Article

Direct resolution of enantiomers in high-performance immunoaffinity chromatography under isocratic conditions

Department of Chemistry and Biochemistry, Northern Illinois University, DeKalb 60115, USA.
Analytical Chemistry (Impact Factor: 5.83). 06/2002; 74(9):2119-25. DOI: 10.1021/ac0157369
Source: PubMed

ABSTRACT This paper describes the application of stereoselective antibodies as tailor-made chiral selectors for the separation of enantiomers in HPLC under isocratic conditions. Stereoselective monoclonal antibodies to D- and L-alpha-amino acids, raised against protein conjugates of p-amino-D- and L-phenylalanine, were immobilized on a synthetic high-flow-through support material and used for rapid enantiomer separation of a number of amino acids at flow rates between 0.1 and 10 mL/min. Since separations could be performed in a mild buffer, column lifetime considerably exceeded that of classical immunoaffinity systems. Using an anti-D-amino acid antibody as chiral selector, the L-enantiomers eluted with the void volume, while the D-enantiomers eluted second. Inverted elution orders were obtained on chiral stationary phases prepared from an anti-L-amino acid antibody. These results demonstrate, for the first time, that antibody-based chiral stationary phases are useful for routine enantiomer separation under true high-performance chromatographic conditions.

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    ABSTRACT: We propose a three-phase approach to test for evidence of life in extraterrestrial samples. The approach capitalizes on the flexibility, sensitivity, and specificity of antibody-antigen interactions. Data are presented to support the first phase, in which various extraction protocols are compared for efficiency, and in which a preliminary suite of antibodies are tested against various antigens. The antigens and antibodies were chosen on the basis of criteria designed to optimize the detection of extraterrestrial biomarkers unique to living or once-living organisms.
    Astrobiology 03/2005; 5(1):30-47. DOI:10.1089/ast.2005.5.30 · 2.51 Impact Factor
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    Biosensors - Emerging Materials and Applications, 07/2011; , ISBN: 978-953-307-328-6
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    ABSTRACT: La séparation d'énantiomères suscite un vif intérêt pour les industries pharmaceutiques, chimiques et agroalimentaires. Les dérivés lipophiles de la néamine ont été utilisés en tant que nouveaux ligands en chromatographie chirale par échange de ligands. Ce travail s'est attaché à étudier les propriétés énantiosélectives des dérivés lipophiles de la néamine en CLHP et en EC. Des dérivés de la néamine (néamine 4'-mono C18, néamine 5-mono C18, néamine 6-mono C18, néamine 3',6-di C18, néamine 4',5-di C18, ou néamine 3′,6-di méthylnaphthalène), ont été synthétisés au sein de notre laboratoire et immobilisés de manière non covalente sur des supports chromatographiques de type C18 et graphite poreux et utilisés avec succès en CCEL pour séparer divers couples d'énantiomères d'acides aminés, de nucléosides et de dipeptides. Néanmoins, certaines molécules hydrophobes, comme le tryptophane, sont éluées trop tardivement et par conséquent, ne sont pas détectables. Pour remédier à ce problème, nous avons considéré la propriété de la néamine 4'-mono C18 à former des micelles, et avons envisagé son utilisation en MEKC. Les énantiomères du tryptophane sont séparés en moins de cinq minutes. Les effets de différentes conditions (concentration du sélecteur chiral, addition de méthanol dans le tampon de migration) sur le temps de migration ont été évalués. Cette méthode d'analyse a ensuite été testée avec succès sur d'autres analytes hydrophobes tels que le 1-méthyl-tryptophane, la 3,5-diiodo-tyrosine et la 1-naphtyl-alanine.