Article

On the nature of Romanowsky dyes and the Romanowsky-Giemsa effect.

Clinical & Laboratory Haematology (Impact Factor: 1.3). 02/1979; 1(4):247-62. DOI: 10.1111/j.1365-2257.1979.tb01090.x
Source: PubMed

ABSTRACT This paper reviews the nature of Romanowsky staining and the relationship between Romanowsky dyes and the Romanowsky-Giemsa effect (RGE). On blood and bone marrow smears the RGE is characterized by a purple colouration of nuclei and neutrophil granules. The nuclear purple contrasts strongly with the blue cytoplasmic staining of cells rich in RNA. Requirement for the occurrence of RGE are: I A cationic dye: The best dye is azure B and, though azure A gives the nuclear purple colour, the cytoplasmic blue is inferior. No other cationic dye such as methylene blue is suitable. 2 An anionic dye: Most commonly eosin Y is used, but it can be replaced by the erythrosins. Full halogenation of the fluorescein (four atoms of bromine or iodine) is not necessary. Phloxine and rose bengal are unsuitable. 3 An appropriate substrate: These are proteins with acidic side groups or proteins bound to a polyanion. For the interaction with the dyes substrates must provide a suitable three-dimensional network which is why the RGE is not obtained in solutions. A tentative theory of RGE is advanced and briefly discussed.

25 Followers
 · 
838 Views
  • [Show abstract] [Hide abstract]
    ABSTRACT: Das Mikroskop war das wichtigste Instrument des Hämatologen bis in die Mitte des letzten Jahrhunderts. In den 60er-Jahren wurden Methoden der Zytogenetik und der Zellkultivierung eingeführt, das Philadelphia-Chromosom beschrieben und die CML als Stammzellerkrankung erkannt. Die beiden folgenden Jahrzehnte waren neuen molekulargenetischen Methoden, den Blots und der PCR, gewidmet. Heute reden wir von Oligos und Chips, am Himmel ziehen Proteomics und Degradomics auf. Ist das Mikroskop ein Ladenhüter? Wer würde heute jungen Mitarbeitern empfehlen, sich schwerpunktmäßig mit der Morphologie von Blutund Knochenmarkzellen zu beschäftigen? Und doch ist die Morphologie das Herzstück der klinischen Hämatologie geblieben. Heute wie vor 50 Jahren will sie erarbeitet und ein Stück erobert werden.
  • [Show abstract] [Hide abstract]
    ABSTRACT: Mixtures of polychrome methylene blue-eosin Y (i.e., Giemsa stain) are widely used in biological staining. They induce a striking purple coloration of chromatin DNA (the Romanowsky-Giemsa effect), which contrasts with the blue-stained RNA-containing cytoplasm and nucleoli. After specific prestaining treatments that induce chromatin disorganization (giving banded or harlequin chromosomes), Giemsa staining produces a differential coloration, with C- and G-bands appearing in purple whereas remaining chromosome regions are blue. Unsubstituted (TT) and bromo-substituted (BT) DNAs also appear purple and blue, respectively. The same occurs in the case of BT and BB chromatids.In addition to discussing the use of Giemsa stain as a suitable method to reveal specific features of chromosome structure, some molecular processes and models are also described to explain Giemsa staining mechanisms of chromatin.
    Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 01/2014; 1094:25-38. DOI:10.1007/978-1-62703-706-8_3 · 1.29 Impact Factor
  • [Show abstract] [Hide abstract]
    ABSTRACT: Es wurden analysenreine Proben der Romanowsky-Farbstoffe Eosin Y, Erythrosin B und Tetrachlorfluoreszein hergestellt.Im DC der Farbstoffproben konnten keine Verunreinigungen nachgewiesen werden. Die Absorptionsspektren der Farbstoffdianionen in wriger alkalischer Lsung und der Farbstoffsuren in 95%igem Ethanol wurden bei sehr kleinen Farbstoffkonzentrationen gemessen und der molare Extinktionskoeffizient der lngstwelligen Absorptionsbande der monomeren Farbstoffspezies bestimmt (Tabelle 1). Die Extinktionskoeffizienten knnen zur Standardisierung von Farbstoffproben verwendet werden. Die Absorptionsspektren von Eosin Y hngen in wriger Lsung von der Farbstoffkonzentration ab. Aus der Konzentrationsabhngigkeit wurden mit einem neuen, sehr empfindlichen Verfahren zwei Assoziationsgleichgewichte ermittelt. Bereits in sehr verdnnter Lsung bilden sich Dimere, bei erhhter Konzentration Tetramere, Die Dissoziationskonstante der DimerenD in MonomereM betrgt bei pH=12, 293K:K 21=2,9 10–5 M; der TetramerenQ in DimereD:K 42=2,4 10–3 M. Aus den gemessenen Spektren von Eosinlsungen verschiedener Konzentration, pH=12, und den GleichgewichtskonstantenK 21,K 42 haben wir die Spektren der reinen Monomeren, Dimeren und Tetrameren bestimmt.M hat eine langwellige Absorptionsbande: [(v)\tilde]M = 19300\text cm - 1\tilde v_M = 19300{\text{ }}cm^{ - 1} , [(v)\tilde]D = 19300\text cm - 1\tilde v_D = 19300{\text{ }}cm^{ - 1} , [(v)\tilde]Q1 = 19100\tilde v_{Q1} = 19100 , [(v)\tilde]Q2 = 20200\text cm\text - 1\tilde v_{Q2} = 20200{\text{ cm}}^{{\text{ - 1}}} , [(v)\tilde]M = 19300\text cm - 1\tilde v_M = 19300{\text{ }}cm^{ - 1} , [(v)\tilde]D = 19300\text cm - 1\tilde v_D = 19300{\text{ }}cm^{ - 1} , [(v)\tilde]Q1 = 19100\tilde v_{Q1} = 19100 , [(v)\tilde]Q2 = 20200\text cm\text - 1\tilde v_{Q2} = 20200{\text{ cm}}^{{\text{ - 1}}} , Q1=1,65 x 105, Q2=1,96 x 105 M-1 cm-1. The absorption spectrum of the dimers is discussed by quantum mechanics.
    Histochemie 11/1982; 75(4):539-555. DOI:10.1007/BF00640605 · 2.93 Impact Factor