferentes entre los machos, hembras e
indiferenciados empleando la prueba de ANDEVA y
la prueba de Tukey. En adición, se usó la prueba de t
de student para datos pareados para comparar si
existen diferencias entre el recuento leucocitario entre
la coloración Giemsa y Wright (Iannacone et al.,
2006b). La prueba t de student y la prueba de Levene
fueron empleadas para determinar si existían
diferencias entre los parámetros biométricos y el
conteo leucocitario de C. leucomelas y C. leopardus.
No se determinaron las diferencias significativas en la
caracterización leucocitaria entre hembras, machos e
indeferenciados para cada especie de Corydoras por
separado debido al bajo número de especimenes en
alguna de las tres categorías.
Se usó el paquete estadístico SPPS, versión 15.00
para el cálculo de los todos los estadísticos
descriptivos e inferenciales.
Resultados y Discusión
Bioensayos ecotoxicologicos con metomilo
Los porcentajes de mortalidad de C. arcuatus a las
cinco concentraciones de metomilo y a los seis
periodos de exposición es indicado en la Tabla 1. Se
encontraron los siguientes valores de CL
50
(mg de
metomilo L
-1
) de 10.84; 3.18; 0.28; 0.01; 0.002 y <
0.002 a 2, 4, 6, 8, 24 y 48 h, respectivamente sobre C.
arcuatus. La TL
50
a la concentración más baja de 3,2
mg L
-1
fue 4,83 h. La Tabla 2 que incluye a C.
arcuatus, muestra que esta especie resultó ser
altamente sensible al metomilo en comparación a otras
28 especies dulceacuícolas (10 peces; 9 crustáceos; 4
insectos y 5 moluscos) (Munn et al., 2006; Li et al.,
2008). Se observó que los insectos presentaron mayor
sensibilidad que los crustáceos, y éstos a su vez que
los peces, y éstos últimos que los moluscos (F= 4.90;
P = 0.01) (Tabla 2).
De acuerdo a la clasificación de la toxicidad de los
pesticidas en los organismos acuáticos, el metomilo es
clasificado como un plaguicida altamente tóxico (Li
et al., 2008). La toxicidad del metomilo en peces
varía entre 320 mg·L
-1
para Ictalurus punctatus y 5425
mg·L
-1
para Oncorhynchus clarki (Tabla 2). C.
arcuatus es 160 y 2713 veces más sensible al
metomilo que I. punctutus y O. clarki.
La mayor toxicidad y sensibilidad al metomilo
encontrada en C. arcuatus en términos de CL
50
en
comparación a las otras 28 especies dulceacuícolas
podría deberse a que esta especie de pez amazónico
del Neotrópico carece de un adecuado sistema de
detoxificación del metomilo, el cual inhibe la
actividad de la acetilcolina (AchE) y de la glutation S-
transferasa (GTSs) produciendo una alta sensibilidad a
este carbamato, como ha sido observado en otras
especies de peces (Li et al., 2008).
Al realizar una evaluación de riesgo del metomilo
empleado a C. arcuatus, se muestran según el modelo
GENEEC para determinar la CAE (concentración
ambiental esperada) valores de 409. 386 y 350 ug·L
-1
a
ECOTOXICOLOGIA DE METOMILO EN Corydoras.
Enero - Diciembre 2008
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un nivel pico, 21 días y 56 días, respectivamente
(Panger & Echevarría, 2007). Por ende, el cociente de
riesgo (CR) fue de 204.5; 193 y 175 a un nivel pico,
21 días y 56 días, respectivamente. De igual manera al
usar el procedimiento PRZM-2/EXAMII para
determinar la CAE, se obtuvieron valores de 99, 95,
85 y 79 ug·L
-1
a un nivel pico, 21 días, 56 días y 90
días, respectivamente (Panger & Echevarría, 2007).
Así, al aplicar el CR, se obtuvieron valores de 49.5;
47.5; 42.5 y 39.5 a un nivel pico, 21 días, 56 días y 90
días, respectivamente. De esta manera, ambos
modelos GENEEC y PRZMZ/EXAMII que simulan el
destino y transporte del metomilo en el ambiente
acuático evidencian según los CR que presentaría un
alto riesgo acuático para las comunidades ícticas
neotropicales. Sin embargo, los valores de Kow del
metomilo nos señalan una baja tendencia a la
bioacumulación en peces.
Caracterizacion leucocitaria
La Tabla 3 indica tres parámetros biométricos
(longitud total, longitud estándar y peso), de sexo
(macho, hembra e indiferenciado) y de recuento
leucocitario (linfocitos, monocitos, neutrófilos,
eosinófilos y basófilos) por Giemsa y Wright para
Corydoras spp., C. leucomelas, C. arcuatus y C.
leopardus.
Se observaron diferencias en la longitud total,
longitud estándar y el peso de los peces machos,
hembras e indiferenciados de Corydoras spp. (Tabla
4). Observándose que las hembras presentaron mayor
longitud total, longitud estándar y peso que los
machos e indiferenciados (Tabla 4). No se encontraron
diferencias significativas en el recuento leucocitario
de linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos entre
los peces machos, hembras e indiferenciados de
Corydoras spp. Solo se vio diferencias entre el
número de neutrófilos por Giemsa y Wright con
relación al sexo de los peces (Tabla 4).
Al comparar la longitud total, el peso y el recuento
leucocitario (linfocitos, monocitos, neutrófilos,
eosinófilos y basófilos) no se encontraron diferencias
significativas entre C. leucomelas y C. leopardus (t =
0.09-1.83; P = 0.07-0.92; Prueba de Levene W = 0.11-
4.20; P = 0.06-0.74). Solo se observó diferencias
significativas entre la longitud estándar de C.
leucomelas (3.56± 0.4 cm) y C. leopardus (4.17 ±
0.52 cm) (t= 3.30; P= 0.002).
Según la prueba de t de Student no se encontraron
diferencias significativas entre el número de linfocitos,
monocitos, neutrófilos, eosinófilos y basófilos
evaluados mediante la técnica de coloración de
Giemsa y Wright (Tabla 5). La longitud total solo se
vio correlacionada positivamente con el número de
linfocitos (r= 0.46; P = 0.009) y negativamente con el
número de neutrófilos (r = -36; P = 0.04).
Los leucocitos, en general, presentaron
características similares a las descritas para otros
peces amazónicos. Las células sanguíneas de los frotis
que se analizaron en las lecturas fueron similares
morfológicamente a las descritas para Shroedenchthys
chilensis (Guichenot 1848) (Filho et al., 1992;
Valenzuela et al., 2003), Salminus maxillosus
Valenciennes 1840 (Veiga et al., 2000; Ranzani-Paiva
et al., 2003), Chaetodipterus faber (Broussonet 1782)
(Bastardo & Barberán, 2004) y Astronotus ocellatus
(Agassiz 1831) (Iannacone et al., 2006a). En el
recuento se observó un predominio de los linfocitos,
lo cual es concordante con lo encontrado en otros
peces teleósteos como Pimelodus maculatus Lacèpéde
1803, Synbranchus marmoratus (Bloch 1795), Mugil
platanus Günther 1880, Oncorhynchus mykiss
(Walbaum 1792), A. ocellatus, Pterophyllum scalare
(Lichtenstein 1823) y Salminus affinis (Steindachner
1880) (Örün & Erdemil, 2002; Ranzani-Paiva et al
.,
2003; Valenzuela et al., 2003; Iannacone et al.,
2006a,b; Atencio-García et al., 2007). Se encontraron
ligeras diferencias en los recuentos leucocitarios
observados en ambos procedimientos de tinción y
entre sexos. No se encontraron diferencias
significativas entre las tres especies de Corydoras
examinadas. Cuantitativamente, se encontró la
siguiente secuencia: linfocitos (64.6%)> monocitos
(18.4%)> neutrófilos (8.2%)> eosinófilos (5.2%)>
basófilos (3.2%). Los parámetros hematológicos
obtenidos en Corydoras spp. son un aporte al
conocimiento de este género íctico y pudieran
potencialmente ser empleados como biomarcadores de
respuesta subletal en bioensayos ecotoxicológicos.
Literatura citada
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Tablas citadas en el texto
Tabla 1. Porcentaje de mortalidad de C. arcuatus expuesta al
metomilo.
mg·L
-1
2 h 4 h 6 h 8 h 24 h 48 h
0 0a 0a 0a 0a 0a 0a
3.2 13.3a 33.3b 66b 80b 81.5b 86.6b
16 80b 86.6c 86.6c 86.6bc 86.6bc 95b
80 81.5b 87.5c 87.5c 87.5bc 90bc 100b
400 85b 90c 90c 90bc 90bc 100b
2000 87.5b 93.7c 100c 100c 100c 100b
Letras minúsculas iguales en una misma columna indican que los promedios son
estadísticamente iguales (p≥0.05) según la prueba de Tukey.
Tabla 2. Valores comparativos de CL
50
con 28 especies acuáticas expuestas al metomilo.
Grupo Especie Duración N° ensayos CL
50
ug L
-1
Pez Cyprinodon variegatus (Lacépède, 1803) 96 2 1060
Pez Ictalurus punctatus (Rafinesque, 1818) 96 9 320
Pez Lepomis macrochirus Rafinesque, 1819 96 18 850
Pez Micropterus salmoides (Lacépède, 1802) 96 4 1005
Pez Oncorhynchus clarki (Richardson, 1836) 96 2 5425
Pez Oncorhynchus mykiss Walbaum, 1792 96 19 1600
Pez Pimephales promelas Rafinesque, 1820 96 10 1800
Pez Salmo salar (Linnaeus 1758) 96 6 1200
Pez Salvelinus fontinalis (Mitchill, 1814) 96 5 1500
Pez Pseudorasbora parva
(Temminck et Schlegel, 1846)
96 1 425
Pez Corydoras arcuatus
Elwin, 1939 (Este trabajo, 2008)
48 1 <2
Insecta Chironomus plumosus Linnaeus, 1758 96 1 32
Insecta Isogenus Newman, 1833 sp. 96 2 186
Insecta Pteronarcella badia (Hagen, 1874). 96 6 60
Insecta Skwala sp. Ricker 96 3 29
Crustácea Daphnia magna (Straus, 1820) 48 8 8,8
Crustácea Acartia tonsa Dana 1849 96 1 410
Crustácea Cyclops strenuus (Fischer 1851). 96 1 190
Crustácea Eurytemora affinis (Poppe, 1880) 96 1 290
Crustácea Gammarus italicus
Goedmakers & Pinkster, 1977
96 1 47
Crustácea Gammarus pseudolimnaeus Bousfield, 1958 96 6 920
Crustácea Gammarus pulex
(Linnaeus, 1758) 96 1 760
Crustácea Palaemonetes vulgaris (Say, 1818) 96 1 49
Crustácea Procambarus acutus (Girard 1852) 96 1 1000
Mollusca Bulinus truncatus (Audouin, 1827) 96 1 870
Mollusca Cipangopaludina malleata (Reeve, 1863) 96 1 25000
Mollusca Indoplanorbis exustus Deshayes 1834 96 1 6600
Mollusca Physella acuta (Draparnaud,1805) 96 1 18000
Mollusca Semisulcospira libertina (Gould, 1859) 96 1 12000
J. IANNACONE Y L. ALVARIÑO
Ecol. apl. Vol. 7 N
os
1 y 2, pp. 55-61
__________________________________________________________________________________________
61
Tabla 3. Parámetros biométricos y de recuento leucocitario de varias especies de
Corydoras.
Parámetros
Las 3
especies de
Corydoras
C. leucomelas C. arcuatus C. leopardos
Longitud total (cm) 4.9 4.8 6 5.1
Longitud estándar (cm) 3.7 3.5 4.6 4.1
Peso (g) 2.9 2.9 4.1 3.01
% Linfocitos (Giemsa) 64.8 63.5 ND 69
% Linfocitos (Wright) 64.4 62.3 61 76
% Monocitos (Giemsa) 18.6 17.9 ND 22.7
% Monocitos (Wright) 18.1 18.9 11 15.8
% Neutrofilos (Giemsa) 8.2 9.7 ND 2.2
% Neutrofilos (Wright) 8.1 9.2 6 2.8
% Eosinófilos (Giemsa) 4.9 5.6 ND 3.0
% Eosinófilos (Wright) 5.5 6.5 0 1.4
% Basófilos (Giemsa) 3.3 3.2 6 3.0
% Basófilos (Wright) 3.1 2.2 22 4.0
Macho (Nro.) 13 10 1 2
Hembra (Nro.) 7 2 0 5
Indiferenciado (Nro.) 14 14 0 0
Especimenes (Nro.) 34 26 1 7
Tabla 4. Comparación entre tres parámetros biométricos, número de neutrófilos y el
sexo de Corydoras spp. F = Estadístico de Fisher. P = Probabilidad.
Sexo Parámetros
Macho
(n=13)
Hembras
(n=7)
Indiferenciados
(n=14)
F P
Longitud total (cm) 5.15b 5.50b 4.62ª 8.62 0.001
Longitud estándar (cm) 3.78ab 4.22b 3.46ª 6.63 0.004
Peso (g) 3.35b 3.56b 2.35ª 8.80 0.001
Neutrófilos (Giemsa) (%) 14.5c 1.80a 5b 6.57 0.006
Neutrófilos (Wright) (%) 13.5c 0.00a 6.28b 4.22 0.025
Letras minúsculas iguales en una misma fila indican que los promedios son estadísticamente iguales (p≥0.05)
según la prueba de Tukey.
Tabla 5. Comparación del % leucocitario de
Corydoras spp. según técnica de tinción empleada.
Solo se incluyeron 24 datos pareados, debido a que
en el resto de los recuentos leucocitarios solo se
obtuvo una sola lámina de Giemsa o de Wright. t = t
de Student para datos pareados. P. = Probabilidad.
%
Leucocitario
Tinción
Giemsa
Tinción
Wright
t P
Linfocito 64.2 67.3 0.89 0.37
Monocito 18.9 16.9 0.88 0.38
Neutrófilo 8.3 7.7 0.46 0.64
Eosinófilo 5.0 4.4 0.37 0.70
Basófilo 3.3 2.6 0.69 0.49
______________________________
1
Laboratorio de invertebrados. Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Ricardo Palma.
joseiannacone@yahoo.es
2
Laboratorio de Ecofisiología Animal. Facultad de Ciencias Naturales y Matemáticas. Universidad Nacional
Federico Villarreal. lalvarino@sedapal.com.pe
